一、药物代谢多态性酶的研究进展（论文文献综述）
冯钰益[1]（2021）在《细胞色素P450 2C9 R150H及R150L突变体的药物代谢性质研究》文中研究指明细胞色素P450 2C9（CYP2C9）是重要的I相药物代谢酶,代谢催化大约16%的常用临床药物。CYP2C9存在高度多态性,特别是单核苷酸多态性（SNP）,研究CYP2C9多态性对临床用药具有重要指导意义。CYP2C9*8（449G>A,R150H）和CYP2C9*27（G449>T,R150L）均为第449位碱基突变,其蛋白序列第150位精氨酸分别突变为组氨酸和亮氨酸,而有报道CYP2C9*8和CYP2C9*27催化苯妥英活性差异较大。为探究CYP2C9*8和CYP2C9*27对底物的代谢性质,本研究构建了表达量较高、体系成分清楚的杆状病毒-昆虫细胞表达体系,并成功建立了华法林、苯妥英、双氯芬酸的超高效液相-质谱联用（UPLC-MS/MS）方法,以酶动力学研究探究CYP2C9*8和*27不同底物的代谢动力学。结果显示建立的表达体系具有较高的具有生物活性的CYP450酶含量和POR酶含量,可较好地利用CO分光光度差谱法测定P450的含量,排除以P420形式存在的CYP含量对药物代谢研究的干扰影响,体系方法建立正确。UPLC-MS/MS检测方法专属性较好,在酶CYP2C9孵育体系中底物、其代谢物和内标伞形酮（UM）三者之间的峰面积不存在内源性干扰、峰型无拖尾和分叉现象等。酶动力学研究发现,相较野生型,CYP2C9*8对华法林、苯妥英、双氯酚酸的Km分别为1.241、35.87、3.59μmol/L,相对清除率分别为128.86%、97.22%、21.62%,而CYP2C9*27对华法林、苯妥英、双氯酚酸代谢的米氏常数Km分别为3.807、30.93、1.286μmol/L,相对清除率分别为43.07%、136.55%、79.13%。本研究通过分子生物学和细胞学建立良好的CYP2C9、POR体外表达系统模型,通过精准的分析仪器建立高效的测定代谢产物的方法,研究CYP2C9多态性酶的酶动力学和对药物的代谢,为探究CYP2C9多态性酶催化药物的机制提供了实验依据。
崔冰冰[2]（2020）在《急性缺血性脑卒中患者CYP3A4、CYP3A5、CYP2E1基因多态性对丁苯酞血药浓度及临床有效性的影响》文中研究指明目的探讨CYP3A4、CYP3A5、CYP2E1基因多态性对急性缺血性脑卒中患者丁苯酞稳态血药浓度的影响,同时观察基因多态性与丁苯酞治疗AIS患者临床有效性的关联性。方法1.HPLC-Orbitrap法检测急性缺血性脑卒中患者丁苯酞稳态血药浓度建立高效液相色谱串联静电场轨道阱高分辨质谱仪（HPLC-Orbitrap）对急性缺血性脑卒中患者血浆中丁苯酞进行定量检测,血浆样品预处理采用蛋白沉淀法;色谱柱:Thermo Hypersil GOLD LC columns C18（100mm×2.10mm,1.7μm）,流动相:甲醇-水（80:20）,采用等度洗脱,流速:0.3m L·min-1,进样量:10μL,检测总运行时间:5min;MS采用电喷雾正离子源ESI﹢和静电场轨道阱质量分析器采集,定量分析监测的离子对:m/z 191.11→173.10（丁苯酞）、m/z 285.08→222.11（地西泮）。通过以上方法测定急性缺血性脑卒中患者丁苯酞稳态血药浓度,利用Xcalibur、SPSS软件计算血药浓度并进行统计分析。2.CYP3A4、CYP3A5、CYP2E1基因多态性与急性缺血性脑卒中患者丁苯酞稳态血药浓度的相关性选择2019年3月到2019年10月联勤保障部队第九四〇医院神经内科符合纳入标准和排除标准的急性缺血性脑卒中患者。按要求对接受丁苯酞治疗的入组患者采用HPLC-Orbitrap法测定稳态谷浓度,通过Hi-SNP中高通量基因分型技术进行测序。检测入组患者外周血单核苷酸多态性（SNP）,包括:CYP3A4:*1G、*4、*5、*18、*19、*22;CYP3A5:*3、*4;CYP2E1:*5B、*2。根据受试者SNP基因多态性分型结果分组,利用SPSS17.0统计分析软件分析携带不同基因型受试者与丁苯酞稳态谷值血药浓度变化是否具有相关性。3.CYP3A4、CYP3A5、CYP2E1基因多态性与急性缺血性脑卒中患者丁苯酞临床有效性的相关性通过Hi-SNP中高通量基因分型技术对接受丁苯酞治疗的急性缺血性脑卒中患者进行测序,检测符合纳入标准和排除标准患者外周血CYP3A4、CYP3A5、CYP2E1基因多态性,根据人体内血药浓度检测结果的高低分为快代谢组和慢代谢组。疗效指标:NBP稳态血浆总抗氧化能力T-AOC水平和随访接受丁苯酞续贯治疗90天后受试者RANKIN改良量表（m RS）。利用SPSS17.0分析不同基因型受试者NBP临床疗效。结果1.NBP标准曲线回归方程:Y=-12261.6+235971X,r=0.9973,0.025-2.5μg·m L-1范围内线性关系良好,定量下限（LLOQ）为5ng·m L-1;回收率和基质效应考察结果:NBP在浓度高、中、低(1800、1000、10μg·m L-1)提取回收率分别为97.23%、100.82%、94.32%,RSD分别为8.68%、3.78%、5.19%;基质效应分别为101.55%、106.99%、105.08%,RSD分别为6.32%、4.96%、7.60%;精密度和准确度考察结果:丁苯酞高、中、低浓度,日内、日间RE均小于±15%,日内与日间RSD均在10%以内;稳定性考察结果:室温下放置6h、-20℃反复冻融3次、-80℃冻存1月、自动进样器放置12h条件下,RSD在0.29%-9.29%范围内、RE值小于±15%;计算受试者丁苯酞平均稳态血药浓度为0.488±0.524μg·m L-1。2.符合本研究入组标准的受试者共69例。本研究中69例患者CYP3A4*1G、CYP3A5*3、CYP2E1*5B等位基因频率为22.46%、24.64%、17.39%。CYP3A4*1G携带CC型患者丁苯酞稳态血药浓度为0.57±0.58μg·m L-1,TC型为0.32±0.35μg·m L-1,TT型为0.031μg·m L-1。与CC型相比,TC型血药浓度显着降低（P<0.05）;CYP3A5*3携带CC型患者丁苯酞稳态血药浓度为0.60±0.58μg·m L-1,TC型为0.31±0.33μg·m L-1、TT型为0.05±0.02μg·m L-1。三组基因型间NBP血药浓度具有统计学意义（P<0.05）,且CC型显着高于TC型、TT型;CYP2E1*5B携带GG型患者丁苯酞稳态血药浓度为0.56±0.59μg·m L-1,CG型为0.39±0.31μg·m L-1,CC型为0.099μg·m L-1。与GG型相比,GC型血药浓度显着降低（P<0.05）;对CYP3A4*1G和CYP3A5*3单倍型与丁苯酞血药浓度相关性分析显示,与慢代谢型（CCCC）相比,中间代谢型（TCTC）丁苯酞稳态血药浓度显着降低（P<0.05）;与慢代谢型（CCCC）相比,快代谢型（TTTT）无统计学意义（P>0.05）。3.CYP3A5*3 CC型T-AOC总抗氧化能力显着高于TT型,差异具有统计学意义（P<0.05）,其90日随访预后良好率及预后不良率与TT型/TC型差异均未见统计学意义（P>0.05）;CYP2E1*5B GG型T-AOC较GC型/CC型显着升高（P<0.05）,其预后良好率及预后不良率与CG型/CC型差异均未见统计学意义（P>0.05）。结论1.本研究建立的HPLC-Orbitrap法可用于急性缺血性脑卒中患者丁苯酞稳态血药浓度的检测;2.CYP3A4*1G、CYP3A5*3、CYP2E1*5B基因多态性可影响急性缺血性脑卒中患者NBP稳态血药浓度。进一步研究发现CYP3A4*1G和CYP3A5*3单倍型与NBP血药浓度相关,表现为慢代谢型（CCCC）患者血药浓度显着高于快代谢型（TTTT）。3.CYP3A5*3、CYP2E1*5B基因多态性与接受丁苯酞治疗的急性缺血性脑卒中患者血清T-AOC总抗氧化水平相关（P<0.05）;CYP3A4*1G、CYP3A5*3、CYP2E1*5B基因多态性与急性缺血性脑卒中患者丁苯酞良好预后未见有相关性。
