一、载脂蛋白E与视网膜疾病关系的研究（论文文献综述）
武炳慧,索琰,乔杨,李婵,宋金鑫,陆慧琴[1]（2021）在《非动脉炎性前部缺血性视神经病变的光学相干断层扫描血管成像特征分析》文中研究指明目的分析非动脉炎性前部缺血性视神经病变（NA-AION）患者的患眼、对侧健眼及健康人群正常眼的光学相干断层扫描血管成像（OCTA）中视盘周围浅层视网膜血流变化的情况。方法选取2018年5月至2019年5月西安市第一医院明确诊断为单眼患病NA-AION患者30例,比较NA-AION患者的患眼和对侧健眼OCTA上视盘周围浅层视网膜血流密度及灌注的变化,同时比较NA-AION患者双眼图形视觉诱发电位（PVEP）的数值变化。选取30例年龄匹配的且无眼部疾病及眼部手术史的健康人群的单眼作为健康对照组,比较其与NA-AION患者对侧健眼组OCTA检查中的视盘周围浅层视网膜血流密度及灌注情况的组间差异。结果 30例NAION患者的血液学检测显示,其同型半胱氨酸、载脂蛋白E和低密度脂蛋白平均值高于正常参考值范围。NA-AION患者患眼与对侧健眼相比,视盘中心、内层及完整区域浅层视网膜血流密度及灌注均明显降低,且两组之间差异有统计学意义（P<0.05）;NA-AION患者的对侧健眼与健康对照的正常眼相比,视盘中心、内层及完整区域浅层视网膜血流密度和灌注差异均无统计学意义（P>0.05）。NA-AION患眼组与健眼组PVEP-P100的潜伏期和幅值差异无统计学意义（P>0.05）。结论 OCTA是一种安全、快速和非侵入性检查,能够及时发现血液灌注缺损,可以作为NA-AION患者较常用的检查方法,以辅助诊断,为患者临床治疗赢得时间。
陈瑶[2]（2021）在《补阳还五汤对大鼠视网膜蓝光损伤保护作用的研究》文中研究指明目的:探讨补阳还五汤对大鼠视网膜蓝光损伤的保护作用机制。材料与方法:本实验将SD大鼠分为五组,每组五只,分别为空白对照组（N）、模型对照组（M）、补阳还五汤低浓度组（A）、补阳还五汤中浓度组（B）、补阳还五汤高浓度组（C）共25只,应用480nm波长的8000k蓝光灯12小时明暗交替照射大鼠视网膜蓝光损伤模型。每组鼠均进行眼底照相、暗视野闪光ERG检测,建立模型周期为14天,在造模前一周开始给药,给药周期为21天。在给药的第21天进行眼底照相和ERG检测,统计视网膜杯盘比变化和ERG振幅的变化;在第22天取大鼠眼球附带一定长度视神经,进行冰冻和石蜡包埋制作切片;HE染色法检测各组大鼠视网膜厚度和视网膜神经节细胞数;甲苯胺蓝染色检测各组大鼠视神经损伤情况;免疫荧光染色法检测各组大鼠视网膜Nrf2因子表达量;结果:经过21天给药后,大鼠眼底彩照模型对照组与空白对照组相比,模型对照组大鼠视网膜眼底出现散在的玻璃膜疣和新生血管,杯盘比显着增加（P<0.01）。给药高浓度组与模型组相比杯盘比比值明显降低（P<0.05）。暗视野闪光ERG检测结果蓝光照射14天后大鼠视网膜a、b波振幅明显下降,与空白对照组相比差异性显着（P<0.001）。给药高浓度组与模型对照组相比b波有所提高（P<0.05）。HE染色检测视网膜厚度结果显示,给药高浓度组与模型组相比视网膜损伤减轻（P<0.05）。统计单位长度内视网膜节细胞数给药中浓度组与模型组相比视网膜神经节细胞数有所增加（P<0.05）。给药高浓度组的神经节细胞数与模型组相比显着增加（P<0.01）。甲苯胺蓝染色检测视神经损伤情况,与模型组相比给药中浓度组和给药高浓度组轴突数量增多（P<0.01）。Nrf2免疫荧光染色结果显示,给药中浓度组与模型对照组相比荧光强度增高（P<0.01）。给药高浓度组视网膜的Nrf2表达也明显高于模型对照组（P<0.001）。结论:蓝光照射能够造成大鼠视网膜光损伤,补阳还五汤高、中、低浓度给药21天后,对视网膜的损伤具有保护作用,补阳还五汤中浓度组能够减少视网膜神经节细胞损伤,降低视神经损伤,增加Nrf2的表达。补阳还五汤高浓度能够改善光照导致的视网膜各层细胞损伤,增加视网膜厚度,改善视网膜形态,保护视神经,并且能够提高Nrf2在视网膜的表达。证明了补阳还五汤能够降低蓝光导致的视网膜损伤,对大鼠视网膜氧化损伤具有保护作用。
徐梓铭[3]（2021）在《华法林对ApoE基因敲除动脉粥样硬化小鼠血管及视网膜的影响研究》文中研究说明视觉是人类最重要的感知觉。视网膜是视觉感知的第一站,其主要功能是负责将光信号转换为电信号并传递给脑中枢以形成图像视觉。视网膜一旦损伤会导致视力下降甚至失明,给患者带来极大的痛苦。视网膜血管是人体全身唯一可以直观地观察到的血管系统,可以体现全身的血管情况。视网膜血管病变与视网膜退行性疾病紧密相关。视网膜血管病变导致视网膜血氧供给不足、炎症等一系列病变,进而引发视网膜退变。眼底的脂代谢障碍是视网膜动脉粥样硬化的病变基础之一,其特点是病变部位从内膜开始,一般先有脂质、多糖的堆积;进而出血、血栓形成,发展到纤维组织增生及钙质沉积、组织纤维化等,导致动脉壁增厚变硬、血管腔狭窄,同时随着长期血管损伤,血管内斑块逐步形成。视网膜血管管径损伤是高胆固醇血症的早期标志之一。华法林（Warfarin）作为维生素K拮抗剂（VKAs）,在临床已被广泛使用了数十年用于防治血栓栓塞性疾病。然而,VKAs不仅抑制维生素K依赖性凝血因子的活化,还抑制了维生素K依赖性蛋白的合成,从而引起不良作用。有动物实验的证据以及临床和流行病学结果表明,长期使用华法林,会增加血管钙化风险,甚至诱发血管钙化,而且会导致动物和人类的动脉粥样硬化斑块加速形成,这可能是长期使用抗凝剂华法林带来的风险。氯吡格雷和阿司匹林是另外两种可以抑制血小板聚集的药物,临床上用来降低患者血栓形成风险。塑化剂邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）可导致脂肪代谢出现异常,发生脂质堆积。因此我们推测长期服用这几种药物的病人具有更高的视网膜动脉硬化风险,并有可能出现视网膜的退化。为了验证这一假说,我们对Apo E-/-小鼠进行高脂饮食饲养,促使Apo E-/-小鼠形成动脉粥样硬化。在此基础上,我们研究了药物华法林、阿司匹林、氯吡格雷和DEHP对Apo E-/-小鼠视网膜细胞的影响。研究结果提示,华法林有可能导致高脂饮食诱导的Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化现象更为严重,并且造成视网膜细胞衰退。我们也进一步探讨其可能的分子机制。因此,我们的研究结果提示华法林的服用有可能在临床上加剧患者动脉粥样硬化,继而引起视网膜退化,导致视觉能力下降。目的:研究华法林、阿司匹林、氯吡格雷、DEHP是否存在促进或加重小鼠视网膜动脉粥样硬化作用和引发视网膜退行性变化,并进一步探索可能的作用机制。方法:采用Apo E-/-小鼠,观察华法林、阿司匹林、氯吡格雷、DEHP分别对动脉粥样硬化小鼠血管及视网膜的影响。高脂饮食喂养Apo E-/-小鼠8周。造模成功后按要求分别灌胃给药2周。取主动脉HE染色、油红O染色显示动脉粥样硬化模型建立;取小鼠视网膜冰冻切片行HE染色、免疫组化染色,RNA-seq实验等,比较不同药物作用效果。结果:1.各组小鼠的体重较实验前都有不同程度的增加,差异有统计学意义（P<0.05）。对照组与各组之间的TC和LDL-C有显着性差异,随实验的进行TC和LDL-C的值都有不同程度的提高,较明显的是DEHP组有显着差异（P<0.01）。对照组与各组之间的HDL-C和TG之间有显着性差异。2.与对照组相比较,各实验组小鼠主动脉都有不同程度的动脉粥样硬化斑块沉积。其中华法林低、中剂量组AS斑块沉积较模型组更为明显,斑块面积增大,管腔狭窄。阿司匹林、氯吡格雷组小鼠主动脉管腔内均可见AS斑块,斑块面积较模型组减小。DEHP组斑块大小与模型组相比未见明显差别。3.实验结果发现华法林高剂量组动物视网膜外核层细胞出现明显变薄。视网膜外核层主要是视网膜感光细胞（photoreceptors）。感光细胞的主要功能是将光信号转换为电信号。因此感光细胞的减少提示动物的视觉能力下降。此外,华法林、阿司匹林和氯吡格雷也导致了视网膜内核层的变化,提示了视网膜内核层细胞发生退化。4.脾脏和肾脏组织切片染色并未发现明显病变。证明华法林对视网膜的影响是有一定组织特异性的。结论:我们的结果发现,华法林可能加剧高脂饮食诱导的Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化现象,并且造成视网膜细胞衰退。我们也利用RNA-seq测序初步探索其可能的分子机制。因此,我们的研究结果提示华法林的服用有可能在临床上加剧病人动脉粥样硬化,继而引起视网膜的退化,导致病人视觉能力下降,加剧病人的视网膜损伤风险。
