一、多胺及其合成抑制剂对梨花粉萌发及花粉管生长的影响（论文文献综述）
岳雷,孙月丽,尹宝颖,李中勇,张媛,徐继忠[1]（2018）在《外源多胺对鸭梨自花授粉花粉管生长及自交坐果的影响》文中认为以鸭梨为试材,进行不同浓度外源多胺处理,通过离体花粉培养,荧光显微动态观察和花序、花朵坐果率调查,研究了外源多胺处理对鸭梨自花授粉花粉管生长及自交坐果的影响,以期为外源多胺调控鸭梨自交不亲和性提供重要依据。结果表明:适宜浓度的外源腐胺（Put）、亚精胺（Spd）、精胺（Spm）处理后的鸭梨花柱提取液,能够提高花粉萌发率和促进花粉管生长,最适宜的Put浓度和Spd浓度为0.250 mmol·L-1,Spm浓度为0.050mmol·L-1。鸭梨自花授粉72h后,花粉管先端膨大,在花柱中部停止生长。3种多胺处理均能使其穿过花柱中部到达基部,其中以0.250mmol·L-1 Spd处理花粉管到达基部最多。不同浓度外源多胺均能提高鸭梨自花授粉花序坐果率和花朵坐果率,其中以0.250mmol·L-1 Put表现最佳。
陆文雅[2]（2018）在《ALA对梨花粉管尖端囊泡积累的影响及其机理探究》文中认为果树在生产过程中为达到优质丰产稳产的目的需要进行疏花疏果,而人工疏除法费时费力、化学疏除剂效果不稳定又存在副作用。5-氨基乙酰丙酸（ALA）是生物体内所有有机杂环吡咯化合物的重要合成前体,参与调节植物生长发育,是一种天然无毒可生物降解的环境友好型生物调节剂。本实验室前人研究发现ALA具有疏花的作用,但其机理尚不明确。本文利用光学显微镜、透射电子显微镜、激光共聚焦显微镜、非损伤微测技术（NMT）及定量Real-time PCR等方法初步探讨了 ALA对梨花粉管尖端囊泡积累的影响机制。主要研究结果如下。1.10 mg·L-1、20 mg·L-1、30 mg·L-1的外源ALA处理可以抑制花粉萌发和花粉管伸长,且具有浓度依赖性。在1 min-20 min内随时间的增加对照和ALA处理的花粉管内囊泡的荧光强度都在增强,但前者荧光亮度显着低于后者;与此同时,ALA处理的花粉管囊泡分布紊乱,在尖端以及亚尖端都有分布,失去了对照中顶端分布的特征,这表明ALA可促进囊泡的胞吞作用或抑制胞吐作用。对花粉管伸长过程中尖端Ca2+流速及Ca2+-ATPase相关基因表达量进行检测得出,ALA可以抑制Ca2+的内流速度及上调ACA2和ACA9的表达,且这些作用依赖于胞内较低的Ca2+浓度,表明ALA可以通过抑制Ca2+内流及增加Ca2+外流来减少胞内Ca2+浓度。此外,钙信号还参与了ALA抑制的花粉萌发及扰乱的胞吞胞吐。这些结果表明ALA通过降低Ca2+浓度以促进胞吞作用抑制胞吐作用从而影响花粉管的伸长。另外,通过透射电镜对花粉管尖端超微结构的观察证明了缺钙在ALA破坏内质网、高尔基体及线粒体等细胞器结构的过程中也起重要作用。2.为探究ALA的具体信号通路,我们引入了血红素加氧酶HO1与NO两个在ALA代谢过程中的重要因子。（1）HO1的诱导剂Hemin可抑制花粉萌发及花粉管伸长且具有浓度依赖性,与ALA一样也能造成花粉管尖端囊泡积累及分布变广,而其抑制剂ZnPP使ALA的作用得到缓解,证明了 ALA对花粉的抑制作用依赖于增加HO1活性,且与囊泡积累有关。（2）10 mg·L-1-30 mg·L-1ALA可以不同程度的增加花粉管内NO含量。用0.5 mmol·L-1-3.5 mmol·L-1的NO外源供体SNP处理发现,SNP可以浓度依赖性的抑制花粉萌发及花粉管伸长;加入不同浓度的NO清除剂cPTIO后ALA对花粉的抑制作用得到缓解,其中70 μmol·L-1的cPTIO缓解效果最好,表明ALA可以通过增加细胞内NO含量来抑制花粉萌发过程。FM4-64的染色实验证明ALA对囊泡的积累作用同样也依赖于NO。对HO1、NO及Ca2+进行上下游分析表明HO1在NO上游而NO又在Ca2+上游。3.通过加入微管稳定剂紫杉醇Taxol来探究ALA对囊泡运输过程的影响,结果表明不同浓度Taxol稳定微管结构后ALA的抑制花粉萌发作用得到缓解,其中0.1 mg·L-1浓度效果最好,表明ALA可以破坏微管,造成微管解聚;对囊泡进行染色得到ALA对囊泡的积聚作用同样依赖于其解聚微管抑制的囊泡运输。从分子角度进一步研究ALA对胞吐作用过程中囊泡的拴系及融合的影响,结果表明ALA主要影响了囊泡的拴系过程,它可显着上调梨花粉管中EXO70B1、SEC3A、SEC5A、SEC6、SEC8及SEC15A等基因的表达量,且这种作用依赖于降低胞内Ca2+的浓度,这从侧面证明了 ALA通过降低Ca2+浓度来抑制胞吐作用造成囊泡积累过多分布变广,从而抑制花粉萌发过程。综上所述,ALA抑制花粉萌发过程的具体机制为:ALA通过提高HO1活性增加管内NO含量,又能降低位于NO下游的Ca2+浓度,破坏内质网、高尔基体及线粒体的细胞结构、解聚微管,从而抑制囊泡的胞吐作用促进胞吞作用,造成囊泡积累效应,进而抑制花粉的萌发及花粉管伸长。
