一、种鸡蛋在孵化过程中引起胚胎死亡原因的调查（论文文献综述）
李健,蒋小龙,于帅,苏泽躬,鲁俊鹏[1]（2020）在《鸽子种蛋孵化过程胚胎生长发育特点及失重率变化规律》文中指出为了研究种鸽蛋人工孵化过程胚胎生长发育的特点和失重率的变化规律,试验选择了500枚温氏王鸽种蛋进行人工孵化,每日测量胚胎重量、胚胎长度和气室直径,计算失重率。结果表明:15胚龄转盘时失重率为12.7%。气室直径变化呈现三个阶段,即1～6天为快速上升期,7～11天为平台期,12～13天为二次快速上升期。胚胎重量生长呈现三个阶段,即8胚龄之前胚胎重量增加缓慢,8～14胚龄胚胎重量增长迅速,14胚龄之后胚胎快速生长,经过1 d时间,体重几乎再次翻倍,基本达到出壳体重水平。胚胎长度生长呈现三个阶段,即第1个生长阶段为8胚龄之前,该阶段胚胎持续匀速生长;第2阶段为9～11胚龄,该阶段胚胎长度生长几乎停滞;第3阶段为11胚龄之后,胚胎持续快速生长至70 mm。说明在孵化过程中种鸽蛋的失重率呈现线性变化规律。
白士斌[2]（2020）在《水禽胚胎发育分期体系的建立及其与鸡胚胎发育的比较研究》文中研究表明胚胎发育的研究一直被广泛关注,发育生物学已将常见禽类作为研究形态发生的模式生物,其中鸡胚被大多数实验室所使用。Hamburger和Hamilton在近70年前定义了鸡胚胎发育的分期,以方便禽类胚胎相关研究。目前该分期是仍是研究鸟类胚胎的实验室的主要依据。然而以鸭、鹅为代表的水禽无论是形态特征、器官发育状态还是抗病能力都与以鸡为代表的陆地禽类有很大不同。随着对水禽研究的深入,鸡的胚胎发育已经不能够代表水禽的发育。因此,建立水禽胚胎发育分期体系是必要的。本试验对金定鸭、豁眼鹅及三黄鸡的种蛋进行孵化,描述鸭、鹅胚胎发育的形态特征并与鸡进行比较,从而对从事禽类的生产及科研工作者提供研究依据。由于禽类早期胚胎过小,不易采集,所以对胚胎的收集和处理分为两种方法,早期胚胎采用中性红活性染料对胚胎进行染色,在蛋壳内使用显微镜进行观察和拍照;后期胚胎体积增大,采用解剖后Bouins溶液固定脱色后使用显微镜进行观察和拍照。本研究旨在:（1）建立鸭（Anas platyrhynchos）和鹅（Anas platyrhynchos）完整胚胎发育时间表及分期体系;（2）与Hamburger和Hamilton（HH）建立的鸡（Gallus gallus）的胚胎发育进行比较。试验结果表明:（1）以鸡的胚胎分期体系为参考,分别建立了鸭、鹅的完整胚胎分期体系;（2）鸭、鹅和鸡的胚胎发育时间及特征的比较发现,在胚胎早期三个物种的胚胎发育是相似的,在胚胎后期它们的喙和四肢等发育特征存在差异。在喙部突出可见的第28期之后,鸭和鹅的喙比鸡的喙发育的更宽更大;在四肢的分化过程中,鸭、鹅和鸡胚胎的第一趾间膜逐渐退却凋亡,鸡胚的第二和第三趾间膜也在持续退却凋亡,而鸭和鹅的第二和第三趾间膜均未凋亡、持续发育。本试验的研究结果首次建立了水禽完整的胚胎发育分期体系,完善了家禽胚胎发育分期,帮助兽医和科研工作者更全面深入的了解水禽胚胎发育各个阶段正常的形态特征、器官发育状态,为水禽胚胎病的诊断和防治、胚胎免疫和注射技术发展、生产养殖和科研工作提供胚胎发育基础数据支持。
秦晓莲[3]（2020）在《病毒直接注射法制备转基因鸡的研究与优化》文中进行了进一步梳理转基因动物自出现便引起了科学界的广泛关注,随着科学,医药的发展,转基因动物生物反应器如牛乳腺生物反应器得到了进一步的研究。鸡因其独特的生殖、鸡蛋内环境的稳定使得转基因鸡输卵管生物反应器成了药物蛋白生产理想的生物反应器。为了探究转基因鸡制备的方法,本研究进行了系统的研究。慢病毒载体显微注射法是制备转基因鸡的主要方法,为了探究影响显微注射转基因鸡孵化的因素,探究不同的开口位置对孵化率的影响,采取了钝端开口、赤道面开口的方式。结果显示:对照组孵化率90.00%;钝端开口组孵化率53.33%,赤道面组孵化率80.00%。可以看出,赤道面组孵化率明显高于钝端开口组。为了探究注射方式对鸡胚存活率、种蛋孵化率的影响,本实验进行了胚下腔、血管注射对比试验。结果如下:对照组孵化率93.33%;胚下腔注射组孵化率33.33%,血管注射组孵化率53.33%。可以看出,血管注射组孵化率明显高于胚下腔组。本研究设计了慢病毒载体,通过显微注射制备转基因鸡。采血后,通过Elisa鉴定,共有10只阳性鸡,但目的蛋白含量最高不超过100ng/m L。为了使鸡生产更多的目的蛋白且能够通过病毒载体法实现精准基因编辑鸡,本试验用腺病毒作为CRISPR/Cas9递送系统对鸡胚输卵管细胞、鸡胚成纤维细胞进行了敲入检测试验,尝试了将重组腺病毒直接注射到鸡胚中产生靶基因敲除鸡的方法,建立鸡CRISPR/Cas9重组腺病毒系统。通过提取转染了腺病毒CRISPR/Cas9的细胞基因组进行PCR扩增后,进行酶切,结果显示腺病毒递送CRISPR/Cas9在CEF中的靶向效率是40.7%。设计了三个供体腺病毒（HDR,HMEJ和MMEJ）,与CRISPR/Cas9-tale腺病毒共感染CEF,测定CEF中的敲入效率。通过实验发现HMEJ的敲入效率最高。为了探究将供体递送到插入部位的方法,以进一步提高KI效率,构建了Cas9和转录激活器样效应器（TALE）的融合蛋白,并通过PCR从具有TALE靶向序列的HMEJ供体中扩增出三种不同的-HMEJ供体即5’-Bait-HMEJ,Inside-BaitHMEJ,5’-Bait-HMEJ。通过单细胞PCR,发现Inside-Bait-HMEJ在鸡胚成纤维细胞中敲入效率最高。探究了Cas-TALE+HMEJ,Cas-TALE+Inside-Bait-HMEJ腺病毒在输卵管细胞的敲入效率,进行Western blot检测。实验表明:CasTALE+HMEJ,Cas-TALE+Inside-Bait-HMEJ都可以敲入输卵管细胞,使其产生目的蛋白,Elisa实验表明Cas-TALE+Inside-Bait-HMEJ的敲入效率更高。本试验通过慢病毒载体赤道面显微注射血管成功制备了转基因鸡,验证了腺病毒作为CRISPR/Cas9递送系统可以对鸡胚成纤维细胞、鸡输卵管细胞敲入,为以后转基因鸡的生产提供了参考。