胡焱垚[3]（2020）在《高寒地区高血压病患者CYP2D6、CYP3A5基因变异率及个体化治疗相关性研究》文中提出目的:研究高寒地区原发性高血压患者的CYP2D6、CYP3A5基因变异率及等位基因分布的频率,完善高寒地区CYP2D6、CYP3A5基因库,探讨高寒地区CYP2D6基因多态性与美托洛尔、CYP3A5基因多态性与氨氯地平药物代谢的关系,为个体化精准治疗提供有效的理论依据。方法:收集黑龙江省东部地区于佳木斯大学附属第一医院就诊的原发性高血压患者980例进行CYP2D6、CYP3A5基因型的检测,其中CYP2D6检测482例、CYP3A5检测498例作为实验组。随机选取黑龙江省东部地区在佳木斯大学附属第一医院体检的健康者100例进行CYP2D6及CYP3A5基因型的检测作为对照组。收集统计入组者的年龄、性别、居住地、居住时间等相关信息。分析实验组及对照组的CYP2D6、CYP3A5基因变异率及等位基因分布频率的差异,并与其它非高寒地区文献报道相关基因分布频率检测的结果进行对比分析,探讨高寒地区原发性高血压患者CYP2D6、CYP3A5基因变异率及等位基因分布的频率特点及与非高寒地区之间的差异。在原发性高血压患者CYP2D6检测482例中随机选取80名作为CYP2D6血药浓度组,编号为A组,给予每日晨起空腹口服美托洛尔缓释片47.5mg,第8日清晨服用药物2小时后采取外周血液,进行血药浓度及CYP2D6基因型检测。在原发性高血压患者CYP3A5检测498例中随机选取80名作为CYP3A5血药浓度组,编号B组;给予每日晨起空腹口服苯磺酸氨氯地平（络活喜）5mg,第8日清晨服用药物6小时后采取外周血液,进行血药浓度及CYP3A5基因型检测。采取方差分析及T检验的统计学方法分析出高寒地区CYP2D6基因多态性与美托洛尔药物代谢的关系及CYP3A5基因多态性与苯磺酸氨氯地平药物代谢的关系。结果:共有980例原发性高血压患者纳入实验组研究,其中CYP2D6实验组482例,CYP3A5实验组498例。健康对照组100例。CYP2D6、CYP3A5健康组的基因分布频率均符合Hardy-Weinberg定律。1、（1）原发性高血压患者CYP2D6基因型分布频率特点（482例）:CC（123例）25.5%,CT（164例）34.0%,TT（195例）40.5%;等位基因C的频率为:42.5%;等位基因T的频率为57.5%。健康者CYP2D6基因分布频率（100例）:CC（23例）23.0%,CT（44例）44.0%,TT（33例）33.0%;等位基因C的频率为:45.0%;等位基因T的频率为55.0%。CYP2D6实验组与对照组基因型分布频率之间无统计学意义（P=0.158）,等位基因分布频率无统计学差异（P=0.521）。（2）原发性高血压患者CYP3A5基因型分布频率特点（498例）:AA（44例）8.8%,AG（168例）33.7%,GG（286例）57.4%;等位基因G的频率为74.3%;等位基因A的频率为:25.7%。健康者CYP3A5基因分布频率特点（100例）:AA（9例）9.0%,AG（23例）23.0%,GG（68例）68.0%;等位基因A的频率为:20.5%;等位基因G的频率为79.5%。CYP3A5实验组与对照组基因型分布频率之间无统计学意义（P=0.101）,等位基因分布频率也无统计学意义（P=0.120）。2、（1）高寒地区原发性高血压患者与2019年我国已报道的贵州地区原发性高血压患者比较,CYP2D6基因型分布频率有统计学意义（P=0.001）,等位基因分布频率无统计学意义（P=0.980）;与2007年我国已报道的湖南娄底、湘潭地区原发性高血压患者对比,CYP2D6基因型及等位基因频率均具有统计学意义（P<0.001）;与2010年我国已报道北京地区原发性高血压患者相对比,CYP2D6基因型频率有统计学差异（P=0.008）,等位基因频率有统计学意义（P=0.003）。（2）高寒地区原发性高血压患者与我国2010年已报道的湖南地区原发性高血压患者对比,CYP3A5基因型分布频率有统计意义（P<0.001）,等位基因分布频率相有统计学意义（P=0.001）;与2017年已报道的四川南充地区原发性高血压患者之间比较,基因型分布频率有统计学意义（P=0.013）,等位基因分布频率有统计学意义（P=0.011）。3、（1）A组美托洛尔的标准血药浓度:CC组患者的标准血药浓度为27.03±12.27ng/ml,CT组患者的标准血药浓度为22.85±9.26ng/ml,TT组患者的标准血药浓度为60.19±15.01ng/ml。CYP2D6基因组中三个基因型的标准血药浓度之间存在显着的统计学意义（P<0.001）,进一步分别进行两两组基因型的标准血药浓度的对比:CC与CT组间比较,统计学无意义（P=0.318）,CC与TT组间比较、TT与CT组间比较,均具有统计学意义（P<0.001）。（2）B组患者中苯磺酸氨氯地平的标准血药浓度:AA组患者的标准血药浓度为5.25±1.46ng/ml,GA组患者的标准血药浓度为12.11±1.84ng/ml,GG组患者的标准血药浓度为14.87±2.18ng/ml。CYP3A5基因组中的三个基因型的患者标准血药浓度之间存在差异,有明显的统计学意义（P<0.001）,进一步分别进行两两组基因型的标准血药浓度的对比,AA与GA、AA与GG、GA与GG两两组基因型标准血药浓度之间的对比,均有统计学意义（P<0.001）。结论:1、高寒地区原发性高血压患者与健康者比较CYP2D6、CYP3A5基因变异率无差异。2、高寒地区原发性高血压患者CYP2D6、CYP3A5基因变异率及等位基因分布频率与非高寒地区比较存在地域差异。3、高寒地区原发性高血压患者CYP2D6、CYP3A5不同基因型对药物代谢存在差异,需要个体化用药治疗。