卜敬华[4]（2019）在《高脂血症对小鼠睑板腺和角膜内皮的影响及其作用机制的研究》文中研究表明第一部分:高脂饮食诱导的肥胖和高脂血症通过调节PPAR-γ通路促进小鼠睑板腺炎症目的:探讨高脂饮食诱导的肥胖和高脂血症与睑板腺慢性炎症之间的关系,并探究PPAR-γ在其中的作用。方法:将雄性C57BL/6J小鼠置于四种不同的喂养方案:a)正常饮食（SD）;b)高脂饮食（HFD）;c)高脂饮食+罗格列酮（PPAR-γ激动剂）（HFD-rosi）;d)高脂饮食喂养4周,然后替换为正常饮食喂养4周（HFD-rev）。定期监测体重、眼表和眼睑变化。对睑板腺组织切片进行H&E染色,油红O染色和CD45、IL-1β、IL-6、TNF-α和F4/80的免疫荧光染色。通过qRT-PCR评估睑板腺中PPAR-γ、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、IFN-γ、MMP-3 和 MMP-9 的基因表达。进行蛋白印迹以检测 PPAR-γ、NF-κB p65、p-NF-κB p65、p38、p-p38、JNK、p-JNK、ERK和p-ERK的蛋白表达情况。结果:高脂饮食诱导小鼠体重和血液胆固醇水平显着增加。油红O染色显示高脂饮食小鼠睑板腺腺泡中脂质的积累。H&E染色显示高脂饮食小鼠中睑板腺腺泡之间细胞浸润增加。与正常饮食小鼠相比,高脂饮食小鼠的睑板腺中观察到CD45和F4/80阳性细胞的浸润增加。高脂饮食小鼠的睑板腺PPAR-γ表达显着下调,炎症相关细胞因子显着上调以及MAPKs和NF-κBp65磷酸化激活。给与罗格列酮治疗（HFD-rosi）以及高脂饮食后再改为正常饮食（HFD-rev）的小鼠睑板腺炎症状态可出现明显逆转。结论:高脂饮食诱导的肥胖和高脂血症通过抑制小鼠睑板腺PPAR-γ表达,激活MAPK和NF-κB信号通路,促进睑板腺炎症。第二部分:载脂蛋白E缺乏导致小鼠睑板腺功能障碍目的:研究载脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）小鼠睑板腺和眼表组织的病理变化,探讨睑板腺功能障碍（MGD）与高脂血症的关系。方法:在裂隙灯显微镜下观察3、5、7个月龄雄性ApoE-/-小鼠以及年龄和性别匹配的野生型（WT）小鼠的眼表和睑缘情况,用立体显微镜对睑板腺结构进行观察。睑板腺组织切片进行H&E染色,油红O染色,TUNEL染色和K10、Fabp5、Ki67、p63、PPAR-γ、IL-6、TNF-α、NF-κB p65、p-NF-κB p65、AC-caspase 8 的免疫荧光染色。免疫组织化学染色方法检测CD45、4-HNE、NOX-4、3-NT。实时定量PCR和蛋白印迹检测睑板腺组织中相应基因表达。通过灌胃的方法给5个月的ApoE-/-小鼠分别服用罗格列酮和GW9662+罗格列酮2个月。结果:ApoE-/-小鼠眼睑出现显着异常,睑板腺缺失,腺泡形态异常,导管扩张,睑板腺开口堵塞。ApoE-/-小鼠中的睑板腺腺泡呈现出过度的脂质沉积。睑板腺导管和腺泡细胞异常角化增加,睑板腺腺泡细胞增殖减少,细胞凋亡增加。炎症细胞浸润到睑板腺腺泡的周围微环境中,NF-κB信号通路在睑板腺中被激活。ApoE-/-小鼠的睑板腺腺泡细胞中的氧化应激明显增加。进一步研究显示ApoE-/-小鼠睑板腺腺泡细胞中PPAR-γ的表达下调。PPAR-γ激动剂罗格列酮治疗2个月可降低ApoE-/-小鼠眼睑、角膜病变发病率,同时可以减轻睑板腺炎症。结论:MGD和高脂血症密切相关,ApoE-/-小鼠可作为模型研究脂代谢紊乱相关性MGD的病理生理和治疗。第三部分:高脂血症影响角膜内皮的紧密连接和泵功能目的:探讨不同高脂血症小鼠模型中角膜内皮的病理变化及相关机制。方法:采用喂养4周龄雄性野生型（WT）小鼠高脂饮食（HFD）和喂养载脂蛋白E敲除（ApoE-/-）小鼠正常饮食（SD）或高脂饮食的方法,建立三种不同程度的高脂血症小鼠模型。对照组饲喂WT小鼠正常饮食。16周后检测不同组小鼠体重,胆固醇水平和空腹血糖浓度。通过活体共聚焦显微镜评估角膜内皮细胞密度、角膜内皮细胞形态。对角膜内皮组织进行扫描电镜、透射电镜检测和ZO-1、N-cadherin、Na+-K+-ATPase、4-羟基壬烯醛（4-HNE）、8-羟基-2’-脱氧鸟苷（8-OHdG）和NADPH氧化酶4（NOX4）的免疫染色。通过qRT-PCR评估角膜内皮中ZO-1、N-cadherin和Na+-K+-ATPase的基因表达水平。对全角膜组织进行油红O染色以评估脂质沉积情况。通过角膜内皮损伤模型观察不同组小鼠角膜内皮损伤后的恢复功能。提取房水并进行质谱检测其中脂肪酸变化。用不同浓度的棕榈酸处理体外培养的兔角膜内皮细胞以模拟体内高脂血症。在棕榈酸处理24小时后,进行 CCK8 活力测定和 ZO-1、N-cadherin、Na+-K+-ATPase、TOM20 和 TIM23 的免疫荧光染色。通过 qRT-PCR 检测 ZO-1、N-cadherin、Na+-K+-ATPase、NOX4、NFE2L2（Nrf2）、超氧化物歧化酶1（SOD1）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶1（GPX1）的基因表达水平。结果:我们发现喂养高脂饲料的WT小鼠和喂养正常饲料或高脂饲料的ApoE-/-小鼠均可诱导出不同程度的高脂血症。油红O激活,线粒体超微结构异常改变。在高脂血症小鼠的角膜内皮细胞中还可观察到染色显示高脂血症小鼠的角膜内皮细胞中出现脂滴的积聚。在高脂血症模型小鼠中观察到角膜内皮细胞密度降低,内皮细胞形态异常,六边形比例明显下降,内皮细胞紧密连接破坏,内皮细胞表面微绒毛减少,泵功能标记物Na+-K+-ATPase表达紊乱且表达量减少,氧化应激细胞凋亡增加。此外,高脂血症小鼠内皮在损伤后恢复能力下降。通过质谱的方法检测房水中脂肪酸含量,发现在高脂血症小鼠房水中棕榈酸水平显着增加。体外培养的兔角膜内皮细胞显示出对棕榈酸的剂量依赖性细胞毒性,棕榈酸还可导致体外培养的兔角膜内皮细胞形态改变,泵功能降低,线粒体破坏,氧化应激标志物表达升高。结论:高脂血症可诱导角膜内皮细胞氧化应激,最终导致角膜内皮的病理改变。高脂血症可能是角膜内皮功能障碍的重要危险因素。
张蕊,赵福梅,丛洪良[5]（2019）在《载脂蛋白E的合成、结构及功能》文中研究说明冠心病（CHD）是遗传和环境因素共同引起的多因素疾病,其病理、生理基础是在冠状动脉粥样硬化病变的基础上,心肌供氧和需氧量的失衡,引起心肌细胞缺血缺氧,最终导致细胞的缺血受损,导致的一系列并发症。动脉粥样硬化（AS）是冠心病的基本病理基础,脂质代谢紊乱与动脉粥样硬化及