刘洁玉[4]（2019）在《冀南地区鸡胚蛋有害菌的检测》文中指出鸡胚蛋制品是人们喜食的传统营养食品,但在鸡胚孵化过程中,由于多种病原菌污染,给鸡胚蛋及其制品安全带来隐患。因此,了解鸡胚蛋中病原菌的污染情况,建立快速检测食源性病原菌的方法,对提高鸡胚的健康存活率及孵化场的经济效益,保障鸡胚蛋制品安全与公共卫生具有重要意义。1、为探究鸡胚蛋污染病原菌情况,采集91枚病死鸡胚蛋,解剖胚体,从肝脏分离细菌、培养,观察菌落菌体形态,提取分离株DNA,经16S rDNA基因序列扩增和测序,在GenBank核酸数据库中,与相近序列进行BLAST比对,对分离株进行鉴定。结果发现,鸡胚蛋外观有裂痕或粪便污染物等,解剖发现皮下有胶冻状物、肝脏呈土黄色、卵黄吸收不良。从鸡胚蛋内共分离鉴定出86株细菌,污染率为59.3%（54/91）,混合污染率为42.6%（23/54）。鉴定出11种细菌,其中大肠杆菌占比为37.2%（32/86）、粪肠球菌为26.7%（23/86）、志贺氏菌为9.3%（8/86）、阴沟肠杆菌为5.8%（5/86）、博得特氏菌为4.7%（4/86）、沙门氏菌为4.7%（4/86）、金黄色葡萄球菌为3.5%（3/86）、鲍氏不动杆菌为3.5%（3/86）、Pseudomonas psychrotolerans为2.3%（2/86）、Massilia alkalitolerans为1.2%（1/86）和铜绿假单胞菌为1.2%（1/86）。这些表明病死鸡胚的污染较高,涉及多种病原菌,其中以大肠杆菌和粪肠球菌为主,这为鸡胚蛋制品的安全生产与监测提供依据。2、为建立一种快速检测鸡胚蛋中大肠杆菌的方法,根据大肠杆菌fimC基因设计一对特异性引物,建立了荧光定量PCR方法。经鸡胚蛋样品试验,与沙门氏菌、志贺氏菌、奇异变形杆菌、绿脓杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、金黄色葡萄球菌等病原菌之间无交叉反应,特异性强;对大肠杆菌的最低检测限为101CFU/mL,比普通PCR方法敏感约100倍,灵敏性好;重复性试验变异系数小于2%,说明重复性好,该方法稳定,可用于鸡胚蛋制品中大肠杆菌的检测。3、为建立一种快速检测鸡胚蛋中粪肠球菌的方法,根据粪肠球菌sodA基因设计一对特异性引物,建立了荧光定量PCR方法。经鸡胚蛋样品试验,与屎肠球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、奇异变形杆菌、绿脓杆菌等病原菌之间无交叉反应,特异性强;对粪肠球菌的最低检测限为101CFU/mL,比普通PCR方法敏感约100倍,灵敏性好;重复性试验变异系数小于2%,说明重复性好,该方法稳定,可用于鸡胚蛋制品中粪肠球菌的检测。4、针对鸡胚蛋主要污染大肠杆菌和粪肠球菌,建立了大肠杆菌和粪肠球菌双重荧光定量PCR方法。结果显示,经鸡胚蛋样品试验,大肠杆菌产物的Tm值为85.6℃86℃,粪肠球菌产物的Tm值为83.9℃84℃,且与其他菌无交叉反应;大肠杆菌和粪肠球菌重复性试验中变异系数较小,重复性好;对大肠杆菌和粪肠球菌的检测限均为101 CFU/mL。说明该双重荧光定量PCR方法敏感、特异、稳定、可靠,一次反应同时检测大肠杆菌和粪肠球菌,可用于鸡胚蛋制品的检测。
刘亚平[5]（2019）在《藏鸡种蛋氧化应激响应蛋白质的筛选及其PIT54对血管生成机制的研究》文中研究说明近些年来,大量研究探究了鸡蛋不同部位的蛋白质组及其生物活性。但是,不同生长环境对于鸡蛋蛋白质组及生物活性的影响尚不清楚。为挖掘藏鸡蛋特有的功能蛋白质,本研究以两种海拔鸡种蛋为研究对象,分别选取青藏高原的土着品种藏鸡种蛋和在世界范围内广泛饲养的人工选育品种白来航鸡种蛋,对蛋清和蛋黄蛋白质组及其生物功能进行了详细的分析,进而通过构建人工注释的鸡蛋蛋清和蛋黄蛋白质数据集,筛选出抗氧化相关候选蛋白质PIT54,并围绕着两种海拔高度鸡种蛋PIT54的DNA序列的单核苷酸多态性位点、蛋白质提取优化、质谱分析、抗氧化活性和对血管生成的影响及其机制初步探究等方面开展了一系列研究工作。主要研究结果如下:（1）利用非标记蛋白质组学对藏鸡种蛋清蛋白质（TEW）和白来航种蛋蛋清蛋白质（CEW）进行了比较研究,以鉴定差异蛋清蛋白质及其生物活性。一共鉴定出176种蛋白质。其中,14种表达量差异显着（倍数>1.5且P<0.05）的蛋白质,主要参与了脂质转运、免疫防御、生长发育和抗氧化过程;通过体外实验和Caco-2细胞的抗氧化实验证实了CEW和TEW之间抗氧化应激活性的差异;前列腺素-H2D-异构酶前体和谷胱甘肽过氧化物酶被认为是与差异抗氧化活性相关的候选蛋白质。（2）通过非标记定量技术比较了藏鸡种蛋蛋黄蛋白质（TEY）和白来航鸡种蛋蛋黄蛋白质（CEY）的蛋白质表达图谱,一共鉴定出135种蛋白质,其中19种蛋白质的表达量在两组样本间存在显着差异（倍数>1.5且P<0.05）;差异表达的蛋白质主要与氧化应激、免疫、能量代谢以及组织发育等过程相关;为了进一步验证抗氧化能力的差异,通过体外实验和对H2O2诱导氧化应激的Caco-2细胞的保护作用实验比较了CEY和TEY的抗氧化应激活性差异。TEY和CEY均具有抗氧化活性,但前者表现出的抗氧化应激能力更强（P<0.05）,该结果可能与TEY中的抗氧化活性相关蛋白（谷胱甘肽过氧化物酶3和PIT54）的表达量差异有关。（3）由于蛋白质表达的动态性,本研究中鉴定的蛋白质种类与文献报道种类有所差异。为更加广泛地筛选抗氧化蛋白质进行后续实验,通过构建人工注释的鸡蛋蛋清和蛋黄蛋白质的非冗余数据集,筛选出了鸡蛋中抗氧化蛋白质合集,以具有抗氧化应激作用和研究较少为基本原则,初步选择了PIT54作为候选的抗氧化活性相关蛋白。PIT54还具有促进血管生成以及免疫调节等生物活性。进一步通过生物信息学对PIT54的结构和功能进行分析发现,分子中含有4个重复的SRCR结构域和6个保守的半胱氨酸残基,具有清道夫受体活性,定位于细胞膜,主要与脂质运输、细胞激活以及含氧化合物响应过程相关,说明其的确与低氧氧化应激过程相关。（4）根据PIT54可以与血红蛋白结合的特性,将鸡血红蛋白通过CNBr偶联到活化的Sepharose 4B上,制备吸附血红蛋白的亲和柱,用来纯化PIT54。研究了不同缓冲液体系（Tris-HCl,p H 8.1和硼酸盐缓冲液,p H 8.1）对于PIT54分离的影响,建立了从蛋黄中分离纯化PIT54的方法,蛋黄经正己烷脱油后获得粗蛋白,依次经过DEAE阴离子交换层析和吸附血红蛋白的亲和层析柱亲和层析两步分离法,便可以快速高效地获得PIT54蛋白质,并保持了蛋白质活性,该方法操作简单。相比于C-PIT54,T-PIT54具有更强的与Hb结合的能力（P<0.05）和抑制LDL脂质氧化反应的能力（P<0.05）。质谱分析发现PIT54分子中一共检测到3个N-糖基化位点（85N、157N和485N）。其中,157N仅在C-PIT54中检测到,另外两个位于SRCR结构域的糖酸化位点在T-PIT54分子中的糖基化程度显着高于C-PIT54（P<0.05）。C-PIT54和T-PIT54分子中都只检测到了一个磷酸化位点411Ser,位于SRCR结构域N端,T-PIT54的磷酸化程度显着低于C-PIT54（P<0.05）。（5）为了研究两种海拔高度鸡种蛋来源的PIT54对常氧和低氧孵化的鸡胚血管生成的影响,需要模拟高原低氧环境。首先,本研究在原有孵化箱的基础上,通过外加氮气模拟低氧环境;利用单片机优化了氧气、二氧化碳、温度、湿度及其翻蛋控制系统,同时完善了孵化箱的密闭性;实现了准确、稳定的模拟不同含氧量下的鸡胚孵化过程。该设备操作简单,成本低,实用性强。利用该孵化箱模拟低氧环境进行后续实验。之后,以不同孵化时期的常氧和低氧孵化的白来航鸡胚尿囊绒毛膜（CAM）为研究对象,以血管覆盖度和血管直径的分布情况为指标,筛选出D4、D8和D12为给药的时间点;然后,比较分析了T-PIT54和C-PIT54处理对低氧和常氧环境下的藏鸡和白来航鸡胚CAM血管发育情况的影响。