孙静[4]（2019）在《蛇床子素促成骨作用及代谢多态性研究》文中认为目的:目前临床应用的抗骨质疏松药物带来治疗作用的同时副作用不容忽视,有效低毒的新药研发仍在进行中。文献报道传统中草药蛇床子及其活性成分蛇床子素具有用于骨质疏松的治疗作用,本论文通过研究蛇床子素与骨调节靶点的结合情况,对成骨细胞调节的机制以及代谢酶多态性相关作用的研究,明确蛇床子素作为新型治疗骨质疏松药物的特点及可能性。方法:1.计算机模拟蛇床子素和多靶点骨调节信号因子的分子对接。2.应用细胞增殖实验观察蛇床子素对人成骨样MG-63细胞增殖能力的影响。应用磷酸苯二钠实验法测定蛇床子素对人成骨样MG-63细胞分化功能的影响。应用DAPI染色法观察蛇床子素对凋亡诱导剂诱导的人成骨样MG-63细胞凋亡的影响。应用半定量RT-PCR和Western Blot技术观察蛇床子素对人成骨样MG-63细胞OPG、RANKL、Osterix表达的影响。测定蛇床子素对P-ERK/ERK,P-AKT/AKT,β-catenin蛋白时间表达的影响。3.应用雌激素受体阻断剂ICI 182780,MEK抑制剂PD 98059,PI3K抑制剂Wortmannin和Wnt抑制剂DKK-1检测其对蛇床子素调节作用的阻断。检测阻断剂对蛇床子素对OPG、RANKL和Osterix调节的阻断。测定阻断剂对蛇床子素P-ERK/ERK,P-AKT/AKT,β-catenin蛋白调节作用的阻断。4.建立LC-MS/MS的CYP2C9经典探针底物双氯芬酸、CYP2D6经典探针底物右美沙芬代谢物测定方法并进行方法学验证,测定蛇床子素对不同代谢酶基因型药物代谢的影响。结果:1.对接结果表明,蛇床子素和骨代谢调节相关的多个靶点具有不同程度的结合能力,从微观机制展示了多靶标作用的可能性。2.蛇床子素的促成骨作用主要表现为促分化,小剂量蛇床子素能够促进MG-63细胞增殖,抑制细胞凋亡,提高细胞中OPG/RANKL的mRNA及蛋白比率,上调Osterix mRNA和蛋白的表达,促使细胞内P-ERK、P-AKT表达增多,细胞浆内β-catenin蛋白降低,细胞核内β-catenin蛋白升高。3.ICI 182780、PD98059、Wortmannin和DKK-1均可部分阻断蛇床子素的促增殖分化作用,部分阻断蛇床子素对OPG、RANKL、Osterix的mRNA及蛋白表达的调节。提示该四种信号通路在蛇床子素调节成骨细胞中均参与发挥作用。4.蛇床子素对3种CYP2C9、4种CYP2D6基因型药物代谢酶的半数抑制浓度分别为:CYP2C9*1,91.51μM;CYP2C9*2,104.5μM;CYP2C9*3,120.4μM;CYP2D6*1,61.86μM;CYP2D6*2,74.09μM;CYP2D6*10,47.95μM;CYP2D6*39,56.99μM。结论:蛇床子素的促成骨作用涉及多靶点、多条信号通路,对常见存在多态性的代谢酶作用弱。由于骨质疏松需要长期用药,蛇床子素具有多靶点、相互作用少的特点,和现有的抗骨质疏松药物相比,具有作为一个新型治疗骨质疏松药物的良好前景。
杨晴晴[5]（2019）在《CYP2D6突变酶参与药物代谢及相互作用的差异性研究》文中认为目的:CYP450（细胞色素P450）是人体中重要的肝药酶,可以参与多种内源物和外源物的代谢,主要负责药物的活化和清除。其中CYP2D6是CYP450家族中重要的多态性酶。其突变酶活性的改变会影响药物的代谢和相互作用,是药物不良发应和毒副作用发生的主要遗传因素。因此研究CYP2D6突变酶对药物代谢和相互作用的影响,对临床上药物剂量调整和个体化用药及联合用药具有重要意义。方法:为探究CYP2D6突变酶参与药物代谢和药物相互作用时的差异,并从微观结构上分析突变位点对酶的影响。我们选择了亚洲人群中具有代表性的四种表型分别为:CYP2D6*1（野生酶）、CYP2D6*2、CYP2D6*10和CYP2D6*39,选择了六种常见的CYP2D6酶抑制剂（奎尼丁、阿米替林、普罗帕酮、氟伏沙明、利培酮、美托洛尔）,以美托洛尔（MET）和右美沙芬（DXM）为底物分别进行了酶促动力学实验、酶抑制实验及分子对接试验。1.我们选择了MET为底物,α-羟基美托洛尔（HM）的浓度为测定指标。首先通过优化孵育参数:底物浓度、孵育时间和孵育酶量,确立了MET与CYP2D6野生酶及突变酶的最佳孵育体系。孵育完成后按照建立的样品处理方法处理孵育样品,用LC-MS/MS方法测定样品中产物HM的浓度。实验数据与米氏方程进行线性拟合,得到CYP2D6野生酶及突变酶的表观动力学参数Vmax、Km和CLint等,并用其进行酶活性差异分析。2.我们选择了六种抑制剂,包括:奎尼丁、普罗帕酮、利培酮、氟伏沙明、美托洛尔和阿米替林,以DXM为底物,去甲右美沙芬（DXT）的浓度为测定指标,进行了CYP2D6突变酶与DXM的体外抑制实验。首先通过优化孵育参数:底物浓度、孵育时间和孵育酶量,确立DXM与CYP2D6野生酶及突变酶的最佳酶抑制体系。孵育完成后按照建立的样品处理方法处理孵育样品,用LC-MS/MS方法测定样品中DXT的浓度。最后用GraphPad Prism 5.0软件处理实验数据,得到了六种药物抑制CYP2D6突变酶的IC50值,并将其作为标准比较了CYP2D6突变酶影响药物相互作用的差异。3.进行计算机模拟四个酶和底物、抑制剂的分子对接,分析不同突变位点对酶结构的影响。结果:1.野生型酶CYP2D6*1代谢MET生成HM的酶促动力学参数Km、Vmax及CLint值分别为11.31±1.21μM、85.06±4.12 nM/min、7.52 nM/min/μM,将其相对清除率定为100.00%;突变型酶CYP2D6*2的酶促动力学参数依次为为28.13±4.27μM,78.23±5.49 nM/min,5.63 nM/min/μM,其相对清除率为74.87%,活性与野生型相近;突变型酶CYP2D6*10的促动力学参数依次为31.46±6.20μM,21.08±2.55nM/min,0.67 nM/min/μM,其相对清除率为8.91%,活性显着小于野生型;突变型酶CYP2D6*39的酶促动力学参数依次为18.56±1.83μM,41.38±2.08 nM/min,2.23 nM/min/μM,其相对清除率为29.65%,活性显着小于野生型。2.每种药物对CYP2D6*10的IC50值是其对野生酶IC50值的2.56.7倍;而同种药物对CYP2D6*1,CYP2D6*2和CYP2D6*39三者的抑制作用没有显着区别。3.R296C和S486T突变对IC50值影响不大,P34S突变位点极大地影响了IC50值。结论:1.CYP2D6*2和CYP2D6*39突变酶催化MET的活性与野生型相比差别不大,而CYP2D6*10的催化活性显着低于野生型。这对于预测CYP2D6突变人群中药物的代谢情况和不良反应的发生具有参考意义,对MET的个体化用药具有指导意义。2.相比于CYP2D6*1,药物对CYP2D6*10的抑制作用显着性减弱。实验结果可以预测与CYP2D6突变酶相关的药物相互作用（DDIs）,进而为联合用药提供参考。3.R296C和S486T突变对酶活性位点影响不大,P34S突变位点极大地影响了酶的活性位点。