孙江妹[3]（2017）在《类受体激酶PbrBAKl和PbrANXUR调控梨花粉管生长的机理研究》文中进行了进一步梳理类受体激酶（receptor-like kinase,RLKs）是植物细胞中重要的信号分子,在植物的许多生长发育及生理胁迫过程中起着重要作用。按照胞外配体结合结构域的不同可将RLKs分成22个亚类,其中富亮氨酸重复序列类受体蛋白激酶（Leucine-rich repeat receptor-like kinase,LRR-RLKs）亚家族的 BAK1（BRI1-associated receptor kinase 1）和 CrRLK1-L（Catharanthus roseus receptor-like kinase）亚家族的 ANXUR 是调控植物细胞生长的两种重要蛋白激酶。BAK1是植物激素油菜素甾醇（Brassinosteroids;BR）受体蛋白BRI1的共受体,参与介导BR调控植物细胞生长的信号转导路径。ANXUR在花粉管尖端通过调节烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH）氧化酶的表达,从而控制细胞壁的完整性,影响花粉管的生长。但是,ANXUR作为植物中特有的蛋白激酶,其调控花粉管生长的具体机制还不完全阐明,以及其是否参与BAK1介导的油菜素内酯（Brassinolide,BL）信号转导路径目前还不清楚。为解析上述问题,本研究开展了系列实验,主要取得如下结果:1、对蔷薇科五个物种的LRR-RLKs亚家族进行分析并筛选出梨花粉中可能起重要作用的BAK1基因。LRR-RLK是RLK家族中最大的一个基因亚家族,参与植物的生长发育过程中众多响应。目前,LRR-RLK基因家族在已公布全基因组序列的五个主要的蔷薇科物种基因组中的进化模式尚未见报道。本研究深入分析了包括草莓（Fragaria vesca）、苹果（Malus domestica）、梨（Pyrus bretschneideri）、梅（Prunus mume）和桃（Prunus persica）在内的五个蔷薇科物种的LRR-RLK基因,分别包含201、244、427、267和258个LRR-RLK基因。研究进一步根据前人从4个植物物种中开发、定义的序列模型将所有的LRR-RLK蛋白根据序列相似性分为23个亚家族。RLK-PelleLRR-Ⅻ-1（Ⅻ-1）、RLK-PelleLRR-Ⅺ-1（Ⅺ-1）和RLK-PelleLRR-Ⅲ（Ⅲ）是其中三个最大的亚家族。共线性分析表明五个蔷薇科物种中有236个串联重复基因,其中Ⅻ-1（82个基因）和Ⅺ-1（80个基因）占比为68.6%。结果表明串联复制是LRR-RLK基因亚家族扩张的主要因素。基因表达、组织特异表达和亚细胞定位数据揭示了 LRR-RLK基因在不同器官和组织之间表达的差异,其中最大的亚家族Ⅺ-1在所有五个蔷薇科物种中都高表达。本研究从梨中鉴定了五个PbrBRI1基因和五个PbrBAK1基因,它们分别属于Xb-1和Ⅱ亚家族,分别命名为PbrBRI1a到PbrBRIle和PbrBAKla到PbrBAKle。总的来说,本分析结果为蔷薇科基因组中LRR-RLK基因家族提供了一个概览,并为进一步的功能研究提供了基础。2、通过实验发现外源表油菜素内酯（Epibrassinolide,epiBL）能促进梨花粉管的生长。通过离体培养和活体授粉两种方法用外源epiBL处理梨花粉,首先利用液体培养基离体培养‘砀山酥梨’花粉发现低浓度epiBL能促进花粉管生长,而高浓度epiBL则抑制花粉管生长,其中0.01 μM epiBL对梨花粉管生长促进作用最明显,外源油菜素甾醇（Brassinosteroids,BR）的合成抑制剂丙环唑（Propiconazol,PPZ）对梨花粉生长具有明显的抑制作用,且添加外源epiBL能在一定程度上恢复花粉管的生长。同时外源epiBL能促进花粉管微丝骨架的解聚,促进花粉管尖端活性氧（ROS）的积累和激活花粉管尖端和亚尖端Ca2+通道。另外,采用液体授粉的方法比较分析了加入外源epiBL,谷氨酸（Glutamic acid,Glu）和亚精胺（Spermidine,Spd）对活体花粉生长及萌发过程的影响,发现外源epiBL和Spd处理能促进花粉管生长量的增加并增加坐果率。这说明一定浓度的epiBL能促进花粉管生长发育,减轻低温等非生物胁迫对梨树授粉受精过程造成的不利影响,同时也为阐明油菜素内酯促进花粉管生长的作用机理提供了理论依据。3、研究表明,梨ANXURs（ANX1和ANX2）不能直接调控NADPH氧化酶活性,同时ANXURs的表达受外源epiBL的调控,但不是通过BAK1直接介导的。