最终发现了PIT54可以作为促血管生成因子,具有促进血管生成的作用,T-PIT54具有更强的促进血管生成的能力（P<0.05）,且作用范围广泛;C-PIT54对血管生成的促进作用具有种间差异性;T-PIT54和C-PIT54对于第8天的鸡胚的影响最大。因此,选择了两种给药处理的NC8、HC8和HT8组进行后续机制探究;（6）筛选出特异性肽段CTVNKNLEETETS制备PIT54抗体,经检验抗体效果良好。利用该抗体通过WB和免疫组织化学分析PIT54在鸡胚组织中的特异性表达,结果发现PIT54蛋白质在鸡胚的血液和肺泡中大量表达,在心脏、脑和血管中少量表达,在系带和肝脏中未检测到PIT54的特异性表达。通过免疫分子印迹分别考察了T-PIT54和C-PIT54处理后,CAM中的VEGFR2上下游相关蛋白的表达水平及磷酸化情况。发现低氧环境中,C-PIT54和T-PIT54可以通过显着增加上游的HIF-1α的表达量,刺激血管新生;增强VEGFR2/Src信号分子机制提高内皮细胞的通透性,有助于出芽和迁移;通过影响PI3K/Akt信号分子机制和提升ERK的磷酸化程度促进细胞增殖;增加p38单个蛋白质的磷酸化水平抑制细胞凋亡。这些都证明了C-PIT54和T-PIT54可以促进血管生成,提高低氧环境的适应性。但是,这两种外源添加的PIT54对低氧孵化鸡胚血管生成的促进作用具有种间差异性。两者在常氧白来航鸡胚中表现出与低氧环境相反的作用,可以避免血管内皮细胞的过度增殖。（7）通过对藏鸡源和白来航鸡源的PIT54 protein基因的DNA序列进行扩增测序发现,PIT54 protein基因全长5186 bp,包括8个外显子和7个内含子。同源比对结果显示,测序获得的T-PIT54与C-PIT54的内含子序列差异较大,但是,CDS序列保守性较高（99%identify）,表明了藏鸡源和白来航鸡源的PIT54 protein具有遗传稳定性。与C-PIT54相比,T-PIT54的DNA序列中存在着5个突变和5个插入片段;根据预测获得T-PIT54与C-PIT54蛋白质的氨基酸序列,生物信息学分析发现,T-PIT54的α-螺旋,结构更加紧密。两种蛋白质分子中都存在12个结合位点,但是部分位点具有种间特异性。这些序列与结构的差异可能是造成T-PIT54与C-PIT54抗氧化活性和促进血管生成活性差异的主要原因。
李珊珊[6]（2019）在《鸡鸭胚胎发育的形态学比较及ALX1基因在鸡鸭喙部的时空表达》文中指出鸡胚是研究禽类的模式生物,但由于禽类种类繁多,孵化期具有多样性,且水禽与陆禽具有较大差异,所以以鸡的胚胎发育作为研究禽类的模型就会存在局限性。本试验对金定鸭的种蛋进行孵化,建立鸭的胚胎发育体系从而去解决这一问题。同时本试验也对三黄鸡种蛋进行了孵化,从而进行了鸡和鸭的胚胎发育对比。这样无论是对于研究陆禽或是研究水禽的学者都能提供便利。并且,胚胎发育在禽类喙部、四肢、羽毛及转基因禽类的研究中也发挥着重要作用。与此同时,由于现代集约化养禽业的发展,禽类胚胎病造成了养禽业的经济损失以及影响了养禽业的发展,本研究也将会对研究禽类胚胎病的学者提供帮助。在鸟类的进化过程中,由于鸟类对各种生态环境的适应,鸟喙也产生了多样性。通过对文献的查阅,发现ALX1基因影响了人类额鼻部的发育,斑马鱼的面部发育和达尔文雀的喙的形状,我们想了解ALX1基因是否影响了鸡和鸭的喙部发育,则本试验通过原位杂交的试验方法,对ALX1基因在鸡鸭喙部的表达进行了验证。本研究旨在:（1）建立鸭（Anas platyrhynchos）的完整形态发育分期;（2）与Hamburger and Hamilton（HH）对鸡（Gallus gallus）的胚胎分期系统进行比较;（3）基于ALX1基因在鸡鸭喙部发育的各个的时期表达情况,研究ALX1基因是否影响了鸡和鸭喙部发育。研究结果表明:（1）这是第一次对鸭进行完整的胚胎发育分期。建立鸭的完整的胚胎分期体系为水禽发育研究提供了新的模型;（2）鸡与鸭形态发育在早期阶段是相似。它们的形态差异主要发生在胚胎发育的第27时期之后,鸭喙的形状比鸡的更宽更长,而且发现鸡后肢的第二和第三趾间膜在第31时期开始退化,并最终在第35时期消失,然而,鸭子的第二第三趾间膜仍存在;（3）根据ALX1基因的表达情况,推测ALX1基因对鸟类喙部的形态发育起重要作用,有待于进行进一步的功能试验验证。本试验的结果不仅会水禽、转基因禽类、胚胎病的研究提供理论依据,还为喙、四肢、羽毛等性状的研究提供理论支持。
钟镇涛[7]（2018）在《LED绿光调控种蛋孵化胚胎代谢和出雏特性的机理研究》文中认为中国是禽肉和禽蛋的生产大国,禽蛋孵化是家禽生产过程中的重要环节。目前禽类种蛋采用完全黑暗的方式进行孵化,而绿光已被证明可影响禽蛋胚胎的生长发育和出雏过程。由于缺乏应用基础研究,导致光照孵化无法有效应用于家禽生产。本研究首先探索LED绿光与种蛋孵化胚胎发育和代谢的剂量-效应关系,接着基于优选绿光剂量考察种蛋胚胎在绿光孵化期间的蛋壳特性变化和出雏阶段的营养物质变化,从出雏供能和蛋壳特征的角度探讨绿光促进胚胎出雏、减少胚胎死亡的生理学机制,为光照孵化的产业化提供应用理论指导,同时探索优化种蛋孵化出雏窗口的方法,在不影响雏鸡质量的前提下进一步提高孵化生产效率。本研究的主要内容和研究结论如下:（1）LED绿光剂量对种蛋孵化胚胎发育及代谢的影响以900枚岭南黄肉鸡种蛋为研究对象,考察不同照度的LED绿光（30-801ux和120-2001ux）对孵化期间胚胎发育及呼吸速率的影响,从中优选出研究光照孵化下胚胎发育和代谢的最佳光照度模型（120-2001ux）;在该模型基础上调控光照时长（OL:24D、6L:18D、12L:12D、18L:6D）以提供不同光照剂量的绿光进行调控,从胚胎生长、器官发育、营养转化和呼吸速率角度考察LED绿光光照时长对800枚种蛋的胚胎发育和代谢的影响。结果表明,绿光显着提高了出雏时的雏鸡体重（P<0.05）,促进了卵黄的吸收（P<0.05）,且绿光剂量与体重和卵黄吸收率呈线性正相关关系（R2=0.9953,P<0.01;R2=0.9968,P<0.01）;绿光显着促进卵黄内脂肪的吸收（P<0.01）,并促进总肝糖原的积累（P<0.01）,且绿光剂量与卵内营养物质的吸收转化程度呈正相关关系（R2=0.9726,P<0.05;R2=0.7842,P>0.05）;绿光显着提高胚胎的呼吸速率（P<0.05）,撤去光照后促进效果仍然显着,且光照剂量与呼吸速率线性正相关。因此,LED绿光与种蛋胚胎发育和呼吸代谢存在剂量-效应关系。（2）LED绿光对种蛋孵化期间蛋壳特性的影响针对孵化期间蛋壳颜色变化的现象,以400枚岭南黄肉种鸡种蛋为研究对象,根据不同的种蛋颜色进行分组,系统考察种蛋在LED绿光孵化过程中蛋壳色度、色素、元素和表观结构的变化。结果表明,种蛋孵化期间LED绿光可使蛋壳色度产生显着变化,主要表现在a*值的显着升高（P<0.0001）;孵化期间蛋壳色素含量逐渐降低,LED绿光作用下胆绿素含量显着高于黑暗条件孵化（19.2%,P<0.01）;蛋壳中主要元素的含量在孵化期间显着改变,其中磷含量逐渐升高（P<0.001）,钾和钠含量显着降低（P<0.001）,LED绿光相比黑暗促进钙含量的下降（1%）;孵化前后蛋壳孔隙面积和形态出现显着变化,且LED绿光提高了蛋壳孔隙的变化程度。