张欢[6]（2019）在《北京湖北两地婴幼儿药物代谢相关CYP基因的检测与分析》文中指出药物不良反应已成为全世界关注的医疗卫生问题。由于婴幼儿生理上的特点和较小的体表面积导致他们对药物不良反应比成年人更为敏感。有数据显示,我国新生儿药物不良反应的发生率约为24.4%,婴幼儿药物不良反应的发生率约为12.9%,分别是成年人的2-4倍,因此,婴幼儿的药物不良反应需受到特别关注。不同个体对相同药物会产生不同的药物疗效,这和个体的病理程度、身体状况等都有密切的关系,最重要的因素是个体的药物代谢酶的遗传多态性。人体内最重要的药物代谢酶是细胞色素P450酶（CYP450）,且临床上使用的大多数药物都经CYP450酶代谢。其中比较重要的CYP450酶基因有CYP1A2、CYP2A6、CYP2B6、CYP2C8、CYP2D6、CYP2C9、CYP2C19、CYP3A4和CYP3A5。越来越多的研究表明,细胞色素P450酶活性的个体差异是导致药物不良反应的一个重要因素。CYP450酶的遗传异质性导致患者对许多药物的反应存在差异。在我国,北京和湖北因为其地理位置和人口密度决定了它们是北部和中部的代表地区,通过对这两个地区人口的CYP450基因的检测,可以了解我国北方和中部地区的CYP450基因的异质性规律,因此,我们在北京和湖北两地的医院收集了22705名0-14岁的健康婴幼儿的血液样本,挑选了在中国人群中比较常见的4个CYP450基因,分别是CYP2C9,CYP2C19,CYP3A4,CYP3A5基因,并采用荧光PCR法进行了以上相关基因位点的检测。我们将检测结果进行地区差异性分析以及基因型组合分析,补充我国婴幼儿CYP等位基因的异质性规律,以便为个性化用药提供参考。结果表明,北京和湖北两地婴幼儿的CYP等位基因的异质性规律存在一定的差异。北京地区婴幼儿CYP等位基因频率如下:CYP2C9*3等位基因频率为4.37%,CYP2C19*2等位基因频率为30.18%,CYP2C19*3等位基因频率为4.79%,CYP3A4*18等位基因频率为0.91%,CYP3A5*3等位基因频率为67.38%。湖北地区婴幼儿CYP等位基因频率如下:CYP2C9*3等位基因频率为4.09%,CYP2C19*2等位基因频率为31.39%,CYP2C19*3等位基因频率为4.84%,CYP3A4*18等位基因频率为1.46%,CYP3A5*3等位基因频率为70.53%。我们发现,北京和湖北地区基因型频率最高的基因型为CYP3A5*3/*3,频率分别为47.15%和49.53%;基因型频率最低的基因型为CYP2C9*3/*3,频率分别为0.16%和0.24%。结果表明,CYP3A5*3/*3的分布具有地区差异性（P<0.05）,CYP2C9*3/*3的分布不具有地区差异性（P>0.05）,这和以往报道的结果相似。我们进一步发现,有15种基因型组合的频率超过了1%,这15种基因型组合的人数占各自地区的93.6%和93.3%（N=15512,N=7193）。我们对这15种基因型组合进行了地区差异性分析,结果显示有8种基因型组合显示出了地区差异性（P<0.05）。我们查阅了有关药物代谢的文献发现,在婴幼儿使用药物时,不同基因型组合的婴幼儿应使用符合各自基因型组合的药物,这样才会避免发生药物不良反应事件。通过本次针对北京和湖北两地婴幼儿的大规模CYP基因的检测,我们了解了部分CYP基因的多态性和药物间相互作用,发现了CYP基因型的地区差异性,为受试婴幼儿的个性化用药提供了数据支持和用药指导。本研究对降低婴幼儿药物不良反应的发生和两地区药物代谢基因筛查的普及具有重要的参考价值。
杨帆[7]（2019）在《CYP2D6基因多态性对利培酮及其代谢物血药浓度的影响》文中认为目的探究细胞色素P4502D6（CYP2D6）基因多态性对抗精神病药利培酮（RIS）及其代谢物（9-OH-RIS）血药浓度的影响。方法采用柱切换高效液相色谱法（CSHPLC）建立RIS及9-OH-RIS检测二者血药浓度的方法并计算标准血药浓度。随机选择60例精神分裂症患者作为研究对象,且均单一用RIS治疗,检测其血药浓度。用聚合酶链反应（PCR）技术测定CYP2D6基因多态性。分析不同基因型的精神分裂症患者对RIS及9-OH-RIS代谢的影响。结果成功建立了RIS及9-OH-RIS的CSHPLC检测方法,RIS的标准曲线为:Y=0.0174X-0.0068,r2=0.99782;9-OH-RIS的标准曲线为Y=0.00047X+0.0018,r2=0.99958,最低检测限量为3.2ng·mL-1。电泳结果显示,60例精神分裂症患者中,纯合突变体（CYP2D6*10/*14）为27例,占45%;杂合体[CYP2D6*1（*2）/*14]为15例,占25%,野生型纯合体[CYP2D6*1（*2）/*5]为18例,占30%。3组间Cris、C9-OH、C9-OH/Cris均有统计学意义（P<0.05）。根据代谢率的大小,可知CYP2D6*1（*2）/*14属于慢代谢型（PM）,CYP2D6*1（*2）/*5属于中速代谢型（IM）,CYP2D6*10/*14属于快代谢型（EM）。结论CYP2D6不同基因类型可影响RIS及9-OH-RIS的代谢,继而对RIS及9-OH-RIS血药浓度造成影响,CYP2D6根据患者不同的基因型可分为PM、IM、EM三种类型,即PM型患者对RIS及9-OH-RIS代谢较慢,血药浓度较高,易引起副反应;但EM型患者则对RIS及9-OH-RIS代谢较快,在临床治疗上可能需要更大剂量的RIS进行治疗。综上所述,医生在临床上用RIS对精神分裂症患者治疗时可根据其不同的基因型来有计划的用药治疗,为患者减轻不必要的痛苦,增加患者依从性,从另一个角度上减少医患纠纷。
魏光榕,苏德禹[8]（2016）在《基因多态性与合理用药的帕累托图分析》文中进行了进一步梳理目的根据药物基因多态性原理,参与并指导临床合理用药,提高利用率,降低用药风险。方法抽查三明市2015年2月1日2016年2月1日第一医院821份内科系统住院病历,以及医务科配合药剂科发放404份个体化给药认知度问卷调查表,对其影响临床个体化给药因素进行帕累托图分析。结果 404份药物基因多态性与临床个体化给药调查问卷帕累托图显示:药物基因多态性药物目录、临床个体化给药方案制定、药物基因多态性代谢酶为影响临床个体化给药的主要因素。结论同一药物对于同一疾病作用于不同患者由于存在基因代谢酶的差异,临床需实施个体化给药。
王桂萍[9]（2012）在《中国少数民族基因组DNA样本库建立和CYP2C9在维吾尔族中的遗传多态性分布规律》文中研究指明我国拥有55个少数民族,由于各民族之间遗传背景具有很大的差异性,加上少数民族地区医疗卫生状况较差,导致少数民族人群药物疗效和不良反应发生率相对于汉族而言不容乐观。多年研究证明,相同剂量的药物在不同种族、不同民族,甚至是不同个体之间的代谢是不同的,这种代谢差异性是药物毒性及不良反应的主要因素,而药物代谢酶基因的遗传多态性是这些不良医疗效应产生的主要内在因素之一。细胞色素P4502C9（CYP2C9）就是一种重要的药物代谢酶,代谢了约16%的临床药物,特别是一些治疗安全范围较窄的药物,比如华法林、洛沙坦、甲苯磺丁脲。CYP2C9基因位于人染色体10q24.2上,全长约50.71kb,有9个外显子,8个内含子,编码490个氨基酸残基,编码蛋白的分子量约55kD。CYP2C9基因具有高度遗传多态性,其中一些等位基因的突变导致酶活性显着升高或者降低,从而影响药物的体内有效剂量,导致不良反应的发生甚至引起中毒。我国新疆维吾尔族人群心血管疾病的发病率较高,华法林是其常用治疗药物,然而CYP2C9突变型个体在接受治疗时,正常剂量的应用会导致其发生不良反应,严重影响患者的临床治疗效果,因此,系统规范地阐述CYP2C9基因在我国新疆维吾尔族人群中的多态性分布规律,并对其突变体功能进行研究,对于指导临床合理用药至关重要。基于上述研究结果,我们在中央民族大学入学新生中,筛选三代以内无外族通婚史的少数民族健康成年人,在知情同意的情况下,分别按照临床采血标准和人类遗传资源标准编码进行采血和编号,采用非离心柱法提取全血基因组DNA。而后通过琼脂糖凝胶电泳法定性半定量鉴定目的片段,并应用紫外分光光度计测定其纯度、盐度和浓度。最后剔除断裂及降解的、纯度较低的DNA样本,超低温保存,从而建立了中国少数民族基因组DNA样本库。