BAK1作为重要的类受体激酶,参与多条信号通路并作为共受体参与调控花粉管的生长等多个过程,ANXURs作为另一种重要的受体激酶在花粉管中特异表达,并能通过调节NADPH氧化酶活性调控花粉管的生长。梨PbrBAK1d、PbrANX1和PbrANX2都在花粉中有表达,且都定位在细胞原生质体膜上,本实验发现梨PbrANX1和PbrANX2基因的表达受到外源epiBL的调控,采用反义寡聚脱氧核苷酸（Antisense Oligodeoxynucleotide,A-ODNs）技术抑制梨花粉中PbrBAK1d后发现花粉管生长被抑制,而抑制梨PbrANX1和PbrANX2基因后则能促进花粉管的生长,这说明BAK1和ANXURs调控花粉管生长不是同一条信号路径。利用酵母双杂和双分子荧光互补（Bimolecular Fluorescence Complementation,BiFC）实验发现梨和拟南芥BAK1和ANXURs基因没有直接互作关系,同样发现ANXURs和呼吸爆发氧化酶同源基因（Respiratory burst oxidase homologue,RBOH）H和J也没有直接互作关系。这说明ANXUR受体激酶调控花粉管生长不是通过直接磷酸化Rboh H和Rboh J完成的,而ANXURs则可能与BL信号通路中的其它蛋白相互影响从而介导BL调控花粉管生长的信号通路。4、研究发现丝裂原活化蛋白激酶MAPK（Mitogen activated protein kinase）处于ANXURs的下游接收信号并激活NADPH氧化酶活性从而调控花粉管生长。ANX1和ANX2作为CrRLK1-L亚家族的重要蛋白,它们具有典型的单跨膜受体激酶结构,参与调控花粉管的生长,同时丝裂原活化蛋白激酶MAPK最易识别具有跨膜结构的蛋白受体激酶,而目前还没有MAPK直接调控花粉管生长的相关报道。ANXUR参与调控花粉管生长不是通过直接与Rboh H/J相互作用而完成的,本研究以梨PbrANX1基因的胞内域（PbrANX1-intracellular domain,PbrANX1-ID）为诱饵在‘砀山酥梨,花粉核质蛋白酵母文库中筛选到两个与拟南芥AtMPK3和AtMPK6基因相似的序列片段,通过比对从‘砀山酥梨’基因组中筛选出四个MAPK基因,分别命名为PbrMPK5、PbrMPK7、PbrMPK15和PbrMPK18。通过酵母双杂和农杆菌侵染烟草叶片表皮细胞发现PbrMPK18与PbrANX1能相互作用,同时拟南芥基因AtANX1和AtANX2与AtMPK3和AtMPK6也相互作用,并且当ANXURs的胞内域完整存在时才能与MPK相互作用。另外发现PbrMPK18与PbrRboh H和PbrRbohJ之间也存在互作,同样拟南芥AtMPK3/6与AtRboh H/J也分别两两互作。本实验表明MAPK处于ANXUR的下游,将ANXUR胞外域接收的信号传递到细胞内,然后MAPK通过与Rboh H/J互作来诱导活性氧的产生,从而调控花粉管的生长。总之,本论文在课题组长期研究基础上,以木本果树梨的花粉为主要对象,综合应用生理测定、基因克隆、组织和细胞定位、功能分析以及信号转导路径构建等技术手段和研究方法,深入解析了不同类受体激酶亚家族基因在调控梨花粉管生长中的促进或抑制作用,通过药理学和遗传学等研究策略,在分子层面上探讨了 BAK1和ANXUR调控梨花粉管生长发育的信号路径,研究结果为梨生产关键环节授粉受精中花粉管生长发育调控提供了理论指导。
徐港明[4]（2016）在《大豆下胚轴诱导不定根再生过程中二胺氧化酶基因表达及酶活性变化》文中提出植物不定根的生长受多种因素的影响,如植物激素、多胺、NO、光照、温度等。已有研究表明,多胺氧化酶（CuAO）在植物不定根再生过程中有着非常重要的作用,它可能通过催化多胺的氧化降解,参与对不定根生长的调控。因此,一个有意义的问题是,在不定根再生过程中,植物激素、多胺、光照等因素与多胺氧化酶基因表达和酶活性变化有何关系?目前国内外鲜见报道。本文以“中黄25”大豆种子为材料,用外源多胺、多胺氧化酶抑制剂-氨基胍（AG）、吲哚丁酸（IBA）、生长素运输抑制剂-三碘苯甲酸（TIBA）以及生物合成抑制剂-艾维素（AVG）和不同光周期处理,研究它们对大豆幼苗下胚轴外植体不定根再生的影响,并用荧光定量PCR以及酶活性检测技术,测定在大豆下胚轴不定根再生过程中二胺氧化酶基因表达和酶活性变化,结果如下:（1）低浓度的腐胺（Put）、亚精胺（Spd）和精胺（Spm）都能显着促进大豆下胚轴不定根的生长,最适浓度分别为1.0 mmol/L、0.25 mmol/L及0.05 mmol/L,高浓度多胺则对不定根的生长表现出一定的抑制作用。随着下胚轴不定根的生长,从第2 d开始,CuAO基因表达水平逐渐增加,在第3 d后一直维持较高的水平;3种外源多胺处理都可显着促进CuAO基因表达水平。