黄帆[6]（2019）在《载脂蛋白E对星形胶质细胞NF-κB信号通路及MMP-9作用机制研究》文中研究指明目的:检测ApoE基因敲除型（ApoE-/-）和野生型（WT）小鼠多发性硬化动物模型脑组织中p65/NF-κ B、MMP-9的表达情况;探索ApoE影响星形胶质细胞分泌MMP-9的可能机制,是否通过TNF-α/NF-κ B炎症通路起调节作用;利用生物信息学技术,探索TNF-α刺激星形胶质细胞的差异基因和关键通路。方法1.免疫诱导野生型和ApoE敲除型小鼠建立EAE模型,免疫组化检测各组小鼠脑组织中MMP-9和p65表达情况,实验动物可分为4组:W-EAE组、W-Control 组以及 E-EAE 组、E-Control 组;2.WT和ApoE-/-小鼠原代星形胶质细胞培养并通过免疫荧光法鉴定星形胶质细胞;3.慢病毒包装siRNA干扰WT和ApoE-/-小鼠原代星形胶质细胞中RelA（p65）基因表达,WT和ApoE-/-星形胶质细胞可分为6组:W-KD组、W-NC组、W-Control 组以及 E-KD 组、E-NC 组、E-Control 组;4.RT-PCR、Western Blot检测p65基因沉默效率,观察p65低表达对星形胶质细胞分泌MMP-9、TNF-α的影响;5.p65低表达后,ELISA、RT-PCR检测 TNF-α干预对WT和ApoE-/-小鼠星形胶质细胞MMP-9表达的影响;6.GEO数据库下载GSE73022,通过KEGG-pathway、蛋白互作网络和GO分析,找出TNF-α对野生型小鼠星形胶质细胞差异基因和富集的关键通路。结果1.根据Weaver’s 15分法的标准进行神经功能评分,慢性期（第35天）ApoE-/-组评分高于WT组（P<0.05）;2.通过免疫组化检测结果显示,与WT-EAE相比,ApoE-/-小鼠EAE脑组织中p65、MMP-9分泌较高（P<0.05）;3.免疫荧光鉴定星形胶质细胞,倒置显微镜观察显示,培养的小鼠原代星形胶质细胞的纯度>90%,可为后续实验细胞;4.mRNA水平和蛋白质水平检测结果,显示慢病毒包装的siRNA能够显着抑制p65在体外星形胶质细胞中的表达（P<0.05）;5.RT-PCR结果显示,与阴性空载组及对照组比较,p65基因沉默组MMP-9呈现低表达（P<0.05）;ELISA结果显示,与正常组小鼠相比,E-KD组和W-KD组星形胶质细胞中的MMP-9的表达水平均降低（P<0.05）,E-KD组星形胶质细胞的MMP-9的表达水平稍高于W-KD组（P<0.05）;6.加入50ng/ml TNF-α 24小时后,ELISA结果显示,与炎症因子处理前比较,NC组和Control组星形胶质细胞的MMP-9表达量升高（P<0.05）;T-KD组星形胶质细胞的MMP-9的表达水平稍高于KD组,但差异无统计学意义（P>0.05）,但ApoE-/-组表达量均高于WT组（P<0.05）;7.R语言分析结果发现,TNF-α刺激星形胶质细胞后,发现上调基因386个,下调基因181个,得到的核心基因包括趋化因子CXCL9/10/11、IL-6、Tnfaip3、MYD88、STAT2等;差异基因富集的通路包括TNF信号通路、Toll样受体信号通路、NF-K B信号传导途径以及NOD样受体信号通路等。结论1.慢性期ApoE缺乏会加重EAE病情,且ApoE-/-小鼠EAE脑组织中p65、MMP-9呈高表达状态;2.p65基因在ApoE-/-小鼠星形胶质细胞中高表达,p65基因沉默能够显着抑制MMP-9、TNF-α分泌水平;3.在促炎因子TNF-α的作用下,星形胶质细胞MMP-9表达增加,说明TNF-α能正向调节星形胶质细胞MMP-9的表达;4.阻断NF-K B途经后,抑制了 TNF-α对星形胶质细胞表达MMP-9的影响,说明TNF-α可通过NF-κ B途径调星形胶质细胞表达MMP-9,且ApoE缺乏会引起星形胶质细胞分泌MMP-9增加;5.关于TNF-α对星形胶质细胞的影响的生物信息学研究,可为抗炎作用在中枢神经系统相关疾病的治疗提供新思路。
张蕊[7]（2019）在《中国天津地区汉族人群载脂蛋白E启动子基因多态性与冠心病的关系探讨》文中进行了进一步梳理目的:本研究主要目的是探讨中国天津地区人群APOE启动子-219G/T、-427T/C、-491A/T位点基因多态性、血浆血脂蛋白、血清载脂蛋白E含量水平与冠心病发病危险性之间的关系;采用荧光报告基因的方法,探讨-427T/C启动子部位基因变异对APOE基因转录的影响;对连续服用3个月他汀类药物后,对APOE-219G/T、-427T/C、-491A/T不同基因多态性的CHD患者的血浆脂蛋白的调节作用,为我国冠心病遗传学基础提供理论依据,进一步为冠心病患者提供理论依据更充分及更精准的个性化治疗。方法:1.APOE启动子-219G/T、-427T/C、-491A/T基因变异与血浆脂蛋白水平和冠心病患病的关系:采用病例对照研究,受试者选取天津地区汉族人群,来自2015年10月～2016年9月在天津市胸科医院心内科住院的患者,入院后他们接受相关的化验检查及心脏血管介入检查,根据最终造影情况分成两组,冠心病组、正常对照组。使用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法,分析APOE-219G/T、-427T/C、-491A/T基因型,同时采用ELISA方法测定其血清APOE的含量,分析APOE-219G/T、-427T/C、-491A/T基因遗传多态性、血清的载脂蛋白E含量、血浆脂蛋白代谢及冠心病风险之间的关系。2.APOE启动子-427T/C基因突变对细胞DNA除启动子部位以外的下游基因表达转录活性的影响:根据结果,-427T/C位点C等位基因携带者为冠心病的危险因素,且实验结果显示C等位基因携带者载脂蛋白E含量较T等位基因携带者载脂蛋白E含量有下降趋势,考虑这是影响冠心病及血脂的可能途径,故我们仅选择-427TT和-427CC纯合子基因,通过PCR扩增该启动子区域-342bp～-580bp基因片段。纯化测序后,将该片段与pGL2-Basic质粒通过酶切及连接酶相连接,构建pGL2-APOE/-427TT和pGL2-APOE/-427CC重组质粒,经过测序验证连接正确后,经阳离子脂质体介导的转染法将合成连接的重组质粒导入到293T细胞,收集细胞,测定荧光素酶报告基因在细胞中的强度,计算携带不同基因型的重组质粒各自荧光素酶的相对活性,经过统计分析,最终得出APOE不同基因型对转录活性的不同影响。3.含有APOE-219G/T、-427T/C、-491A/T启动子部位三个位点基因多态性检测后,随访所有冠心病患者,这些患者均连续服用阿托伐他汀钙每晚一次20mg。服用12周后,门诊复查化验血脂,观察不同APOE启动子-219G/T、-427T/C、-491A/T基因型与阿托伐他汀钙调节血脂作用的关系。结果:1.冠心病组和对照组一般资料比较,2组年龄差异有统计学意义,冠心病组年龄显着高于对照组;2组男性比例有差异,具有统计学意义。冠心病组男性比例显着高于对照组;在CHD组中,血清TG、LP（a）水平显着高于对照组;血清HDL、APOAI水平显着低于对照组,差异均由统计学意义。2.比较所有研究对象的不同基因型（-219GG/-219GT+TT、-427TT/-427TC+CC、-491AA/-491AT+TT）之间血脂和载脂蛋白的差异,可见对照组中-219位点GT+TT基因型与GG基因型相比,TC、LDL-C、APOA、HDL-C水平升高有统计学差异;可见冠心病组-427位点TC+CC基因型与TT基因型相比,APOB浓度升高,差异有统计学意义;对照组-427位点,TC+CC基因型与TT基因型相比APOB浓度升高,差异具有统计学意义;可见冠心病组中-491AT+TT基因型与AA基因型相比ApoA/B比值有统计学差异,其余TC、TG、HDL-C等血脂均无统计学差异,对照组中各血脂及载脂蛋白均无统计学差异。3.-219T等位基因频率在冠心病组是0.268,在对照组为0.288;-427C等位基因频率在冠心病组是0.211,在对照组是0.098;-491T等位基因频率在冠心病组是0.053,在对照组是0.074,以上频率与国外报道均有差异。