在已建立的DNA样本库中,随机抽取20个维吾尔族基因组DNA样本,采用限制性片段长度多态性（RFLP）、基因测序等分子生物学技术,得到CYP2C9基因9个外显子序列,筛选到CYP2C9基因3个国际上已报导和33个未报导的多态性位点,并分别计算突变等位基因频率。我们研究发现CYP2C9*2（430C>T R144C）、CYP2C9*3（1075A>C1359L）在我们所研究的维吾尔族样本中的分布频率分别为5%、20%,与国际上已经报导的亚洲人群中CYP2C9*2的分布频率为0，CYP2C9*3分布频率为1.4%不相符,这为今后对其功能研究提供了重要依据。在整个基凶外显予扫描的基础上,选取国际上尚未报导的可能会引起编码蛋白功能改变的3个CYP2C9突变位点,即137G>A、222A>G、356A>G,按照定点突变PCR引物设计原则设计包含目的的突变位点的上下游引物.送Invitrogen公司进行引物合成备用。而后通过定点突变PCR、限制性内切酶双酶切反应、连接反应、DH5α盛受态细胞的转化、菌液PCR等分子生物学方法,分别完成包含137G>A、222A>G、356A>G的CYP2C9基因突变体的构建,从而为今后更进一步探讨其功能奠定基础。
高怡文[10]（2010）在《人CYP2C8多态性功能及CYP2C8基因依赖性药物相互作用的体外研究》文中研究表明目的：CYP2C8基因多态性是造成个体间CYP2C8的药物代谢能力产生巨大差异的因素之一。主要CYP2C8基因多态性功能的系统性研究,具有重要的药理学和毒理学意义,可为CYP2C8代谢表型预测和经CYP2C8代谢药物的个体化用药提供数据和信息。但目前仍缺乏在统一的CYP表达体系和相同的检测系统中,研究CYP2C8重要等位基因功能的相关报道。CYP2C8药物代谢能力的个体差异可能会导致携带CYP2C8多态性基因型的患者,对CYP2C8介导的代谢性药物相互作用的敏感性增加,而导致恶性药物毒副作用。现阶段,尚未有研究证明CYP2C8基因多态性是否会影响药物间相互作用的发生和机制,以及能否会引起药物相互作用的个体差异。本课题研究中,我们针对CYP2C8主要基因多态性功能改变,以及CYP2C8基因型依赖的药物相互作用等尚未解决的科学问题展开系统研究和分析。方法：首先,选取野生型CYP2C8（CYP2C8.1）,3个重要的CYP2C8等位基因（CYP2C8.2,CYP2C8.3,CYP2C8.4）以及CYP2C8.3携带的两个重要SNPs（R139和K399R）,应用体外重组和蛋白表达技术,将CYP2C8.1和5种CYP2C8变异体于相同的表达体系中进行表达,构建涵盖主要CYP2C8多态性的CYP2C8多态性基因文库和蛋白文库；利用已构建成功的CYP2C8多态性蛋白文库,研究体外重组CYP2C8.1和5种重要CYP2C8突变体对抗肿瘤药物（紫杉醇）和抗疟疾药物（阿莫地奎）代谢功能的差异,在此基础上系统性分析CYP2C8基因多态性对CYP2C8酶学性质改变的效应关系。在系统性分析了CYP2C8多态性功能的基础上,我们评估了10类共27种临床常用药物对CYP2C8.1和5种CYP2C8突变体紫杉醇催化活性的抑制程度,并根据体外抑制数据预测受测药物和紫杉醇,在不同CYP2C8基因型中,体内药物间相互作用的发生风险。其次,我们初步建立了一种基于荧光底物的,针对于CYP2C8介导的代谢性药物相互作用的高通量检测方法,用于快速评估药物或新药候选化合物对不同CYP2C8多态性的体外抑制程结果：对CYP2C8野生型及其5种突变体的功能研究表明：1、CYPs体外重组技术可应用于CYP多态性功能研究和体外药物代谢机制研究；2、CYP2C8体外代谢紫杉醇和阿莫地奎的研究显示,本系统表达纯化的CYP2C8.1具有正常的药物催化活性,获得的酶动力学参数Km与已有报道数据相近。3、与CYP2C8.1相比,R139K的药物代谢能力无显着变化,CYP2C8.2,CYP2C8.3,CYP2C8.4和K399R的药物代谢能力有不同程度的降低,其中K399R的代谢能力最低。药物相互作用研究表明：1、紫杉醇和受测药物的体外药物相互作用研究结果显示,受测药物对CYP2C8突变体的半数抑制常数（IC50）,与CYP2C8.1相比存在明显差异,CYP2C8基因多态性可能对CYP2C8介导的代谢性药物相互作用产生影响；2、紫杉醇和受测药物间体内相互作用的预测结果显示,不同CYP2C8基因型可能导致体内相互作用性质的改变。3、基于体外重组CYPs和荧光底物的高通量药物抑制检测方法可以用于体外药物相互作用的快速检测和初步研究；总结：本研究从CYP2C8药物代谢功能和CYP2C8抑制介导的代谢性药物相互作用两方面,研究了CYP2C8基因多态性的影响效应。系统性分析CYP2C8多态性功能将为CYP2C8表型预测,为经CYP2C8代谢的药物,尤其是紫杉醇和阿莫地奎的个体化用药提供更加均一化的数据和信息。紫杉醇和27种临床常用药物相互作用研究将为临床药理学研究人员提供体内和体外药物代谢抑制数据,以进一步评估和解决临床中CYP2C8基因型依赖的代谢性药物相互作用。同时也为根据体外抑制数据预测体内药物相互作用提供了新的思路。另外,以荧光底物为基础的药物抑制检测平台,将为药物和新药化合物体外抑制检测提供快速、灵敏、高通量的分析方法和手段。
二、药物代谢多态性酶的研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、药物代谢多态性酶的研究进展（论文提纲范文）
（1）细胞色素P450 2C9 R150H及R150L突变体的药物代谢性质研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 第一章绪论 |
| 1.1 细胞色素P450酶 |
| 1.2 CYP2C9 概述 |
| 1.2.1 CYP2C9 结构 |
| 1.2.2 CYP2C9 代谢底物 |
| 1.3 细胞色素P450 还原酶 |
| 1.4 CYP2C9 基因多态性 |
| 1.4.1 CYP2C9 基因多态性概述 |
| 1.4.2 CYP2C9*2, *3 |
| 1.4.3 CYP2C9*8, *27 |
| 1.5 细胞色素P450 酶蛋白表达体系 |
| 1.5.1 细胞色素P450 酶蛋白表达体系概述 |
| 1.5.2 Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达体系 |
| 1.6 本文研究目的与思路 |
| 2 杆状病毒-昆虫细胞系统表达CYP2C9 多态性酶 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验试剂 |
| 2.1.2 仪器设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 溶液的配制 |
| 2.2.2 引物设计与合成 |
| 2.2.3 穿梭载体Bacmid-cyp2c9与Bacmid-por的构建 |
| 2.2.4 重组酶CYP2C9、POR的表达 |
| 2.2.5 重组酶的鉴定与含量测定 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 Bacmid-CYP2C9与Bacmid-POR PCR的成功建立 |
| 2.3.2 重组酶的成功表达 |
| 2.4 讨论 |