与此对应的是,在不定根再生过程中,CuAO活性随时间延长而逐渐增加,多胺处理组的酶活性要显着高于对照组,Put的处理效果最好。CuAO专性抑制剂氨基胍（AG）处理,其可显着抑制大豆下胚轴不定根的生长,这可能与CuAO活性受到AG强烈抑制有关。这些结果暗示,CuAO基因表达受外源多胺的诱导;多胺促进大豆下胚轴不定根的生长可能与其诱导CuAO基因表达以及促进酶的活性有关。（2）吲哚丁酸（IBA）能够显着促进大豆下胚轴不定根的生长,当浓度达到30 mg/L时,不定根的数量达到最高值,而当IBA浓度超过30 mg/L时,生长素对不定根的生长表现出抑制作用。而生长素极性运输抑制剂-TIBA和生长素合成抑制剂-AVG处理,两者均可可显着抑制大豆下胚轴不定根的生长。CuAO基因表达水平检测表明,吲哚丁酸IBA处理可显着抑制CuAO基因的表达。但在脱离IBA处理后的第2 d,CuAO基因表达水平又逐渐增加,并达到与对照相似的水平。与此对应的是,对照组CuAO活性随时间延长而逐渐增加,IBA处理组的酶活性呈先下降后上升的趋势,并在第3 d后显着高于对照组。TIBA和AVG对CuAO基因表达水平影响检测表明,在TIBA处理后的2 d以及AVG处理的第1 d,TIBA和AVG处理对CuAO基因的表达有一定的促进作用。而在离开TIBA处理的第3 d和AVG处理第2 d,CuAO基因表达反而低于对照。在TIBA和AVG处理后期,对CuAO活性有强烈的抑制作用。这些结果表明,生长素促进大豆下胚轴不定根再生过程可能有CuAO的参与;虽然生长素对CuAO基因表达有负调控作用,但生长素的这种前期处理,对下胚轴后期的CuAO基因表达,尤其是酶活性有明显的增益效应,并与大豆下胚轴不定根再生的促进作用相同步。（3）在不同光照周期中,随着光照时间的增加,对大豆下胚轴不定根再生的促进效果越明显。光照处理能够显着促进CuAO基因的表达,黑暗条件下CuAO基因表达水平明显低于光照条件。CuAO酶活性检测显示的结果与基因表达水平相一致。结果表明:CuAO基因表达受到光照的正调控;光照促进大豆下胚轴不定根的生长,可能与其诱导CuAO基因表达从而促进酶的活性有关。上述结果表明,大豆下胚轴不定根的再生,受一定浓度的外源多胺、生长素以及光周期的促进;适宜的多胺和光照都可正向调节CuAO基因表达水平和酶活性的增加;虽然生长素对CuAO基因表达有负调控作用,但经生长素处理后,对下胚轴生长后期的CuAO基因表达尤其是酶活性有明显的增益作用,并与大豆下胚轴不定根再生的促进作用相同步。因此,我们认为外源多胺、生长素和光周期均可通过对CuAO基因表达和酶活性的调节,而影响大豆下胚轴不定根的再生。
岳雷,李中勇,尹宝颖,张媛,徐继忠[5]（2016）在《外源亚精胺对鸭梨自花授粉花粉管伸长及花柱蛋白表达的影响》文中进行了进一步梳理为探讨外源多胺调控鸭梨自交不亲和的生理生化机制,分别以自花授粉和外源亚精胺处理后13 d的花柱为试材,测定了不同处理不同时期花粉管生长发育动态,利用双向电泳技术和质谱分析技术分析了外源亚精胺处理前后不同时期鸭梨花柱蛋白的差异表达。结果显示:与对照相比,不同浓度的Spd处理均能极显着促进花粉管生长,0.25 mmol/L Spd处理72 h后可使大量花粉管到达花柱基部;在自交花柱电泳图谱中发现了3种特异蛋白质,A蛋白质Mr A=28.0 k Da,p I=5.7;B蛋白质Mr B=28.5 k Da,p I=5.7;C蛋白质Mr C=22.0 k Da,p I=5.3,这3种特异蛋白质可能与自交不亲和性相关;质谱分析获得了2个较好的蛋白点,分别为推定和假定蛋白。
索文龙,宋碧清,牛永志,郑昀晔,李元君,马文广[6]（2016）在《多胺及其合成抑制剂对烟草花粉多胺含量及花粉活力的影响》文中研究说明‘云烟87’和‘K326’花期喷施多胺及其合成抑制剂,收集其花粉测定多胺含量和花粉活力。研究结果表明:喷施外源多胺可不同程度提高花粉内源多胺含量、保护酶活性和花粉萌发率,多胺合成抑制剂则降低花粉内源多胺含量、保护酶活性和花粉萌发率。其中,喷施0.5 mmol/L腐胺（Put）效果最好,花粉内源多胺含量和保护酶活性较高,花粉萌发率提高10.03%34.00%。研究结果说明:烟草花期喷施适宜浓度的多胺可以提高花粉多胺含量和花粉活力,可以作为一种调控花粉活力的方法。