4.-427C等位基因频率在冠心病组显着高于对照组,分布具有统计学差异。多因素Logistic回归分析显示-427C是冠心病的危险因素。5.比较APOE启动子-219G/T、-491A/T位点对冠心病和对照组中APOE浓度的影响,发现两个位点的基因多态性之间APOE浓度并无统计学差异;同样-427T/C位点TC+CC基因型与TT基因型相比,APOE浓度虽有升高趋势,亦无统计学差异。6.转染pGL2-APOE/-427TT的293T细胞中荧光素酶的相对活性显着高于pGL2-APOE/-427CC的活性（P<0.05）,由此可证明,T等位基因携带者的载脂蛋白E转录活性比C等位基因携带者的转录活性升高,差异有统计学意义。7.冠心病患者服用阿托伐他汀钙后,血浆脂质水平与APOE基因多态性相关,-219位点GT+TT基因型组与GG基因型组相比调脂治疗前后血脂水平变化率无统计学差异;-427位点TC+CC基因型组与TT基因型组治疗前后血脂水平变化率比较可见,TC+CC基因型组TC、LDL降低更明显,差异具有统计学意义;-491位点AT+TT基因型组与AA基因型组相比调脂治疗前后血脂水平变化率无统计学差异。结论:1.APOE启动子-427C等位基因携带者是冠心病的危险因素。2.报告基因实验结果显示:在体外细胞,携带变异性C等位基因的转录活性明显比携带野生T等位基因者活性减低,APOE启动子-427T/C位点是调节APOE启动子转录活性并影响血清APOE浓度的功能性位点。3.APOE基因-427C等位基因携带者对阿托伐他汀钙调脂效果更敏感。
廖玲[8]（2019）在《LIPC基因单核苷酸多态性与新生血管型老年黄斑变性关联性研究》文中认为目的:国际老年黄斑变性基因联盟（International AMD Genomics Consortium,IAMDGC）及其他研究团队通过全基因组关联分析（Genome Wide Association Studies,GWAS）和病例对照分析等方法发现了LIPC基因与老年黄斑变性（age-related macular degeneration,AMD）高度关联。脉络膜新生血管形成（choroidal neovascularization,CNV）是亚洲人群湿性老年黄斑变性的常见表型,其对应的新生血管型湿性老年黄斑变性在中国人群中较为常见。已报道的与AMD相关联的LIPC基因单核苷酸多态性位点（single nucleotide polymorphism,SNP）包括rs10468017、rs2043085、rs920915、rs493258和rs2070895,本研究旨在分析汕头地区汉族人群中以上位点与CNV的相关性。方法:在汕头国际眼科中心招募符合诊断标准的CNV患者221例,年龄性别与种族相匹配的健康对照200例进行病例对照研究。提取外周血DNA扩增特定片段后,使用SNaPshot（单碱基延伸法）对LIPC基因rs10468017、rs2043085、rs920915、rs493258和rs2070895五个位点进行基因分型。使用Sanger测序对分型结果进行验证。使用卡方检验分析各位点基因频率和基因型频率是否符合哈迪温伯平衡（Hardy-Weinberg equilibrium,HWZ）,P>0.05代表人群达到了遗传平衡;使用二元Logistic回归分析五个SNP位点与CNV的关联性,P<0.05表示差异具有统计学意义。为了进一步探索LIPC基因与CNV的关系,对以上五个SNP位点进行分群及分组的关联性分析。多重比较时使用Bonferroni法对P值进行校正。使用Haploview软件进行以上五个位点等位基因的连锁不平衡及单体型分析。结果:1.本研究纳入的五个SNP位点使用SNapshot进行基因分型的成功率均在99.8%以上,与Sanger测序所得结果一致。LIPC基因除rs2043085外,其余四个位点的健康对照组均符合哈迪温伯平衡（P>0.05）。2.LIPC基因rs493258最小等位基因C在显性遗传模式下患病风险是健康对照组的0.47倍,95%CI:0.32-0.70（P=0.000）。其余位点在两种遗传模式下与CNV的关联性无统计学意义。3.LIPC基因rs493258最小等位基因C在CNV中的基因频率为0.290,低于其在健康对照中的频率0.410,差异有统计学意义（P=0.000,多重校正后P=0.001）,其OR值为0.59,95%CI（0.44-0.78）。LIPC基因rs10468017最小等位基因T、rs2043085最小等位基因C、rs920915最小等位基因C和rs2070895最小等位基因A的基因频率在CNV及健康对照中的差异无统计学意义,P值分别为0.955、0.719、0.339和0.081,OR（95%CI）值为0.99（0.70-1.41）、1.05（0.80-1.38）、0.86（0.62-1.18）、0.79（0.59-1.03）。4.分组分析结果显示,男性受检者中rs493258最小等位基因C在CNV中的基因频率为0.276,低于其在健康对照组中的基因频率0.385,差异具有统计学意义（P=0.005,多重校正后P=0.05）,LIPC基因SNP位点rs10468017最小等位基因T、rs2043085最小等位基因C、rs920915最小等位基因C和rs2070895最小等位基因A在CNV中的基因频率与健康对照组中的基因频率的差异无统计学意义。分层分析结果显示以上位点在CNV组和健康对照组中的差异无统计学意义。5.LIPC基因rs10468017与rs2043085、rs493258、s920915之间处于连锁不平衡状态,D’依次为0.943、0.888和0.89,95%CI为0.85-0.98,0.5-0.97和0.69-0.97.LIPC基因rs493258与rs920915也处于连锁不平衡状态,D’=0.68（95%CI:0.53-0.8）。其中rs10468017与rs2043085之间的连锁不平衡程度最强。6.LIPC基因连锁的SNP位点rs10468017、rs2043085、rs493258和rs920915可形成7种单倍体型CCTG、CTTG、TTTG、CCTC、CTTC、CCCC和CTCC,其中两个单体型（CCCC和CTCC）在CNV组和健康对照组间的差异有统计学意义,P值分别为1.512×10-4和7.0×10-4,OR值（95%CI）为0.75（0.51-0.99）和0.78（0.41-0.86）。结论:1.本研究结果显示LIPC基因rs493258与汕头地区汉族人群新生血管型湿性老年黄斑变性相关联,是CNV的保护因素。该位点与CNV的关联性与性别相关,女性受检者中未检测到该位点与CNV的相关性。rs10468017、rs2043085、rs920915和rs2070895与汕头地区汉族人群新生血管型湿性老年黄斑变性无明显相关性。2.在本研究的汕头地区汉族人群中,LIPC基因rs10468017与rs2043085、rs493258、s920915之间处于连锁不平衡状态,其单体型（CCCC和CTCC）是新生血管型老年黄斑变性的保护因素。