以上结果表明的蛋壳特性变化规律可为光照孵化提供应用理论指导。（3）LED绿光对种蛋孵化出雏供能组织与物质的影响跟踪900枚岭南黄肉鸡种蛋在LED绿光孵化下胚胎出雏进程的各关键时间节点,考察胚胎卵黄与肝脏组织和营养成分的变化,比较出雏前后胚胎肝脏miRNA的表达差异。研究发现,绿光显着促进了卵黄囊的吸收（P<0.05）和卵黄脂肪的利用（P<0.05）,出雏过程中肝糖原储量显着高于黑暗孵化（P<0.05）;胚胎肝脏miRNA表达情况说明绿光显着增强了肝细胞的增殖能力（P<0.05）,同时促进了胚胎期肝脏的脂肪代谢（P<0.05）。基于此,推测LED绿光在种蛋孵化期间促进了胚胎供能组织的发育和供能物质的储备,从而加快了孵化出雏进程。（4）种蛋孵化出雏过程死亡机制及LED绿光对出雏的促进作用针对30枚发育正常而未出雏的死亡胚胎,考察其蛋壳断面和外表面的结构特点,并结合出雏供能相关的营养组织和物质,与存活以及出雏胚胎进行比较。研究发现,死亡胚胎卵黄和肝重高于存活胚胎（P<0.05）,而卵黄脂肪的吸收和肝糖原的储存水平均低于存活胚胎（P<0.05）;死亡胚胎的蛋壳厚度显着大于出雏胚胎的蛋壳（P<0.05）,而孔隙面积由于表面胶质的覆盖而极小（P<0.05）。因此推测LED绿光刺激胚胎营养代谢增强而维持了胚胎期维持能量的动态平衡,同时蛋壳厚度的减小降低了胚胎破壳难度,提高了胚胎出雏成功率。（5）混合不同孵化轨迹的种蛋对胚胎发育、出雏特性和雏鸡质量的影响以优化出维窗口为目标,通过控制入孵时间获得不同孵化轨迹的种蛋,采用混合不同孵化轨迹的种蛋的方式并对比混合双方种蛋的胚胎发育、出雏特征和雏鸡质量。结果显示混合不同孵化轨迹的种蛋使出雏过程延迟6小时,但是出雏窗口由30小时缩短为21小时,同时出雏高峰期持续时间由6.5小时缩短为5.4小时;种蛋混合的方式没有影响胚胎的正常生长和卵黄吸收程度,也没有改变内脏器官包括心、肝、胃的发育程度;育雏阶段的体重和跖骨长度显示,雏鸡的生长和骨骼发育状况没有受到种蛋混合的影响。整体比较发现,混合不同孵化轨迹的种蛋的方式在不影响胚胎发育和雏鸡质量的前提下,通过延迟出雏初始时间缩短了出雏窗口。
李龙[8]（2017）在《肉种鸡正常受精率条件下种蛋孵化率低的原因分析及可行性解决方案》文中进行了进一步梳理肉种鸡种蛋孵化生产过程中普遍存在着正常受精率条件下,但是孵化率低的现象。本文从管理、营养、遗传和免疫四个方面总结了正常受精率条件下种蛋孵化率低的原因,并提出正常受精率条件下种蛋孵化率低的问题排查路径与解决方案。为在正常受精率情况下,稳定并提高肉种鸡孵化率和科学查找孵化率低的原因提供思路和可操作的相应措施。
黄晓东,马铭龙,巨向红,吴炳雄,贾汝敏[9]（2016）在《提高反季节狮头鹅种蛋孵化率的研究（Ⅰ）——胚蛋发育基础参数测定与分析》文中研究表明[目的]研究狮头鹅种蛋孵化期间失水率、蛋温变化等基础数据及其对孵化率的影响。[方法]对孵化期的狮头鹅种蛋进行称重,并测定孵化期内蛋内温度和蛋壳温度的变化,分析气孔数对孵化效果的影响。[结果]失水率不仅影响孵化率,而且影响雏鹅质量,孵化第6、15、24和28天种蛋最佳失水率分别为3.28%、4.75%、9.48%和14.22%。随着胚龄的增加,蛋壳表面温度相对稳定（37.32℃→37.17℃→37.37℃→36.83℃）,而壳内胚胎温度上升较快（37.75℃→39.22℃→39.82℃→40.62℃）。蛋壳气孔数量显着影响胚胎发育。蛋形指数影响孵化率,但不影响受精率。[结论]降低湿度、严格选蛋、孵化中后期加强凉蛋是提高鹅蛋孵化率的重要措施。
管保章[10]（2015）在《胚胎时期肾脏对骨骼系统发育的相关性研究》文中研究指明目的:利用顺铂经肾脏排泄的特性,建立鸡胚胎肾脏损伤模型,将胚胎时期肾脏的发育与骨骼系统发育之间联系起来进行分析,以鸡胚为实验模型初步阐述胚胎时期肾脏与骨骼系统发育之间的关系。方法:将新鲜种鸡蛋48只,使用恒温培养箱孵化4d,在蛋壳上开窗,并随机分为4组进行空白对照和顺铂暴露:25μg/egg、50μlg/egg、100μg/egg组;继续孵化至12d时取胚胎进行评价;鸡胚发育到4.5d,分离胚胎肢芽组织,进行体外胚胎骨细胞培养;H.E及阿利新蓝-茜素红双染进行形态学观察;测定钙含量、25（OH）D及组织切片的碱性磷酸酶（ALP）和抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）表达水平。结果:PBS和顺铂暴露随暴露剂量的增加,肾的发育在顺铂暴露组与PBS组之间存在显着性的差异,且呈现出剂量相关性（P<0.01）;Col 2al、ALP、Runx2、SOX9、MMP13、GADPH的RT-PCR结果显示,骨发生相关基因的表达降低（P<0.05）;25（OH）D及组织切片的ALP和TRAP随着顺铂暴露剂量的增加呈现相应的降低（P<0.05）。结论:1)利用顺铂建立鸡胚胎肾损伤模型是可行的,肾损伤程度与剂量呈正相关关系;2)顺铂对鸡胚胎时期的骨骼发育没有直接影响;3)证实胚胎时期肾脏损伤影响骨骼发育,主要影响到成骨细胞和破骨细胞的功能;4)为部分先天性骨发育不良的发生提供一定的理论支持。
二、种鸡蛋在孵化过程中引起胚胎死亡原因的调查（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、种鸡蛋在孵化过程中引起胚胎死亡原因的调查（论文提纲范文）
（1）鸽子种蛋孵化过程胚胎生长发育特点及失重率变化规律（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 种蛋 |
| 1.2 孵化管理 |
| 1.3 指标的测定 |
| 1.4 数据的统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 孵化过程失重率及气室直径变化规律 |
| 2.2 胚胎发育规律 |
| 3 讨论 |
| 3.1 孵化过程失重率与气室变化 |
| 3.2 胚胎发育规律 |
| 4 结论 |
（2）水禽胚胎发育分期体系的建立及其与鸡胚胎发育的比较研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 1.1 禽类胚胎发育的研究进展 |
| 1.2 禽胚胎发育应用于胚胎注射技术的研究进展 |
| 1.3 禽类胚胎发育应用于胚胎病研究的研究进展 |
| 1.3.1 禽类胚胎病的类型 |
| 1.3.2 禽类胚胎病的起因 |
| 1.3.3 禽类胚胎病的预防和治疗 |
| 1.4 禽类胚胎发育在其他方面的研究进展 |
| 1.5 本研究的目的与意义 |
| 第二章 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要试剂及配制 |
| 2.1.4 主要仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 种蛋的挑选,运输,消毒及贮存 |
| 2.2.2 种蛋的孵化及照检 |
| 2.2.3 胚胎的收集,固定及图像的采集 |