| 3 重组酶CYP2C9 多态性酶活性研究 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 UPLC-MS/MS方法建立 |
| 3.2.2 标准曲线绘制 |
| 3.2.3 酶动力学检测 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 UPLC-MS/MS条件 |
| 3.3.2 标准曲线绘制和定量范围 |
| 3.3.3 酶动力学分析结果 |
| 3.4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 |
| 致谢 |
（2）急性缺血性脑卒中患者CYP3A4、CYP3A5、CYP2E1基因多态性对丁苯酞血药浓度及临床有效性的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 第一章 HPLC-Orbitrap法检测急性缺血性脑卒中患者丁苯酞血药浓度的方法 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二章 急性缺血性脑卒中患者CYP3A4*1G、CYP3A5*3、CYP2E1*5B基因多态性与丁苯酞药物浓度相关性研究 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第三章 急性缺血性脑卒中患者CYP3A4*1G、CYP3A5*3、CYP2E1*5B基因多态性与丁苯酞有效性的相关性研究 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 附件 |
| 文献综述 丁苯酞的药理作用及临床疗效研究进展 |
| 参考文献 |
| 文献综述 人CYP450酶基因多态性与药物代谢研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 个人简介 |
| 开题、中期及学位论文答辩委员组成 |
（3）高寒地区高血压病患者CYP2D6、CYP3A5基因变异率及个体化治疗相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 英文缩写 |
| 攻读学位期间发表的学术成果 |
| 附图 |
（4）蛇床子素促成骨作用及代谢多态性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、蛇床子素与骨调节靶点相互作用的分子模拟研究 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 分子对接 |
| 1.1.2 治疗靶点数据库 |
| 1.1.3 实验方法 |
| 1.2 结果及讨论 |
| 1.3 小结 |
| 二、蛇床子素对人成骨样MG-63 细胞的作用 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验相关试剂制备 |
| 2.1.3 细胞培养 |
| 2.1.4 细胞体外增殖能力的测定 |
| 2.1.5 蛇床子素对细胞碱性磷酸酶活性影响的测定 |
| 2.1.6 流式细胞仪检测细胞凋亡 |
| 2.1.7 RT-PCR |
| 2.1.8 免疫印迹细胞实验 |
| 2.1.9 统计学分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 蛇床子素对MG-63 细胞增殖能力的影响 |
| 2.2.2 蛇床子素对MG-63 细胞分化能力的影响 |
| 2.2.3 蛇床子素对细胞凋亡的影响 |
| 2.2.4 蛇床子素对OPG,RANKL,Osterix表达的影响 |
| 2.2.5 蛇床子素对P-ERK/ERK,P-AKT/AKT,β-catenin蛋白表达的调节 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 三、阻断剂对蛇床子素调节作用的阻断 |
| 3.1 对象和方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验试剂的配制 |
| 3.1.3 细胞培养 |
| 3.1.4 细胞体外增殖能力的测定 |
| 3.1.5 碱性磷酸酶活性的测定 |
| 3.1.6 RT-PCR |
| 3.1.7 免疫印迹细胞实验 |
| 3.1.8 统计分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 阻断剂对蛇床子素增殖分化作用的阻断 |
| 3.2.2 阻断剂对蛇床子素调节OPG,RANKL,Osterix表达的阻断 |
| 3.2.3 阻断剂对蛇床子素调节的信号蛋白表达的阻断 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 四、蛇床子素对3种CYP2C9 基因型及4种CYP2D6 基因型药物代谢的影响 |
| 前言 |
| 4.1 对象和方法 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 实验仪器 |
| 4.1.3 样品配制 |
| 4.1.4 探针底物的LC-MS/MS方法测定 |
| 4.1.5 酶反应研究 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 探针药物的LC-MS/MS方法测定及验证 |
| 4.2.2 酶反应条件确定 |
| 4.2.3 代谢物标准曲线 |
| 4.2.4 蛇床子素对底物酶代谢的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 总结和展望 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 蛇床子素药理作用研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）CYP2D6突变酶参与药物代谢及相互作用的差异性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、CYP2D6 突变酶在美托洛尔代谢中的差异 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 药品和试剂 |
| 1.1.2 仪器和设备 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 样品溶液的配制 |
| 1.2.2 MET和 HM的 LC-MS/MS方法 |
| 1.2.3 体外孵育实验和样品处理方法 |
| 1.3 方法学验证 |
| 1.3.1 方法专属性 |
| 1.3.2 标准曲线及定量下限 |
| 1.3.3 准确度和精密度 |
| 1.3.4 绝对回收率 |
| 1.3.5 基质效应 |
| 1.3.6 稳定性 |
| 1.4 酶促孵育参数优化 |
| 1.4.1 CYP2D6 野生及突变酶活性比较及底物浓度优化 |
| 1.4.2 CYP2D6 野生及突变酶孵育时间的优化 |
| 1.4.3 CYP2D6 野生及突变酶孵育酶量的优化 |
| 1.5 CYP2D6 野生及突变酶动力学参数测定 |
| 1.6 结果 |
| 1.6.1 LC-MS/MS方法学优化 |
| 1.6.2 LC-MS/MS方法学验证结果 |