张力仁[9]（2017）在《非杓型高血压病脉象特点与踝臂指数、ApoE基因多态性的相关性》文中指出脉诊是重要的中医临床技术,现代中医均仅以“寸口脉”作为临床脉诊技术。历史上首次出现“独取寸口”的诊法是源自《难经》。寸口脉为桡动脉的部分节段,是中医辨证体系的重要部分。寸口脉可以反映全身气血周转规律,也是脉气流经的起始点,与动脉硬化和高血压具有相关性。非杓型高血压是指夜间血压高于正常,昼夜曲线变浅或消失的一类高血压,昼夜节律失常夜间气血发生明显变化。非杓型高血压与动脉硬化程度、心脑血管事件密切相关,寸口脉的三部九候变化与非杓型高血压昼夜节律之间,目前尚无相关研究。本研究分为三个部分:研究综述、文献研究和临床研究。临床研究包括三个内容,一是非杓型高血压与脉象特点的相关性研究,二是非杓型高血压患者踝臂指数与脉象的相关性研究,三是非杓型高血压患者ApoE基因多态性与脉象的相关性研究。第一部分 研究综述本部分从三个方面进行了文献综述。综述一 寸口脉诊仪研究进展。介绍了脉诊仪的基本原理、研究进展和存在问题。脉诊仪研究在国家七五时出现脉诊仪的第一个研究高峰,目前脉诊仪的研究基础与设计思路基本奠基于当时的研究。2000年由于计算机的进步,出现了第二个研究高峰。以下就三个部分对脉诊仪进行说明:第一部分是脉诊仪的起源与发展过程;第二部分是脉诊仪使用的基本设计原理;第三部分是脉诊仪研究的现况。第一部分可以了解我国脉诊仪的起源是国外的脉搏波研究的原型设备,着重于数据解读不同用来进行脉象分析。国外因为血压计的发明,取代了脉搏波研究的地位,目前西医循环研究的主要指标是血压。原因是脉搏波需要应用波形分析,因此必然会使用到变量换转换器与数据分析公式,这导致了两个步骤中都可能出现干扰,没有血压研究的直观与单纯。但由于中医的脉象不计算罕见与特殊情况下的脉象,基本的就有28种,因此血压不适合作为脉象研究的基础。第二部分是说明脉诊仪研究采用的技术。脉搏的波动转换成图像的形式进行分析,七五时期主要使用的采集工具有固态式、液体式、气囊式。脉搏波的分析技术主要是频域分析与时域分析两种。概括的说:频域分析是指波形振幅、时域分析是脉率。脉搏经过变量转换器后会出现波形,事实上这个波形是由两个构面组成的。其中横轴是频率,纵轴是该频率信号的幅度,也就是所谓的频谱图。频谱图的组成是两个构面,因此分析频谱（波形）的时候除了分析时间变化外,还与影响幅度的关键因素有关。因此脉搏波的研究关键在两个变量可以进行转换,这样只要分析其中的一个构面（时域分析或频域分析）就可以获得需要的讯息。分析信号的频率结构,并在频率域中对信号进行描述从时间域变换到频率域,常用的方法是傅立叶级数和傅立叶变换。因此脉搏波研究的原理就是变量转换器研究与变量分析（频域分析或时域分析）。第三部份说明了变量转换器的进展,除了七五时期使用的固态、液态、气囊三种模式以外,目前进展到超声、声音、光电、电磁换能器,因经过数十年的研究数据累积,发现传统的变量转换器没有办法一次性如同人手,同时取得脉象在数位形势四个方面的特征。因此研究者认为这与变量转换器的功能不足有关,故改善了变量转换器的功能。其次是分析技术,由于类神经网络技术的成形,配合移动医疗具有的大数据特色,在数据分析方面目前已人工智能研究,让AI自动判断脉象是较前沿的研究。但目前没有大规模的搜集数据,因此人工智能类神经网络的优势尚未凸显。由于笔者是台湾人,对台湾研究进展具有接触管道较多的优势。台湾在脉诊研究上除了与大陆相同想证明中医理论的优势性外,还有建立新的循环理论,认为脉诊的功能是测量能量,采用的是共振方式,分析方法也属于频域分析,但指导的理论具有特殊性。此外,台湾人文社会学领与研究发达,因此哲学与医学史研究人员,对脉诊仪研究也都进行了反思与批判。目前台湾人文社会领域学者认为,中医理论利用科技取得客观化的可能很小,因为中医的思维模式与科学证据的直接取得具有差异,仅能间接的证明现象可能存在是不能进行实验验证。因此最佳的方式是立足于中医,吸收近代科学的成果,重新架构新的以脉象为核心的循环理论。综述二 非杓型高血压的研究概况介绍了非杓型高血压的危害和中医治疗特点。非杓形高血压与中医脉诊的气血运行理论具有高度相关性。因此非杓形高血压代表的气血失和,生物节律丧失的循环障碍,必然可以在中医脉诊中体现。非杓型形高血压是目前高血压研究的冷门领域,目前国内对非杓型高血压研究很少,中医对于非杓型高血压研究集中在时间医学方面。而对于非杓形高血压在临床诊断上的意义探讨较少也不深入,因此本研究的立意,具有一定的创新性与临床价值。综述三ApoE基因多态性的研究概况介绍了 ApoE基因多态性的研究热点、高血压相关性和中医观点。ApoE基因多态性是目前之代谢方面的特殊发现。本研究组经过文献回顾发现中医在该领域研究很少,因此对于中医诊断是否能够察觉出遗传的脂代谢异常属于未知的领域。本研究在这方面可以提共一个初步的认识,作为未来研究的可能方向的探索。第二部分 文献研究本部分从文献资料角度回顾独取寸口诊法的发展脉络与历史沿革。独取寸口源于《难经》,《难经》在东汉末年成书,在北宋获得官方认可的地位,首先被校正医书局收录并重新编纂。校正医书局将难经的理论与文字辑入其他医书中,并且校正后的《难经》被选入当时北宋太医院医师资格考试的指定教材。此之前,独取寸口脉诊法是多种脉诊法的其中之一,并没有特别突出的历史地位;此后,《难经》的独取寸口脉诊法成为金元四大家的主要脉诊方法,其余脉诊法则较少应用矣。金元明清整整近千年的医学思想都深受《难经》的影响。《难经》独取寸口脉诊法主要根据寸口是人身脉气循环的起止点,以胃气为根本,因此可反映人体的虚实盛衰研究目的是对寸口脉象“独取寸口”的发展脉络在理论方面发现《难经》的学说以《黄帝内经》的内容奠定理论基础。其次,《难经》选择“独取寸口”目的是为了达到扁鹊脉诊学脉思外揣内的境界,即《难经》关注在临床操作便利性的创新,提出符合中医传统简、效、便、廉特色的创新。但《难经》的缺点在理论与临床操作的过度简化,致理论较为狭隘、临床讯息太少,因此出现“脉证不合”“心中了了,指下难明”的问题。这种临床现象与理论不一致的问题,是明清两代脉学研究主要想解决的脉学研究问题。明清医家采用了标准化的原则,进行脉象规范化尝试。现代脉诊科学化研究的核心思想与明清相同。未来突破脉诊研究瓶颈的方向有两个:首先是优秀的顶层设计,结合现代科技方法与中医特色,构建新的脉象理论;其次是搜集临床讯息,验证新脉象理论的临床可靠性、一致性。经过临床数据的搜集,对理论与现象的不一致持续修正,最终才可能获得一个较深入、较全面的新脉学理论,对脉学发展带来革新。第三部分 临床研究临床研究一非杓型高血压与脉象的相关性研究目的:应用道生DS01-C型脉象采集设备,客观分析非杓型高血压患者的夜间寸口脉象特点,探讨非杓型高血压患者血压下降率与寸口脉象的相关性。方法:研究对象为中国中医科学院西苑医院2015年1月1日到2016年1月31日124例非杓型高血压患者。以道生DS01-C型客观化脉诊仪采集脉象、以西苑医院动态血压室24小时动态血压监测设备进行血压数据采集。结果:试验总计纳入非杓型高血压患者124例,其中男性61人（占49%）,女性63人（占51%）。年龄分布小于60岁患者有27人（占22%）,60岁到80岁73人（占58%）,80岁以上有24人（占19%）。平均血压控制在收缩压145.7±23mmHg,舒张压86.1±13.6mmHg。夜间血压下降率与结脉的相关系数0.26（P=0.03）,代脉的相关系数0.286（P=0.01）,滑脉的相关系数0.193（P=0.32）。提示当夜间血压下降越多,则结、代、滑三种脉象出现的频率增加。临床研究二 非杓型高血压患者踝臂指数与脉象的相关性研究目的:应用道生DS01-C型脉象采集设备,欧姆龙动脉硬化测定仪BP-203RPEⅡ测量肢体动脉血压,客观分析非杓形高血压患者的脉象与踝臂指数的相关性。方法:对中国中医科学院西苑医院2015年1月1日到2017年1月31日124例非杓型高血压患者以道生DS01-C型客观化脉诊仪采集脉象;欧姆龙动脉硬化测定仪同步监测体检人员踝臂指数、心率、平均动脉压,同时记录身高、体重、年龄、性别。结果:试验总计纳入患者124例。踝臂指数与代脉的相关系数0.294（P=0.01）,实脉的相关系数0.318（P=0.00）,浮脉的相关系数0.191（P=0.33）,弦脉的相关系数0.743（P=0.00）,滑脉的相关系数0.287（P= 0.01）。临床研究三 非杓型高血压患者ApoE基因多态性与脉象的相关性目的:应用道生DS01-C型脉象采集设备,探讨非杓形高血压患者ApoE基因多态性与脉象的相关性。方法:对中国中医科学院西苑医院2015年1月1日到2017年1月31日124例非杓型高血压患者以道生DS01-C型客观化脉诊仪采集脉象,以赛乐奇生物载脂蛋白E（ApoE）基因型检测试剂盒（基因芯片法）为检测试剂定性检测全血样本中的ApoE基因分型。ApoE基因分型共计3大类（ApoE2;ApoE3;Apo E4）6种分型。ApoE2含载脂蛋白E2/E2型与载脂蛋白E2/E3型;ApoE3含载脂蛋白E2/E4型与载脂蛋白E3/E3型;Apo E4含载脂蛋白E3/E4型与载脂蛋白E4/E4 型。结果:ApoE与脉象具有统计学意义（P<0.05）的是促脉。促脉的相关系数 0.205（P=0.23）。总之,中医脉象具有独特的科学价值,本研究以非杓形高血压患者为研究对象,对非杓形高血压患者的寸口脉象特点,以及寸口脉象与踝臂指数、ApoE基因多态性进行了初步探讨。本文也存在不足之处,如样本量较少、脉象分类较为简单等,以期在今后工作中进一步提升。