姜雪婷[7]（2013）在《梨花粉管细胞骨架结构变化的调控研究》文中认为细胞骨架在植物细胞的生长发育过程中起着重要的作用。本研究利用砂梨品种‘丰水’和‘今村秋’的花粉和花柱为试材,研究了细胞骨架在梨花粉管生长发育以及胁迫过程中的作用,主要结果如下：1.研究了各类细胞信号分子与梨花粉管细胞骨架的互作情况。观察到花粉管内微管骨架的结构,通过药剂学实验发现微管参与了花粉管的生长过程；钙离子载体A23187处理0.5 h后尖端微丝环状结构消失,微管解聚,处理1h后尖端与亚尖端微丝解聚；EGTA处理则会使微丝骨架解聚而对微管骨架影响较小；钙调素抗血清处理能够导致微丝骨架解聚,表明花粉管内钙离子的变化能够调控细胞骨架的结构改变；ROS的变化显着影响细胞骨架结构的变化,而NO的变化对细胞骨架变化的影响较小；同时发现微管骨架结构变化能够影响花粉管内钙离子的振荡与分布,也能影响花粉管内NO和ROS的分布与浓度。2.研究了细胞骨架的变化对于梨花粉管中细胞核降解与线粒体结构的影响。微管骨架解聚剂Oryzalin处理2h后细胞核降解,间接表明微管骨架解聚是花粉管生长停止信号途径中早期的信号因子；细胞骨架的解聚会造成线粒体膜电势降低,从而向细胞质中释放出细胞色素C,促进了细胞核的降解,加速了PCD过程；而细胞骨架的稳定则会缓解自交不亲和反应中花粉管的PCD过程；利用透射电镜技术研究了细胞骨架变化对梨自交不亲和过程中花粉管线粒体结构的影响,微管解聚后花粉管内线粒体体积没有显着变化,但内部分脊结构消失,膜变厚；而微管骨架稳定剂与不亲和花柱S-RNase协同处理后能够显着稳定不亲和花柱S-RNase对线粒体结构的破坏作用,只有部分线粒体内脊结构消失,线粒体体积与对照没有显着变化；微丝解聚后线粒体体积增大,部分线粒体内脊被破坏；微丝稳定剂对不亲和花柱S-RNase对线粒体破坏的恢复作用效果不明显,协同处理后花粉管内线粒体仍然膨大,不具有脊结构。上述结果表明微管的稳定能够缓解不亲和花柱S-RNase对线粒体的破坏,而微丝的稳定则对不亲和花柱S-RNase对线粒体结构的破坏的稳定作用不显着。3.基于梨基因组的生物信息学分析获得了梨微丝与微管相关蛋白基因。通过比对查找到15个推测为Myosin家族的基因,利用系统发育分析将其分为7组,并发现这些Myosin基因在梨染色体中均匀分布；基因结构域分析表明,梨中Myosin Ⅷ大类基因缺少了SH3和DIL结构域；在梨基因组中比对到11个推测为MAP65家族的基因,利用系统发育分析将其分为4组,根据同源性比对进一步发现每组中的梨MAP65基因与同组的拟南芥MAP65基因具有高度的同源性。4.研究了梨花柱S-RNase与游离氨基酸对花粉管生长及其细胞骨架的作用。微管稳定剂紫杉醇与花柱S-RNase同时处理显示：微管的稳定能够缓解花柱S-RNase对不亲和花粉管生长长度的抑制作用,而对于S-RNase对萌发率的抑制作用没有显着影响；不亲和花柱S-RNase能够使花粉管内皮层微管快速消失,含有GC的花粉管比率显着下降,亲和花柱S-RNase处理后花粉管内微管骨架没有显着变化；紫杉醇和不亲和花柱S-RNase同时处理能够缓解不亲和S-RNase对花粉管微管的解聚作用。同时发现钙离子调控蛋白钙调素能够稳定不亲和S-RNase引起的微丝降解；微管稳定剂紫杉醇能够缓解不亲和S-RNase引起的钙离子振幅提高、钙梯度下降；NO的清除剂c-PTIO能够稳定不亲和S-RNase引起的微丝与微管骨架的解聚；而微管稳定剂也能够缓解不亲和S-RNase引起的ROS下降。上述结果表明：微管参与了梨自交不亲和过程；并发现梨自交不亲和过程中花粉管内细胞骨架与钙离子以及NO/ROS系统存在相互作用。梨花柱中测定出了14种游离氨基酸,其中谷氨酸含量最高；利用这些种类氨基酸的L型、D型对花粉管生长的研究发现,其中8中氨基酸对梨花粉管生长存在浓度依赖型：L-、D-谷氨酸,L-、D-半胱氨酸,L-、D-苯丙氨酸,D-缬氨酸和L-天冬氨酸；使用上述高浓度氨基酸处理后微丝骨架结构变化显示：高浓度的D-缬氨酸、D-苯丙氨酸和L-半胱氨酸能够使花粉管内微丝骨架解聚,出现片段化；L-苯丙氨酸处理后尖端出现微丝结构,花粉管内微丝增粗；L-天冬氨酸、D-谷氨酸和D-半胱氨酸处理后尖端微丝骨架环状结构消失,且亚尖端微丝消失；而L-谷氨酸处理后微丝结构没有显着的变化。5.研究了各种外源因素（生长调节剂与多胺、膨压变化、金属离子、温度变化等）对花粉管内细胞骨架的影响。生长调节剂对于花粉管生长与微丝骨架的影响表明,GA3和玉米素对于花粉管生长的调控具有浓度依赖性,低浓度的促进生长,而高浓度则抑制生长并使花粉管内细胞骨架严重解聚；低浓度的ABA促进花粉管生长,使花粉管尖端微丝骨架的环状结构消失；低浓度精胺（0.1 mM）对梨花粉管内微丝骨架结构没有显着的影响,而高浓度的精胺与亚精胺（0.5mM）都都能够使花粉管内微丝骨架解聚,但精胺处理的反应更显着。研究测定了梨花粉管中的渗透压为0.6 M,低渗处理后花粉管尖端膨大,尖端微丝结构扭曲,高渗处理后出现微丝扭曲的环状结构,尖端微丝缺失；梨花粉管对Cu2+较敏感,抑制浓度为5州,而A13+和Na+的抑制浓度分别为2 mM和50 mM,Cu2+处理0.5 h就出现了微丝骨架的片段化,A13+处理1h后才出现明显的微丝骨架解聚,而Na+处理1h只有间断微丝结构消失,没有明显的解聚现象；温度胁迫下花粉管生长都受到极显着的抑制,4℃处理1h后微丝骨架发生解聚,而37℃处理0.5 h后花粉管尖端膨大,但没有显着的微丝解聚现象。