| 2.2.4 图像的后期处理 |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 第 1 期至第 27 期鸭、鹅、鸡的胚胎发育 |
| 3.2 第 28 期至第 46 期鸭,鹅,鸡的胚胎发育及形态学比较 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 影响禽类胚胎发育的因素 |
| 4.1.1 种蛋的贮存条件和贮存时间对禽类胚胎发育的影响 |
| 4.1.2 孵化温度对禽类胚胎发育的影响 |
| 4.1.3 孵化湿度对禽类胚胎发育的影响 |
| 4.1.4 其他因素对禽类胚胎发育 |
| 4.2 鸭、鹅和鸡胚胎发育特征的相似性与差异 |
| 4.2.1 鸭、鹅和鸡早期胚胎发育的相似性 |
| 4.2.2 鸭、鹅和鸡胚胎发育的差异 |
| 第五章 结论 |
| 5.1 鸭,鹅,鸡胚胎发育体系的建立 |
| 5.2 鸭,鹅,鸡胚胎发育的差异 |
| 第六章 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 |
（3）病毒直接注射法制备转基因鸡的研究与优化（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 动物转基因研究综述 |
| 1.2 转基因动物技术 |
| 1.3 转基因鸡研究进展 |
| 1.4 动物生物反应器 |
| 1.5 转基因鸡生物反应器研究进展 |
| 1.6 转基因鸡生物反应器的优势与应用价值 |
| 1.7 慢病毒研究简介 |
| 1.8 腺病毒 |
| 1.9 基因编辑简介 |
| 1.10 传统的基因编辑手段 |
| 1.10.1 锌指核酸酶(ZFN) |
| 1.10.2 转录激活物样效应核酸酶(TALEN) |
| 1.11 CRISPR-CAS9 系统的演化 |
| 1.12 CRISPR-Cas9 最新发展 |
| 1.12.1 基因功能的筛选 |
| 1.12.2 诊断和基因治疗的细胞和动物模型的建立 |
| 1.12.3 利用融合蛋白进行转录研究 |
| 1.12.4 基因组的荧光成像 |
| 1.12.5 抗菌和抗病毒应用 |
| 1.13 CRISPR-CAS9 系统未来发展 |
| 1.14 研究目的与意义 |
| 第二章 慢病毒注射法制备转基因鸡 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 种蛋来源 |
| 2.1.2 主要实验材料与仪器 |
| 2.1.3 主要试剂配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 开口位置对孵化率的影响 |
| 2.2.2 注射方式对孵化率的影响 |
| 2.2.3 Her-2慢病毒载体注射 |
| 2.3 慢病毒载体转入检测 |
| 2.3.1 组织荧光观察 |
| 2.3.2 鸡血采集 |
| 2.3.3 血细胞基因组提取 |
| 2.3.4 凝胶电泳检测 |
| 2.3.5 PCR检测 |
| 2.3.6 血清Elisa检测 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 开口位置对孵化率的影响 |
| 2.4.2 注射方式对孵化率的影响 |
| 2.4.3 慢病毒注射制备嵌合体鸡 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 结论 |
| 第三章 用腺病毒作为CRISPR/Cas9 递送系统对鸡胚成纤维细胞与输卵管细胞敲入检测 |
| 前言 |
| 3.1 实验部分 |
| 3.1.1 种蛋来源 |
| 3.1.2 主要实验材料与仪器 |
| 3.1.3 主要试剂配制 |
| 3.2 腺病毒递送CRISPR/CAS9在CEF中的靶向效率的检测 |
| 3.2.1 原代鸡胚成纤维细胞的培养 |
| 3.2.2 细胞传代 |
| 3.2.3 细胞冻存 |
| 3.2.4 病毒转染 |
| 3.2.5 提取转染细胞基因组 |
| 3.2.6 PCR扩增 |
| 3.2.7 PCR产物回收于纯化 |
| 3.2.8 酶切 |
| 3.3 CRISPR/Cas9 腺病毒与三种供体腺病毒感染鸡胚成纤维细胞(CEF) |
| 3.3.1 病毒转染 |
| 3.3.2 单细胞PCR检测细胞KI效率 |
| 3.4 三种不同的-HMEJ供体5'-Bait-HMEJ,Inside-Bait-HMEJ,5'-Bait-HMEJ敲入效率检测 |
| 3.4.1 敲入效率检测 |
| 3.5 CRISPR/Cas9 腺病毒在输卵管细胞的敲入 |
| 3.5.1 鸡原代输卵管细胞的培养 |
| 3.5.2 病毒转染鸡原代输卵管细胞 |
| 3.5.3 Western blot检测 |
| 3.5.4 Elisa实验 |
| 3.6 实验结果 |
| 3.6.1 腺病毒递送CRISPR/CAS9在CEF中的靶向效率的检测 |
| 3.6.2 不同腺病毒供体在CEF中敲入检测 |
| 3.6.3 不同-HMEJ供体在CEF中敲入检测 |
| 3.6.4 CRISPR/Cas9 腺病毒在输卵管细胞的敲入检测 |
| 3.7 讨论 |
| 3.8 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 硕士阶段研究成果 |
（4）冀南地区鸡胚蛋有害菌的检测（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 病原菌引起的食品安全问题 |
| 1.2 鸡胚蛋在食品加工中的应用 |
| 1.3 鸡胚蛋致病菌的研究及流行情况 |
| 1.4 鸡胚蛋中常见的致病菌 |
| 1.4.1 大肠杆菌 |
| 1.4.2 粪肠球菌 |
| 1.4.3 志贺氏菌 |
| 1.4.4 沙门氏菌 |
| 1.4.5 金黄色葡萄球菌 |
| 1.5 食源性致病菌检测技术研究进展 |
| 1.5.1 传统检测方法 |
| 1.5.2 免疫学方法 |
| 1.5.3 分子生物学技术 |
| 1.5.4 生物传感器技术 |
| 1.5.5 聚合酶链式反应技术 |
| 1.6 本研究的目的及意义 |
| 第2章 鸡胚蛋污染菌的分离鉴定 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 污染样品与菌株 |
| 2.1.2 试验试剂与耗材 |
| 2.1.3 试验仪器与设备 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 培养基制备 |
| 2.2.2 细菌培养 |
| 2.2.3 细菌分离纯化 |
| 2.2.4 菌落菌体观察 |
| 2.2.5 模板DNA提取 |
| 2.2.6 分离株的PCR扩增 |
| 2.2.7 分离株序列测定分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 鸡胚蛋大体观察 |