| 1.6.3 CYP2D6 野生及突变酶活性比较及底物浓度优化 |
| 1.6.4 CYP2D6 野生及突变酶孵育时间的确定 |
| 1.6.5 CYP2D6 野生及突变酶孵育酶量的确定 |
| 1.6.6 酶促动力学参数分析和比较 |
| 1.7 讨论 |
| 1.8 小结 |
| 二、CYP2D6 突变酶在药物相互作用中的差异 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 药品与试剂 |
| 2.1.2 仪器和设备 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 样品溶液的配制 |
| 2.2.2 DXM和 DXT的 LC-MS/MS方法的建立 |
| 2.2.3 体外抑制实验和样品处理方法 |
| 2.3 方法学验证 |
| 2.3.1 方法专属性 |
| 2.3.2 标准曲线及定量下限 |
| 2.3.3 精密度和准确度 |
| 2.3.4 绝对回收率 |
| 2.3.5 基质效应 |
| 2.3.6 稳定性 |
| 2.4 酶促孵育参数优化 |
| 2.4.1 CYP2D6 野生及突变酶底物浓度优化 |
| 2.4.2 CYP2D6 野生及突变酶孵育时间优化 |
| 2.4.3 CYP2D6 野生及突变酶孵育酶量优化 |
| 2.5 CYP2D6 野生及突变酶的IC_(50)测定 |
| 2.5.1 CYP2D6*1 酶的IC_(50)测定 |
| 2.5.2 CYP2D6*2 酶的IC_(50)测定 |
| 2.5.3 CYP2D6*10 酶的IC_(50)测定 |
| 2.5.4 CYP2D6*39 酶的IC_(50)测定 |
| 2.6 结果 |
| 2.6.1 LC-MS/MS方法学优化 |
| 2.6.2 LC-MS/MS方法学验证结果 |
| 2.6.3 CYP2D6 野生及突变酶底物浓度确定 |
| 2.6.4 CYP2D6 野生及突变酶孵育时间确定 |
| 2.6.5 CYP2D6 野生及突变酶孵育酶量确定 |
| 2.6.6 CYP2D6 野生及突变酶IC_(50)值分析和比较 |
| 2.7 讨论 |
| 2.8 小结 |
| 三、CYP2D6 突变结构与实验结果分析 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 |
| 一、CYP450 酶的研究进展 |
| 二、CYP2D6 酶的研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）北京湖北两地婴幼儿药物代谢相关CYP基因的检测与分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 药物不良反应 |
| 1.2 导致婴幼儿药物不良反应的原因 |
| 1.3 药物基因组学 |
| 1.4 药物代谢酶研究进展 |
| 1.5 研究内容 |
| 1.6 研究目的及意义 |
| 2 北京湖北两地婴幼儿药物代谢相关CYP基因多态性的检测及结果分析 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.4 结果 |
| 2.5 讨论 |
| 3 北京湖北两地婴幼儿药物代谢相关CYP基因多态性的比较分析 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料 |
| 3.3 试验方法 |
| 3.4 结果 |
| 3.5 讨论 |
| 4 总结与展望 |
| 4.1 总结 |
| 4.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录一 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 附录二 相关缩略词 |
（7）CYP2D6基因多态性对利培酮及其代谢物血药浓度的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 实验仪器与试剂 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 缩略语表 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（8）基因多态性与合理用药的帕累托图分析（论文提纲范文）
| 2.3影响基因多态性药物个体化用药因素及构成的累计比 |
（9）中国少数民族基因组DNA样本库建立和CYP2C9在维吾尔族中的遗传多态性分布规律（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 药物代谢酶基因CYP2C9的国内外研究进展 |
| 一.CYP2C9基因多态性及其发生机制 |
| 二.CYP2C9基因型与代谢表型的关系 |
| 三.CYP2C9基因多态性对药物代谢的影响 |
| 四.CYP2C9基因多态性与疾病的易感性 |
| 五.结语 |
| 第二部分 中国少数民族全血基因组DNA样本库的建立 |
| 第一节 血液的采集 |
| 一.研究对象的选择 |
| 二.实验试剂及仪器 |
| 三.实验方法 |
| 四.实验结果 |
| 第二节 中国少数民族全血基因组DNA样本库的建立 |
| 一、实验仪器及试剂 |
| 二.实验方法 |
| 三.实验结果 |
| 第三节 讨论 |
| 第三部分 药物代谢酶基因CYP2C9在维吾尔族人群中的遗传多态性分布研究 |
| 第一节 CYP2C9基因的生物信息学分析 |
| 一.实验材料与方法 |
| 二.分析结果 |
| 第二节 CYP2C9基因及各外显子序列的扩增 |
| 一.实验材料 |
| 二.实验方法 |
| 三.实验结果 |
| 第三节 CYP2C9基因突变位点筛查 |
| 一.实验材料与方法 |
| 二.实验结果 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 第四部分 CYP2C9基因突变位点的构建 |
| 一.实验材料 |
| 二.实验方法 |
| 三.实验结果 |
| 小结 |
| 第五部分 讨论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1.少数民族遗传信息调查表 |
| 附录2.知情同意书样版 |
| 附录3.中国少数民族血样DNA收集整理保存技术规程 |
| 附录4.CYP2C9基因各外显子的测序图谱 |
| A、222A>G、356A>G 的测序图谱'>附录5.CYP2C9CDS及其定点突变137G>A、222A>G、356A>G 的测序图谱 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
| 致谢 |
（10）人CYP2C8多态性功能及CYP2C8基因依赖性药物相互作用的体外研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 文献综述 |
| 1.2.1 CYP酶系概述 |
| 1.2.2 CYP分布 |
| 1.2.3 CYP底物催化机制及其功能 |
| 1.2.4 CYP结构和功能关系 |
| 1.3 主要CYP亚家族研究进展 |
| 1.3.1 主要CYP亚家族与药物代谢 |