张俊[10]（2017）在《烟酸对载脂蛋白M和载脂蛋白E表达的影响及机制探讨》文中进行了进一步梳理目的:本实验以人肝癌细胞株（HepG2）为细胞模型,研究烟酸对载脂蛋白M（apolipoprotein M,apoM）和载脂蛋白E（apolipoprotein E,apoE）表达的影响,并探讨可能的信号通路。方法:体外培养HepG2细胞后,用不同浓度的烟酸（0、0.1、1、3、10mmol/L）干预24 h;选用10mmol/L的烟酸与Hep G2细胞共同孵育0、6、12、24、48 h;提取细胞总RNA并逆转录成cDNA,采用实时荧光定量RT-PCR法检测基因apoM、apoE及内参GAPDH的mRNA表达水平。分别用烟酸（10mmol/L）和/或PI-3K抑制剂LY294002（LY,10μM）处理HepG2细胞,采用western blot检测apoM的蛋白水平。结果:烟酸呈剂量依赖性上调基因apoM和apo E的mRNA表达,当烟酸浓度超过1mmol/L时,与对照组相比结果均有显着性差异（P<0.05）。时间曲线试验显示随着刺激时间的延长,Hep G2细胞中apoM和apoE mRNA表达水平表现为先升高后降低的趋势。刺激24h后表达水平最高,48h后下降。烟酸和PI-3K抑制剂LY均显着升高HepG2细胞apoM和apoE mRNA水平（P<0.05）;双因素方差分析（Two-Way ANOVA）表明烟酸和LY对HepG2细胞apoM和apoE mRNA影响的交互作用无统计学意义。同时,与对照组相比,烟酸和/或LY组的apoM蛋白表达明显增加（P<0.05）结论:烟酸上调HepG2细胞apoM和apo E基因表达,但并不通过PI-3K途径。
二、载脂蛋白E与视网膜疾病关系的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、载脂蛋白E与视网膜疾病关系的研究（论文提纲范文）
（2）补阳还五汤对大鼠视网膜蓝光损伤保护作用的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 干性老年黄斑变性视网膜损伤动物模型的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（3）华法林对ApoE基因敲除动脉粥样硬化小鼠血管及视网膜的影响研究（论文提纲范文）
| 缩略词表(abbreviation) |
| 摘要 |
| Abstract |
| 1、引言 |
| 2、材料与方法 |
| 2.1 、材料 |
| 2.1.1 实验仪器 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 实验动物 |
| 2.2 、方法 |
| 2.2.1 小鼠灌胃给药 |
| 2.2.2 小鼠的处理(取眼球、取主动脉) |
| 2.2.3 血脂检测 |
| 2.2.4 主动脉大体油红染色 |
| 2.2.5 主动脉石蜡切片和染色 |
| 2.2.6 视网膜冰冻切片的制作 |
| 2.2.7 视网膜免疫组化染色 |
| 2.2.8 RNA转录组测序技术(RNA-SEQ) |
| 2.2.9 数据处理 |
| 3、结果 |
| 3.1 体重与血脂 |
| 3.2 主动脉大体油红染色 |
| 3.3 主动脉HE染色与免疫组化染色 |
| 3.4 视网膜HE染色 |
| 3.5 视网膜免疫组化染色 |
| 3.6 脾和肾HE染色 |
| 3.7 RNA-SEQ |
| 4、讨论 |
| 5、结论 |
| 6、参考文献 |
| 附录 个人简历 |
| 致谢 |
| 综述 视网膜静脉阻塞的治疗进展 |
| 参考文献 |
（4）高脂血症对小鼠睑板腺和角膜内皮的影响及其作用机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 睑板腺 |
| 1.1.1 睑板腺结构 |
| 1.1.2 睑板腺功能 |
| 1.1.3 睑板腺功能障碍 |
| 1.2 角膜内皮的结构和功能 |
| 1.3 高脂血症 |
| 1.4 高脂血症和眼部疾病 |
| 1.4.1 脂性角膜弓 |
| 1.4.2 脂质角膜病 |
| 1.4.3 糖尿病性视网膜病变 |
| 1.5 研究现状和本课题的研究意义 |
| 第二章 高脂饮食诱导的肥胖和高脂血症通过PPAR-γ通路促进小鼠睑板腺炎症 |
| 2.1 背景介绍 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 动物 |
| 2.2.2 主要仪器设备 |
| 2.2.3 主要试剂与药品 |
| 2.2.4 抗体 |
| 2.2.5 主要耗材 |
| 2.2.6 主要溶液配制 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 动物饲养与处理 |
| 2.3.2 裂隙灯检查 |
| 2.3.3 血液中总胆固醇含量检测 |
| 2.3.4 H&E染色 |
| 2.3.5 油红O染色 |
| 2.3.6 免疫荧光染色 |
| 2.3.7 RNA提取、反转录和qRT-PCR |
| 2.3.8 引物设计 |
| 2.3.9 Western Blot |
| 2.3.10 透射电镜 |
| 2.3.11 统计方法 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 高脂饮食可以诱导小鼠的肥胖和高脂血症以及睑板腺分泌物的异常 |
| 2.4.2 高脂饮食可以诱导小鼠睑板腺组织学改变 |
| 2.4.3 高脂饮食可以诱导小鼠睑板腺炎症细胞浸润 |
| 2.4.4 高脂饮食可以改变小鼠睑板腺PPAR-γ的表达水平 |
| 2.4.5 高脂饮食可以激活小鼠睑板腺MAPK和NF-κB信号通路 |
| 2.4.6 高脂饮食可以促进小鼠睑板腺腺泡细胞凋亡 |
| 2.4.7 高脂饮食可以破坏小鼠睑板腺线粒体结构 |
| 2.4.8 恢复饮食可以逆转小鼠睑板腺的表型 |
| 2.4.9 罗格列酮可以减轻高脂饮食诱导的睑板腺炎症 |
| 2.5 讨论 |
| 第三章 载脂蛋白E缺乏导致小鼠睑板腺功能障碍 |
| 3.1 背景介绍 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 动物 |
| 3.2.2 主要仪器设备 |
| 3.2.3 主要试剂与药品 |
| 3.2.4 抗体 |
| 3.2.5 主要耗材 |
| 3.2.6 主要溶液配制 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 动物饲养与处理 |
| 3.3.2 裂隙灯检查 |
| 3.3.3 血液总胆固醇含量检测 |
| 3.3.4 H&E染色 |
| 3.3.5 油红O染色 |
| 3.3.6 凋亡检测 |