高永彬[8]（2013）在《梨花粉管停止生长与线粒体的关系研究》文中研究表明线粒体变化及其在花粉管亚尖端的富集对满足花粉管高速极性生长过程中巨大的能量需求和分配极其重要。但是,在花粉管停止生长过程中,线粒体作用特点尚不清楚。本研究以梨品种‘黄花’、‘丰水’及‘砀山酥梨’为试材,综合应用免疫荧光标记、激光共聚焦显微镜、透射电镜、亚细胞器制备分离等技术手段,研究了线粒体对离体培养梨花粉管衰老和死亡的作用特点,主要结果如下：1.探明了梨自花花粉管线粒体呼吸代谢及可溶性蛋白变化。结果表明,梨自花花粉管呼吸氧消耗量显着降低。对提纯的自花花粉管线粒体呼吸链进行检测,发现其呼吸控制比率明显下降。这些结果表明自花花粉管线粒体功能发生紊乱。采用二维电泳对自花花粉管线粒体可溶性蛋白进行了分析,自花花粉管线粒体与异花花粉管线粒体可溶性蛋白共匹配了70个蛋白点,具有显着性差异的蛋白点为18个,其中上调的为7个,下调的为11个。2.明确了离体梨花粉从萌发到生长停止,这一发育过程属于植物器官衰老。揭示了梨花粉管生长发育过程涉及衰老并最终死亡过程由胞质酸化诱导的线粒体功能紊乱介导。梨花粉水合后0-9h,花粉管维持较高生长速率,到15h后,生长基本停止。FDA染色显示停止生长的花粉管已失去活力。以植物衰老的生理及细胞学指标对停止生长的梨花粉管进行分析,结果显示,衰老的花粉管丙二醛含量和电解质渗漏率明显升高。在细胞水平上,观测到衰老的梨花粉管内微丝骨架大量解聚,细胞核DNA降解。在衰老的梨花粉管中,V-ATPase活性降低导致胞质酸化。胞质酸化可以直接诱导线粒体功能衰退,其中包括线粒体内部脊结构紊乱、溶胀,呼吸氧消耗及ATP产生下降,膜电位下降等。此外,用线粒体膜电位去极化试剂缬氨霉素处理花粉管,使线粒体功能衰退,从而诱导了花粉管细胞核降解。该药理学实验进一步证实了线粒体功能受到破坏可以导致花粉管细胞核降解。3.明确了梨花粉管尖端活性氧主要来源为质膜NADPH氧化酶。结果表明,NaN3处理显着抑制了梨花粉管线粒体呼吸功能,但是线粒体呼吸功能的失调并不能完全消除花粉管尖端活性氧,这说明线粒体可能不是花粉管尖端活性氧的主要贡献者。但是,NADPH氧化酶抑制剂DPI基本能清除尖端活性氧,此外,发现低温处理诱导了花粉管尖端活性氧显着下降。同时深入研究,成功克隆了梨花粉管NADPH氧化酶基因（PrRBOH）全长,其编码氨基酸序列具有植物RBOHs家族蛋白功能域。荧光定量PCR分析结果显示,低温处理后,花粉管内PrRBOH呈现低表达量。这些结果说明,梨花粉管尖端ROS主要调控因子是NADPH氧化酶。4.探明了低温通过抑制线粒体能量代谢功能,从而调控花粉管胞吞作用,最终抑制梨花粉管生长的过程。在低温条件下,花粉管生长通常被抑制。在花粉管快速生长过程中,需要线粒体产生足够的能量以满足胞内各种代谢活动需求。其中,花粉管伸长所需要的细胞壁合成物质通常经囊泡运输到一定位置,这一过程需要大量ATP。本章研究从线粒体能量代谢角度深入探讨了其在低温条件下调控梨花粉管生长特点。结果显示,4℃低温完全抑制了梨花粉管生长。进一步分析发现,低温导致了花粉管尖端胞吞作用停止,线粒体呼吸作用降低及胞内ATP含量下降。
张雪梅,李保国,齐国辉,郭素萍[9]（2012）在《外源多胺对不同苹果品种自花授粉花粉管生长的影响》文中提出【目的】研究外源多胺处理苹果花柱后自花授粉花粉管生长情况,获得能提高不同苹果品种自交坐果率的外源多胺适宜浓度,为提高苹果自交亲和率提供科学依据。【方法】以红奥、早红香、嘎拉、斗南、富士、金冠和夏光7个苹果品种的花柱和花粉为试验材料,用花柱半离体方法研究外源多胺对苹果自花授粉花粉管生长的影响。【结果】适宜浓度的外源Spm、Spd和Put处理自交不亲和苹果花柱后,均能提高花柱伸出花粉管比率和每根花柱管伸出花粉管数,其中红奥苹果花柱最适宜的Spm浓度为0.100mmol/L,其他自交不亲和品种均为0.005mmol/L;除金冠和夏光苹果适宜的Put浓度为0.25mmol/L外,其他自交不亲和品种为0.01mmol/L;适宜红奥和富士苹果的Spd浓度为0.01mmol/L,适宜斗南、金冠和嘎拉苹果的Spd浓度为0.50mmol/L,适宜夏光苹果的Spd浓度为0.25mmol/L。【结论】一定浓度的外源多胺能够提高自交不亲和苹果品种的自交坐果率。