| 1.3.2 CYP基因多态性研究进展 |
| 1.3.3 CYP2C8与药物代谢 |
| 1.3.4 CYP与代谢性药物相互作用 |
| 1.3.5 CYP抑制导致的药物相互作用 |
| 1.3.6 CYP基因多态性与药物相互作用 |
| 1.3.7 体外及体内代谢性药物相互作用的预测 |
| 1.3.8 药物代谢和安全性评价中常用研究模型 |
| 1.4 立题目的和意义 |
| 第二章 重组CYP2C8及5个CYP2C8突变株的表达和纯化 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 表达载体和菌株 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要溶液及主要培养基 |
| 2.1.4 主要实验仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 人CYP2C8野生型及5个CYP2C8突变体重组表达载体的构建 |
| 2.2.2 人CYP2C8野生型及5个CYP2C8突变体重组酵母表达体系构建 |
| 2.2.3 人CYP2C8野生型及5个突变体膜蛋白的表达和鉴定 |
| 2.2.4 人CYP2C8野生型及5个突变体微粒体制备和功能性CYP2C8表达量的检测 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 构建人CYP2C8野生型及5个CYP2C8突变体重组表达载体 |
| 2.3.2 人CYP2C8野生型及5个CYP2C8突变体膜蛋白表达 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 选择酵母细胞作为CYP2C8体外重组表达系统 |
| 2.4.2 CYP2C8基因多态性对功能CYP2C8表达量的影响 |
| 第三章 5个CYP2C8突变体多态性功能研究 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 主要试剂 |
| 3.1.2 主要溶液 |
| 3.1.3 主要仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 确定和优化液相色谱条件 |
| 3.2.2 制作标准曲线 |
| 3.2.3 确定CYP2C8野生型和突变体催化紫杉醇和阿莫地奎的反应条件 |
| 3.2.4 CYP2C8野生型和5个CYP2C8突变体催化活性的比较 |
| 3.2.5 CYP2C8野生型和突变体催化紫杉醇和阿莫地奎酶促动力学的检测 |
| 3.2.6 数据处理 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 液相色谱条件的确立 |
| 3.3.2 标准曲线 |
| 3.3.3 CYP2C8野生型和突变体催化紫杉醇和阿莫地奎的反应条件 |
| 3.3.4 比较CYP2C8野生型和5个CYP2C8突变体催化活性的结果 |
| 3.3.5 CYP2C8野生型和突变体催化紫杉醇和阿莫地奎酶促动力学检测结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 CYP2C8野生型和5个CYP2C8突变体底物催化活性差异 |
| 3.4.2 CYP2C8野生型和5个CYP2C8突变体催化紫杉醇和阿莫地奎酶学动力学分析 #60■ |
| 第四章 CYP2C8抑制作用介导的代谢性药物相互作用研究 |
| 4.1 材料 |
| 4.1.1 主要试剂 |
| 4.1.2 主要溶液 |
| 4.1.3 主要仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 27种药物对CYP2C8.1紫杉醇6α-羟基化催化反应抑制程度检测 |
| 4.2.2 药物对CYP2C8的紫杉醇6α-羟基化催化反应的半数抑制常数(IC_(50)值)检测 |
| 4.2.3 体内药物相互作用风险预测 |
| 4.2.4 数据分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 27种药物对CYP2C8.1的紫杉醇6α-羟基化催化反应的抑制程度 |
| 4.3.2 药物对CYP2C8野生型和5个CYP2C8突变体的半数抑制常数(IC_(50)值)的检测结果 |
| 4.3.3 体内药物相互作用风险预测结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 10大类27种待测药物对CYP2C8.1的抑制作用分析 |
| 4.4.2 CYP2C8抑制剂对CYP2C8野生型和5个CYP2C8突变体抑制程度差异的分析 |
| 第五章 基于荧光底物的CYP2C8抑制剂高通量筛选方法的初步建立 |
| 5.1 材料 |
| 5.1.1 主要试剂 |
| 5.1.2 主要溶液 |
| 5.1.3 主要仪器 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 CYP2C8野生型和5个突变体催化荧光底物BOMCC的Km值检测 |
| 5.2.2 药物对CYP2C8催化荧光底物BOMCC抑制作用的检测 |
| 5.2.3 半数抑制常数(IC_(50)值)的计算 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 CYP2C8野生型和5个突变体催化荧光底物BOMCC的Km值 |
| 5.3.2 药物对CYP2C8野生型和5个突变体催化荧光底物BOMCC抑制作用的高通量检测 |
| 5.4 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
四、药物代谢多态性酶的研究进展（论文参考文献）
- [1]细胞色素P450 2C9 R150H及R150L突变体的药物代谢性质研究[D]. 冯钰益. 大连理工大学, 2021(01)
- [2]急性缺血性脑卒中患者CYP3A4、CYP3A5、CYP2E1基因多态性对丁苯酞血药浓度及临床有效性的影响[D]. 崔冰冰. 宁夏医科大学, 2020(02)
- [3]高寒地区高血压病患者CYP2D6、CYP3A5基因变异率及个体化治疗相关性研究[D]. 胡焱垚. 佳木斯大学, 2020(03)
- [4]蛇床子素促成骨作用及代谢多态性研究[D]. 孙静. 天津医科大学, 2019(02)
- [5]CYP2D6突变酶参与药物代谢及相互作用的差异性研究[D]. 杨晴晴. 天津医科大学, 2019(02)
- [6]北京湖北两地婴幼儿药物代谢相关CYP基因的检测与分析[D]. 张欢. 华中科技大学, 2019(03)
- [7]CYP2D6基因多态性对利培酮及其代谢物血药浓度的影响[D]. 杨帆. 内蒙古医科大学, 2019(03)
- [8]基因多态性与合理用药的帕累托图分析[J]. 魏光榕,苏德禹. 海峡药学, 2016(08)
- [9]中国少数民族基因组DNA样本库建立和CYP2C9在维吾尔族中的遗传多态性分布规律[D]. 王桂萍. 中央民族大学, 2012(11)
- [10]人CYP2C8多态性功能及CYP2C8基因依赖性药物相互作用的体外研究[D]. 高怡文. 西北大学, 2010(09)