| 3.3.7 免疫荧光染色 |
| 3.3.8 免疫组织化学染色 |
| 3.3.9 RNA提取、反转录和qRT-PCR |
| 3.3.10 引物设计 |
| 3.3.11 Western Blot |
| 3.3.12 统计方法 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 ApoE~(-/-)小鼠特征 |
| 3.4.2 ApoE~(-/-)小鼠睑板腺和眼表临床表现 |
| 3.4.3 ApoE~(-/-)小鼠睑板腺细胞的病理改变 |
| 3.4.4 ApoE~(-/-)小鼠眼睑组织的炎症 |
| 3.4.5 ApoE~(-/-)小鼠睑板腺细胞的氧化应激 |
| 3.4.6 ApoE~(-/-)小鼠睑板腺细胞分化的改变 |
| 3.4.7 PPAR-γ激动剂可显着改善ApoE~(-/-)小鼠睑板腺的病理改变 |
| 3.5 讨论 |
| 第四章 高脂血症影响角膜内皮的紧密连接和泵功能 |
| 4.1 背景介绍 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 动物 |
| 4.2.2 主要仪器设备 |
| 4.2.3 主要试剂与药品 |
| 4.2.4 抗体 |
| 4.2.5 主要耗材 |
| 4.2.6 主要溶液配制 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 动物 |
| 4.3.2 高脂血症动物的建立 |
| 4.3.3 血液胆固醇和空腹血糖检测 |
| 4.3.4 油红O染色 |
| 4.3.5 活体共聚焦显微镜 |
| 4.3.6 小鼠内皮损伤模型的建立 |
| 4.3.7 扫描电镜 |
| 4.3.8 透射电镜 |
| 4.3.9 房水的提取和检测 |
| 4.3.10 兔角膜内皮细胞原代培养 |
| 4.3.11 棕榈酸制备 |
| 4.3.12 CCK8实验 |
| 4.3.13 免疫荧光染色 |
| 4.3.14 免疫组织化学染色 |
| 4.3.15 RNA提取、反转录和qRT-PCR |
| 4.3.16 引物设计 |
| 4.3.17 统计方法 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 ApoE基因缺陷和高脂饮食可以诱导小鼠高脂血症以及角膜内皮细胞的脂质沉积 |
| 4.4.2 高脂血症导致小鼠角膜内皮细胞表型改变 |
| 4.4.3 高脂血症导致小鼠角膜内皮细胞损伤后失代偿 |
| 4.4.4 高脂血症诱导小鼠角膜内皮细胞氧化应激 |
| 4.4.5 棕榈酸诱导体外培养的兔角膜内皮细胞表型改变 |
| 4.4.6 棕榈酸诱导体外培养的兔角膜内皮细胞氧化应激和线粒体功能障碍 |
| 4.5 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 博士在读期间相关科研成果和获奖 |
| 致谢 |
（5）载脂蛋白E的合成、结构及功能（论文提纲范文）
| 1 ApoE的合成 |
| 2 ApoE的结构 |
| 3 ApoE的功能 |
| 3.1 ApoE与血脂和脂蛋白的关系: |
| 3.2 ApoE基因多态性与相关疾病的关系: |
（6）载脂蛋白E对星形胶质细胞NF-κB信号通路及MMP-9作用机制研究（论文提纲范文）
| 个人简历 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 研究背景 |
| 第一部分 阐述p65与MMP-9是否参与EAE的疾病进展 |
| 1.1 研究材料 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.3 研究结果 |
| 1.4 讨论 |
| 第二部分 阐述ApoE在星形胶质细胞中调控MMP-9机制研究 |
| 2.1 研究材料 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.3 研究结果 |
| 2.4 讨论 |
| 第三部分 利用生物信息学探索TNF-α影响星形胶质细胞差异基因和关键通路 |
| 3.1 分析对象 |
| 3.2 分析方法 |
| 3.3 分析结果 |
| 3.4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 致谢 |
| 攻读硕士研究生期间的研究成果 |
（7）中国天津地区汉族人群载脂蛋白E启动子基因多态性与冠心病的关系探讨（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、APOE-219G/T、-427T/C、-491A/T启动子基因多态性与脂蛋白代谢和冠心病的关系 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 研究对象 |
| 1.1.2 主要试剂和仪器 |
| 1.1.3 研究方法 |
| 1.1.4 统计学分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 CHD组与对照组一般资料比较 |
| 1.2.2 APOE-219G/T、-427T/C、-491A/T基因多态性分析 |
| 1.2.3 APOE-219G/T、-427T/C、-491A/T基因遗传平衡性检验 |
| 1.2.4 APOE-219G/T、-427T/C、-491A/T不同基因型的血脂情况和APOE 浓度的比较 |
| 1.2.5 APOE-219G/T、-427T/C、-491A/T基因分布频率及其与冠心病的关系 |
| 1.2.6 冠心病危险因素多因素非条件Logistic回归 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 二、APOE-427T/C基因多态性在真核细胞中对蛋白转录活性的影响 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.1.3 统计学分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 目的基因APE-427T/C片段的获得 |
| 2.2.2 pGL2-APOE重组质粒的鉴定 |
| 2.2.3 pGL2-APOE重组质粒转染293T载体细胞 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 三、APOE-219G/T、-427T/C、-491A/T基因多态性与阿托伐他汀钙对CHD患者血脂调节的作用的关系 |
| 3.1 对象与方法 |
| 3.1.1 研究对象 |
| 3.1.2 研究方法 |
| 3.1.3 统计学分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 阿托伐他汀钙调脂治疗前后复查血脂水平的变化 |
| 3.2.2 APOE-427T/C基因多态性对长期临床预后的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 全文结果 |
| 本研究局限性和进一步研究方向 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 载脂蛋白E结构和功能的研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）LIPC基因单核苷酸多态性与新生血管型老年黄斑变性关联性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词对照表 |