王朝凤[10]（2012）在《几种植物生长调节物质对杏树开花生物学特性的影响》文中研究说明杏树开花较早,常因花期气温过低而使花器或幼果受冻,造成大量的落花落果,影响杏的产量和品质。在生产实践中,可通过推迟花期、配置授粉树和人工辅助授粉等措施来提高杏树的产量和品质。本研究在调查分析陕西关中地区25个杏树栽培品种花粉量的基础上,探讨了几种生长调节物质（赤霉素GA3、多效唑PP333和多胺PAs）对杏树花粉萌发、花粉管生长、花芽分化和花期生物学特性的影响,以期为杏树的丰产栽培提供理论依据。本研究主要结果如下：1.杏花粉量、花粉萌发率、花粉管长度和完全花比率在不同品种间存在显着差异。其中,串枝红、沙金红、金太阳和胡安娜杏品种的花粉量大、花粉萌发率高、花粉管较长,宜选作授粉品种。而恐龙蛋、味帝和苏联4号杏品种的花粉量少、花粉萌发率低、花粉管较短,不宜作为授粉品种。杏花粉量、花粉萌发率、花粉管长度和完全花比率在品种间的变化值均呈中间多、两边少的正态分布。2.杏花粉量与花粉萌发率、花粉量与完全花比率之间无相关性,花粉萌发率与花粉管长度间呈极显着正相关,花粉萌发率与完全花比率呈负相关。杏花粉萌发率和花粉管长度都可以代表其花粉育性,而花粉量大小不能代表杏树花粉育性。杏树雌雄性器官的发育相互消长,雄性器官发育对营养的消耗会对雌性器官的发育带来不利影响。在杏树花期,加强水肥管理对杏雌雄性器官的发育十分重要。3.0.025mmol/L的SPD.0.05mmol/L的SPM和0.25mmol/L的PUT.20mg/L的GA3分别对沙金红、金太阳、黄洪依克杏品种花粉萌发和花粉管生长具有显着的促进作用。4.较高浓度（50mg/L-100mg/L）的外源GA3能显着降低串枝红、银香白杏花芽内源多胺含量、抑制花芽分化、延迟花期。其中,50mg/L的外源GA3可使串枝红、银香白花期延后2-3天,75mg/L和100mg/L的外源GA3可使串枝红、银香白花期延后5-8天。但外源GA3对银香白的副作用较大,可导致银香白花量减少、长果枝生长势显着减弱；50mg/L、75mg/L、100mg/L的外源GA3虽能显着降低库尔勒托拥品种花芽内源多胺含量,但对库尔勒托拥杏花期影响不大。
二、多胺及其合成抑制剂对梨花粉萌发及花粉管生长的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、多胺及其合成抑制剂对梨花粉萌发及花粉管生长的影响（论文提纲范文）
（1）外源多胺对鸭梨自花授粉花粉管生长及自交坐果的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 材料处理 |
| 1.2.2 试验设计 |
| 1.2.3 花粉液体培养 |
| 1.2.4 花粉管生长的动态观察 |
| 1.2.5 受精过程解剖观察 |
| 1.2.6 自花坐果率的调查 |
| 1.3 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 外源多胺对鸭梨花粉萌发的影响 |
| 2.2 外源多胺对鸭梨花粉管生长及受精过程的影响 |
| 2.2.1 外源多胺处理对鸭梨花粉管生长动态的影响 |
| 2.2.2 外源多胺对离体花粉花粉管伸长的影响 |
| 2.2.3 外源亚精胺对受精的影响 |
| 2.3 外源多胺对鸭梨自交坐果率的影响 |
| 2.3.1 Put处理对鸭梨自交坐果率的影响 |
| 2.3.2 Spd处理对鸭梨自交坐果率的影响 |
| 2.3.3 Spm处理对鸭梨自交坐果率的影响 |
| 3 结论与讨论 |
（2）ALA对梨花粉管尖端囊泡积累的影响及其机理探究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1. ALA及其疏花效应 |
| 1.1 ALA |
| 1.2 ALA的疏花效应 |
| 2. 花粉管细胞结构与生长机制 |
| 2.1 花粉管的细胞结构 |
| 2.2 花粉管生长机制 |
| 3. 花粉管生长过程的重要因子 |
| 3.1 HO |
| 3.2 NO |
| 3.3 HO/CO信号系统与NO的互作 |
| 3.4 Ca |
| 4. 本研究的目的与意义 |
| 第二章 外源ALA对梨花粉管中囊泡积累的影响 |
| 1. 材料方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 梨花粉离体培养及试验处理 |
| 1.3 梨花粉萌发率及花粉管长度的测定 |
| 1.4 FM 4-64的装载及共聚焦显微镜观察囊泡 |
| 1.5 梨花粉管超微结构的观察 |
| 1.6 非损伤微测技术 |
| 1.7 总RNA提取及qRT-PCR分析 |
| 1.8 数据统计分析 |
| 2. 结果分析 |
| 2.1 ALA对梨花粉萌发率和花粉管伸长长度的影响 |
| 2.2 ALA处理对梨花粉管尖端囊泡胞吞胞吐的影响 |
| 2.3 ALA对梨花粉管尖端Ca~(~(2+))的影响 |
| 2.4 Ca~(~(2+))信号参与ALA抑制的花粉萌发及扰乱囊泡的胞吞胞吐过程 |
| 2.5 Ca~(~(2+))信号参与ALA破坏的细胞器结构 |
| 3. 讨论 |
| 第三章 HO1与NO参与ALA抑制的花粉萌发及扰乱囊泡的胞吞胞吐过程 |