| 2.3.2 分离株PCR扩增结果 |
| 2.3.3 分离株鉴定 |
| 2.3.4 分离株鉴定结果分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第3章 大肠杆菌荧光定量PCR检测方法的建立 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 菌株 |
| 3.1.2 试验试剂与耗材 |
| 3.1.3 试验仪器与设备 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 DNA提取 |
| 3.2.2 大肠杆菌特异性引物设计与合成 |
| 3.2.3 大肠杆菌引物特异性检测 |
| 3.2.4 定量PCR反应体系和反应程序 |
| 3.2.5 线性范围的测定和标准曲线的建立 |
| 3.2.6 定量PCR特异性检测 |
| 3.2.7 定量PCR敏感性检测 |
| 3.2.8 定量PCR重复性检测 |
| 3.2.9 鸡胚蛋样品检测 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 大肠杆菌引物特异性检测结果 |
| 3.3.2 线性范围及定量标准曲线的制作 |
| 3.3.3 定量PCR特异性检测结果 |
| 3.3.4 定量PCR敏感性检测结果 |
| 3.3.5 定量PCR重复性检测结果 |
| 3.3.6 鸡胚蛋样品检测结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第4章 粪肠球菌荧光定量PCR检测方法的建立 |
| 4.1 材料 |
| 4.1.1 菌株 |
| 4.1.2 试验试剂与耗材 |
| 4.1.3 试验仪器与设备 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 DNA提取 |
| 4.2.2 粪肠球菌特异性引物设计与合成 |
| 4.2.3 粪肠球菌引物特异性检测 |
| 4.2.4 定量PCR反应体系和反应程序 |
| 4.2.5 线性范围的测定和标准曲线的建立 |
| 4.2.6 定量PCR特异性检测 |
| 4.2.7 定量PCR敏感性检测 |
| 4.2.8 定量PCR重复性检测 |
| 4.2.9 鸡胚蛋样品检测 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 粪肠球菌引物特异性检测结果 |
| 4.3.2 线性范围及定量标准曲线的制作 |
| 4.3.3 定量PCR特异性检测结果 |
| 4.3.4 定量PCR敏感性检测结果 |
| 4.3.5 定量PCR重复性检测结果 |
| 4.3.6 鸡胚蛋样品检测结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第5章 大肠杆菌和粪肠球菌双重荧光定量PCR检测方法的建立 |
| 5.1 材料 |
| 5.1.1 菌株 |
| 5.1.2 试验试剂与耗材 |
| 5.1.3 试验仪器与设备 |
| 5.2 方法 |
| 5.2.1 DNA提取 |
| 5.2.2 双重荧光定量PCR特异性检测 |
| 5.2.3 双重荧光定量PCR敏感性检测 |
| 5.2.4 双重荧光定量PCR重复性检测 |
| 5.2.5 鸡胚蛋样品检测 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 双重荧光定量PCR特异性检测结果 |
| 5.3.2 双重荧光定量PCR敏感性检测结果 |
| 5.3.3 双重荧光定量PCR重复性检测结果 |
| 5.3.4 鸡胚蛋样品检测结果 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
| 参加科研情况 |
（5）藏鸡种蛋氧化应激响应蛋白质的筛选及其PIT54对血管生成机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 鸡蛋蛋白质的主要功能 |
| 1.1 抗氧化活性(氧化应激响应活性) |
| 1.2 抗菌活性 |
| 1.3 血管紧张素转移酶抑制活性 |
| 1.4 抗病毒活性 |
| 1.5 其他生物活性 |
| 2 蛋白质组学研究 |
| 2.1 蛋白质组学的常用技术 |
| 2.2 蛋白质组学技术的应用 |
| 2.3 鸡蛋蛋白质翻译后的研究 |
| 3 藏鸡蛋的研究进展 |
| 3.1 藏鸡蛋蛋壳的研究进展 |
| 3.2 低氧孵化对鸡胚组织器官的影响 |
| 3.3 低氧适应性相关蛋白质的研究 |
| 4 PIT54及血管生成的研究进展 |
| 4.1 PIT54的相关研究 |
| 4.2 血管生成及常用的模型 |
| 4.3 促血管生成因子对于血管生成的影响 |
| 5 本课题选题的学术思想 |
| 5.1 研究目的与意义 |
| 5.2 学术思想 |
| 5.3 主要研究内容 |
| 第二章 两种海拔高度鸡种蛋蛋清蛋白质组的比较研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 EW基本营养成分分析 |
| 2.2 蛋清蛋白质的GO分类分析 |
| 2.3 差异蛋白质的生物信息学分析 |
| 2.4 生物信息学分析两组的抗氧化活性差异 |
| 2.5 CEW和 TEW的抗氧化活性测定 |
| 3 讨论 |
| 3.1 差异蛋白质的功能分析 |
| 3.2 抗氧化相关蛋白质的筛选 |
| 4 小结 |
| 第三章 两种海拔高度鸡种蛋蛋黄蛋白质组的比较研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果和讨论 |
| 2.1 TEY和 CEY的基本营养成分分析及其蛋白质的鉴定 |
| 2.2 TEY和 CEY中差异表达的蛋白质 |
| 2.3 差异蛋白质的生物信息学分析 |
| 2.4 生物信息学分析差异蛋白质与抗氧化活性相关 |
| 2.5 藏鸡和白来航鸡抗氧化活性相关的蛋白和基因 |
| 2.6 体外抗氧化测定 |
| 2.7 细胞毒性/细胞保护作用 |
| 3 讨论 |
| 3.1 差异蛋白质的功能分析 |
| 3.2 CEYH和 TEYH对于Caco-2 细胞的保护作用 |
| 3.3 鉴定与抗氧化活性有关的蛋黄蛋白质 |
| 4 小结 |
| 第四章 两种海拔高度鸡种蛋抗氧化蛋白质筛选 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 蛋白质注释 |
| 1.3 鸡蛋抗氧化活性蛋白质的筛选 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 比较本研究中鉴定的蛋白质与已报道蛋白质 |
| 2.2 构建蛋清和蛋黄中蛋白质数据集 |
| 2.3 确定抗氧化活性候选蛋白质 |
| 2.4 PIT54的功能分析与同源比对 |
| 3 讨论 |
| 3.1 鸡蛋中抗氧化活性蛋白质的筛选 |