| 引言 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验试剂 |
| 1.2 实验试剂的配制 |
| 1.3 实验耗材 |
| 1.4 主要实验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 研究对象选择 |
| 2.2 受试者眼科检查 |
| 2.3 样本纳入及排除标准 |
| 2.4 全血DNA提取 |
| 2.5 基因分型 |
| 2.6 Sanger测序验证 |
| 2.7 统计学分析 |
| 2.8 连锁不平衡及单体型分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 研究对象基本信息 |
| 3.2 LIPC基因分型结果及Sanger测序验证结果 |
| 3.3 LIPC基因SNP位点不同基因型与CNV的关联性 |
| 3.4 LIPC基因SNP位点不同等位基因与CNV的关联性 |
| 3.5 分组分析LIPC基因五个SNP位点与CNV的关联性 |
| 3.6 分层分析LIPC基因五个SNP位点与CNV的关联性 |
| 3.7 LIPC基因五个SNP位点连锁不平衡分析与单体型分析 |
| 4 讨论 |
| 研究总结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录1 在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
（9）非杓型高血压病脉象特点与踝臂指数、ApoE基因多态性的相关性（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 研究综述 |
| 综述一、寸口脉象脉诊仪研究进展 |
| 1 脉诊仪的发展沿革 |
| 2 脉诊仪的研究现况 |
| 3 台湾脉诊研究现况 |
| 4 脉诊仪研究的主要问题 |
| 5 突破诊脉仪困境的方法 |
| 参考文献 |
| 综述二、非杓型高血压研究现况 |
| 1 非杓型高血压的发现与现况 |
| 2 非杓型高血压与动脉硬化 |
| 3 非杓型高血压与中医研究 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 综述三、ApoE基因多态性研究现况 |
| 1. ApoE基因多态性的研究现况与热点 |
| 2. ApoE基因多态性与高血压的关系 |
| 3. ApoE基因多态性与中医理论 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 文献研究 |
| 1 寸口脉诊（独取寸口）的内涵 |
| 1.1 现存的《难经》寸口脉诊法(独取寸口) |
| 1.2 “独取寸口”中“独”的意义 |
| 1.3 “独取寸口”的文化内涵 |
| 1.4 小结 |
| 2 “独取寸口”传承源流 |
| 2.1 东汉—《黄帝内经》与“独取寸口” |
| 2.2 东汉末年—《伤寒杂病论》与“独取寸口” |
| 2.3 魏晋时代—《脉经》与“独取寸口” |
| 2.4 唐代—百家争鸣 |
| 2.5 宋代—独取寸口的关键转折 |
| 2.6 金元四大家与独取寸口 |
| 2.7 明清诸家与独取寸口 |
| 3 其他的脉诊流派 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 临床研究 |
| 临床研究一 非杓型高血压血压下降率与脉象的相关性研宄 |
| 1 研究对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 排除标准 |
| 1.4 材料与方法 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般情况 |
| 2.2 脉象与夜间血压下降率关系 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 临床研究二、非杓型高血压患者踝臂指数与脉象的相关性 |
| 1 研究对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 排除标准 |
| 1.4 资料与方法 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般情况 |
| 2.2 踝臂指数与脉象的相关性 |
| 3. 讨论 |
| 参考文献 |
| 临床研究三、非杓型高血压患者ApoE基因多态性与脉象的相关性 |
| 1. 研究对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 排除标准 |
| 1.4 材料与方法 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般情况 |
| 2.2 ApoE基因多态性与脉象分布情况 |
| 2.3 脉象与ApoE分布关系 |
| 3. 讨论 |
| 参考文献 |
| 总结 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附件 |
（10）烟酸对载脂蛋白M和载脂蛋白E表达的影响及机制探讨（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 材料和方法 |
| 一、主要实验仪器 |
| 二.主要实验试剂 |
| 三.主要实验方法 |
| 结果 |
| 1.实时荧光定量RT-PCR检测烟酸作用后HepG2细胞apoM和apoE mRNA的表达 |
| 2.10mmol/L烟酸刺激HepG2不同时间对apoM和apoE mRNA表达的影响 |
| 3.烟酸和/或LY对HepG2细胞apoM和apoE mRNA的影响 |
| 4.烟酸和/或LY对HepG2细胞apoM蛋白水平的影响 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述一 |
| 参考文献 |
| 综述二 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 攻读学位期间本人公开发表的论文 |
| 本研究所获的基金资助 |
| 致谢 |
四、载脂蛋白E与视网膜疾病关系的研究（论文参考文献）
- [1]非动脉炎性前部缺血性视神经病变的光学相干断层扫描血管成像特征分析[J]. 武炳慧,索琰,乔杨,李婵,宋金鑫,陆慧琴. 中国医师杂志, 2021(05)
- [2]补阳还五汤对大鼠视网膜蓝光损伤保护作用的研究[D]. 陈瑶. 辽宁中医药大学, 2021(02)
- [3]华法林对ApoE基因敲除动脉粥样硬化小鼠血管及视网膜的影响研究[D]. 徐梓铭. 安徽医科大学, 2021(01)
- [4]高脂血症对小鼠睑板腺和角膜内皮的影响及其作用机制的研究[D]. 卜敬华. 厦门大学, 2019(08)
- [5]载脂蛋白E的合成、结构及功能[J]. 张蕊,赵福梅,丛洪良. 吉林医学, 2019(06)
- [6]载脂蛋白E对星形胶质细胞NF-κB信号通路及MMP-9作用机制研究[D]. 黄帆. 广西医科大学, 2019(08)
- [7]中国天津地区汉族人群载脂蛋白E启动子基因多态性与冠心病的关系探讨[D]. 张蕊. 天津医科大学, 2019(02)
- [8]LIPC基因单核苷酸多态性与新生血管型老年黄斑变性关联性研究[D]. 廖玲. 成都中医药大学, 2019(04)
- [9]非杓型高血压病脉象特点与踝臂指数、ApoE基因多态性的相关性[D]. 张力仁. 中国中医科学院, 2017(01)
- [10]烟酸对载脂蛋白M和载脂蛋白E表达的影响及机制探讨[D]. 张俊. 苏州大学, 2017(05)