| 3.2 PIT54的生物活性预测分析 |
| 3.3 PIT54的保守性分析 |
| 4 小结 |
| 第五章 两种海拔高度鸡种蛋蛋黄PIT-54的纯化与质谱分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 血红蛋白的提取及亲和层析柱的制备 |
| 2.2 PIT54蛋白质纯化 |
| 2.3 质谱鉴定 |
| 2.4 PIT54与血红蛋白的结合能力 |
| 2.5 PIT54抗氧化能力的测定 |
| 2.6 两种来源的PIT54糖基化位点鉴定 |
| 2.7 两种蛋白质的磷酸化位点差异鉴定 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第六章 两种海拔高度PIT54对CAM血管生成的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 低氧孵化过程的模拟与控制 |
| 2.2 调试与孵化测试 |
| 2.3 鸡胚尿囊绒毛膜的给药时间点筛选 |
| 2.4 两种PIT54 对于鸡胚CAM的血管发育的影响 |
| 3.讨论 |
| 3.1 高原低氧孵化箱的模拟与控制 |
| 3.2 不同孵化时间对于CAM血管生成的影响 |
| 3.3 不同药物对于鸡胚CAM血管发育的影响 |
| 4 小结 |
| 第七章 两种海拔PIT54对CAM血管生成机制的探究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 PIT54抗体的制备与效果评价 |
| 2.2 PIT54的表达部分探测 |
| 2.3 C-PIT54和T-PIT54对HIF-1α表达量的影响 |
| 2.4 不同药物处理对VEGFR2/Src信号分子机制的影响 |
| 2.5 C-PIT54和T-PIT54对PI3K/Akt信号分子机制的影响 |
| 2.6 C-PIT54和T-PIT54对ERK和p38 及各自磷酸化水平的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 PIT54表达部位分析 |
| 3.2 C-PIT54和T-PIT54 对血管生成相关蛋白的影响 |
| 3.3 PIT54 影响鸡胚CAM血管生成的机制 |
| 4 小结 |
| 第八章 两种海拔高度鸡PIT54基因测序比较 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 载体的构建与酶切鉴定 |
| 2.2 PIT54 protein基因DNA结构分析 |
| 2.3 不同来源的PIT54 protein基因DNA序列比较分析 |
| 2.4 预测的T-PIT54与C-PIT54 氨基酸序列的比较分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第九章 结论与展望 |
| 1 结论 |
| 2 创新性 |
| 3 研究展望 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（6）鸡鸭胚胎发育的形态学比较及ALX1基因在鸡鸭喙部的时空表达（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 1.1 禽类胚胎发育的研究进展 |
| 1.2 影响胚胎发育的因素 |
| 1.2.1 温度的影响 |
| 1.2.2 湿度的影响 |
| 1.2.3 光照的影响 |
| 1.2.4 其他因素的影响 |
| 1.3 ALX1基因的研究进展 |
| 1.4 原位杂交技术的简介 |
| 1.5 本研究的目的及意义 |
| 1.5.1 鸭胚胎发育体系的建立 |
| 1.5.2 ALX1基因在鸡鸭喙部的研究 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物简介 |
| 2.1.2 主要试剂及配制 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 种蛋的储存 |
| 2.2.2 种蛋的孵化 |
| 2.2.3 胚胎的收集,固定和图像的采集 |
| 2.2.4 鸡和鸭喙部RNA的提取 |
| 2.2.5 鸡和鸭喙部RNA的反转录(获取cDNA) |
| 2.2.6 ALX1基因的扩增 |
| 2.2.7 ALX1基因在鸡鸭喙部的原位杂交 |
| 2.2.8 图片的拍摄和处理 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 鸭胚胎发育体系的建立及鸡鸭胚胎发育的比较 |
| 3.2 ALX1在鸡鸭喙部的原位杂交结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 禽类胚胎发育的研究 |
| 4.1.1 禽类体节发育时期的研究 |
| 4.1.2 禽类喙发育时期的研究 |
| 4.1.3 禽类四肢发育时期的研究 |
| 4.1.4 禽类羽毛发育时期的研究 |
| 4.1.5 禽类胚胎发育在其他方面研究的影响 |
| 4.2 ALX1基因的表达及其他相关基因对鸡鸭喙部发育的影响 |
| 4.3 ALX1基因影响鸡鸭喙部发育研究的展望 |
| 4.4 小结 |
| 5 结论 |
| 6 本研究的创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表的文章 |
（7）LED绿光调控种蛋孵化胚胎代谢和出雏特性的机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 种蛋胚胎孵化过程中的变化 |
| 1.1.1 胚胎的发育过程 |
| 1.1.2 营养物质的变化 |
| 1.1.3 胚胎的生理代谢 |
| 1.2 蛋壳与胚胎的关系 |
| 1.2.1 蛋壳的形成 |
| 1.2.2 蛋壳气孔结构 |
| 1.2.3 蛋壳的功能 |
| 1.3 光照对孵化的影响 |
| 1.3.1 胚胎发育 |
| 1.3.2 出雏特征 |
| 1.3.3 出雏后行为 |
| 1.4 本研究的目的、意义及内容 |
| 1.4.1 本研究的目的 |
| 1.4.2 本研究的意义 |
| 1.4.3 本研究的主要内容 |
| 1.5 本研究技术路线图 |
| 第二章 LED绿光剂量对种蛋孵化胚胎发育及代谢的影响 |
| 2.1 不同光照强度对胚胎发育及呼吸速率的影响 |
| 2.1.1 引言 |
| 2.1.2 材料与方法 |
| 2.1.3 评价指标 |
| 2.1.4 结果 |
| 2.1.5 讨论 |
| 2.2 不同绿光光照剂量对胚胎发育及呼吸速率的影响 |
| 2.2.1 引言 |
| 2.2.2 材料与方法 |
| 2.2.3 评价指标 |
| 2.2.4 统计分析 |
| 2.2.5 结果 |
| 2.2.6 讨论 |
| 2.3 本章小结 |
| 第三章 LED绿光对种蛋孵化期间蛋壳特性的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 种蛋颜色测定与分组 |
| 3.2.2 孵化过程及采样 |
| 3.3 统计分析 |
| 3.4 结果 |
| 3.4.1 孵化期间绿光对蛋壳色度变化的影响 |
| 3.4.2 孵化期间绿光对蛋壳色素变化的影响 |
| 3.4.3 孵化期间绿光对蛋壳元素含量变化的影响 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 本章小结 |
| 第四章 LED绿光对种蛋孵化出雏供能组织与物质的影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 试验动物 |
| 4.2.2 光照处理 |
| 4.2.3 孵化过程 |
| 4.2.4 出雏过程 |
| 4.3 数据获取 |
| 4.3.1 出雏特征 |
| 4.3.2 供能组织与物质 |
| 4.4 结果 |
| 4.4.1 出雏特征与胚胎发育 |
| 4.4.2 供能组织与相关物质 |
| 4.4.3 肝脏转录组测序 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 本章小结 |
| 第五章 种蛋孵化出雏过程死亡机制及LED绿光对出雏的促进作用 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 试验动物 |
| 5.2.2 光照处理 |
| 5.2.3 孵化过程 |
| 5.2.4 出雏过程 |
| 5.3 数据获取 |
| 5.3.1 死亡统计和胚胎发育 |
| 5.3.2 供能组织及物质 |
| 5.3.3 蛋壳扫描电镜 |
| 5.4 统计分析 |
| 5.5 结果 |
| 5.5.1 死亡统计和胚胎发育 |
| 5.5.2 供能组织和物质 |
| 5.5.3 蛋壳扫描电镜 |
| 5.6 讨论 |
| 5.7 本章小结 |
| 第六章 混合不同孵化轨迹的种蛋对胚胎发育、出雏特性和雏鸡质量的影响 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 材料与方法 |
| 6.2.1 试验动物和设置 |
| 6.2.2 孵化管理 |
| 6.2.3 出雏过程 |
| 6.2.4 养殖管理 |
| 6.3 数据获取 |
| 6.3.1 胚胎发育指标 |
| 6.3.2 种蛋出雏特征 |
| 6.3.3 育雏生长指标 |
| 6.4 统计分析 |
| 6.5 结果 |
| 6.5.1 胚胎发育指标 |
| 6.5.2 种蛋出雏特征 |
| 6.5.3 育雏生长指标 |
| 6.6 讨论 |
| 6.7 本章小结 |
| 第七章 总结、创新与展望 |
| 7.1 全文总结 |
| 7.2 创新点 |
| 7.3 研究展望 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（8）肉种鸡正常受精率条件下种蛋孵化率低的原因分析及可行性解决方案（论文提纲范文）
| 1 肉种鸡正常受精率条件下孵化率低的原因分类 |
| 1.1 管理因素造成的肉种鸡正常受精率条件下种蛋孵化率低的原因 |
| 1.2 种鸡营养因素造成的黄羽肉种鸡正常受精率条件下种蛋孵化率低 |
| 1.3 种鸡遗传因素造成的黄羽肉种鸡正常受精率条件下种蛋孵化率低的原因 |
| 1.4 肉种鸡免疫水平造成的黄羽肉种鸡正常受精率条件下种蛋孵化率低的原因 |
| 2 肉种鸡正常受精率条件下种蛋孵化率低的问题排查与解决方案 |
（9）提高反季节狮头鹅种蛋孵化率的研究（Ⅰ）——胚蛋发育基础参数测定与分析（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 仪器与设备 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.4 孵化管理 |
| 1.5 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 孵化效果 |
| 2.2 种蛋失水 |
| 2.3 蛋内温度和蛋壳表面温度 |
| 2.4 气孔密度与胚胎发育的关系 |
| 2.5 蛋形指数对孵化效果的影响 |
| 2.6 蛋重对孵化效果的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 种蛋失水率对胚胎发育的影响 |
| 3.2 孵化期间蛋温的变化 |
| 3.3 气孔密度对胚胎发育的影响 |
| 3.4 蛋形指数对胚胎发育的影响 |
| 3.5 蛋重对孵化效果的影响 |
| 4 结论 |
（10）胚胎时期肾脏对骨骼系统发育的相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 肾脏概述 |
| 2 骨骼系统概述 |
| 3 鸡胚胎的发育过程及特性 |
| 4 顺铂概述 |
| 5 研究目的及意义 |
| 6 课题的研究内容 |
| 7 本课题创新性 |
| 材料与方法 |
| 1 主要材料及设备 |
| 2 实验对象 |
| 3 实验方法 |
| 4 统计学方法 |
| 技术路线及实验结果 |
| 第一部分 鸡胚胎孵化特点及模型建立情况 |
| 第二部分 顺铂对鸡胚胎肾脏发育的影响 |
| 第三部分 顺铂对骨骼发育的影响 |
| 第四部分 肾脏损伤对骨骼发育的影响 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词 |
| 在读期间发表的论文 |
| 获奖情况 |
| 致谢 |
四、种鸡蛋在孵化过程中引起胚胎死亡原因的调查（论文参考文献）
- [1]鸽子种蛋孵化过程胚胎生长发育特点及失重率变化规律[J]. 李健,蒋小龙,于帅,苏泽躬,鲁俊鹏. 黑龙江畜牧兽医, 2020(19)
- [2]水禽胚胎发育分期体系的建立及其与鸡胚胎发育的比较研究[D]. 白士斌. 沈阳农业大学, 2020(03)
- [3]病毒直接注射法制备转基因鸡的研究与优化[D]. 秦晓莲. 广西大学, 2020(02)
- [4]冀南地区鸡胚蛋有害菌的检测[D]. 刘洁玉. 河北工程大学, 2019(02)
- [5]藏鸡种蛋氧化应激响应蛋白质的筛选及其PIT54对血管生成机制的研究[D]. 刘亚平. 华中农业大学, 2019(01)
- [6]鸡鸭胚胎发育的形态学比较及ALX1基因在鸡鸭喙部的时空表达[D]. 李珊珊. 沈阳农业大学, 2019(03)
- [7]LED绿光调控种蛋孵化胚胎代谢和出雏特性的机理研究[D]. 钟镇涛. 浙江大学, 2018(09)
- [8]肉种鸡正常受精率条件下种蛋孵化率低的原因分析及可行性解决方案[J]. 李龙. 广东畜牧兽医科技, 2017(01)
- [9]提高反季节狮头鹅种蛋孵化率的研究（Ⅰ）——胚蛋发育基础参数测定与分析[J]. 黄晓东,马铭龙,巨向红,吴炳雄,贾汝敏. 安徽农业科学, 2016(20)
- [10]胚胎时期肾脏对骨骼系统发育的相关性研究[D]. 管保章. 暨南大学, 2015(04)