| 1. 材料方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 梨花粉离体培养及试验处理 |
| 1.3 FM 4-64的装载及共聚焦显微镜观察囊泡 |
| 1.4 NO荧光探针DAF-FM DA标记 |
| 1.5 数据统计分析 |
| 2. 结果分析 |
| 2.1 HO1参与ALA抑制的花粉萌发及扰乱囊泡的胞吞胞吐过程 |
| 2.2 NO参与ALA抑制的花粉萌发及扰乱囊泡的胞吞胞吐过程 |
| 2.3 HO1、NO及Ca~(~(2+))在花粉萌发过程中上下游关系的探究 |
| 3. 讨论 |
| 第四章 ALA对梨花粉管中囊泡运输及囊泡拴系与融合相关基因表达量的影响 |
| 1. 材料方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 梨花粉离体培养及试验处理 |
| 1.3 FM 4-64的装载及共聚焦显微镜观察囊泡 |
| 1.4 总RNA提取及qRT-PCR分析 |
| 1.5 数据统计分析 |
| 2. 结果分析 |
| 2.1 微管稳定剂Taxol参与ALA抑制的花粉萌发过程 |
| 2.2 微管稳定剂Taxol参与ALA扰乱囊泡的胞吞胞吐过程 |
| 2.3 ALA对梨花粉管中囊泡拴系及融合相关基因表达量的影响 |
| 3. 讨论 |
| 全文结论与创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
（3）类受体激酶PbrBAKl和PbrANXUR调控梨花粉管生长的机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 花粉管生长的调控机制 |
| 1.2 油菜素内酯信号转导的研究进展 |
| 1.2.1 油菜素内酯的合成及信号转导途径 |
| 1.2.2 油菜素内酯与其他激素及环境因子的关系 |
| 1.2.3 油菜素内酯对花粉管生长的调控 |
| 1.3 类受体激酶的研究进展 |
| 1.3.1 LRR-RLK研究进展 |
| 1.3.2 CrRLK1-L研究进展 |
| 1.4 研究的目的和意义 |
| 第二章 蔷薇科全基因组LRR-RLK基因家族分析 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 LRR-RLK基因的鉴定和分类 |
| 2.1.2 保守结构域和内含子数量 |
| 2.1.3 染色体位置和共线性分析 |
| 2.1.4 表达分析 |
| 2.1.5 构建基因共表达网络 |
| 2.1.6 RT-PCR和亚细胞定位 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 LRR-RLK基因的全基因组鉴定和分类 |
| 2.2.2 保守结构域和基因结构分析 |
| 2.2.3 共线性分析 |
| 2.2.4 表达模式分析 |
| 2.2.5 共表达网络分析 |
| 2.2.6 梨LRR-RLK基因的组织特异表达和亚细胞定位 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 外源表油菜素内酯对梨花粉生长发育的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 花粉培养 |
| 3.1.3 外源epiBL及PPZ对花粉管的影响 |
| 3.1.4 液体授粉及梨花粉管苯胺蓝染色 |
| 3.1.4.1 液体授粉 |
| 3.1.4.2 苯胺蓝染色 |
| 3.1.5 花粉管微丝骨架的观察 |
| 3.1.6 花粉管尖端钙离子的检测 |
| 3.1.7 花粉管尖端活性氧的检测 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 外源epiBL对离体梨花粉管生长的影响 |
| 3.2.2 外源添加epiBL对梨液体授粉的影响 |
| 3.2.3 外源epiBL对花粉管微丝骨架和花粉管内Ca~(2+)含量变化的影响 |
| 3.2.4 外源epiBL对花粉管尖端活性氧含量变化的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 梨ANXUR基因的表达及其与BAK1调控花粉管生长 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 花粉培养 |
| 4.1.3 RNA提取 |
| 4.1.4 cDNA的合成 |
| 4.1.5 epiBL处理下ANXUR基因的表达 |
| 4.1.6 梨PbrBAK1基区RT-PCR |
| 4.1.7 亚细胞定位 |
| 4.1.7.1 基因克隆与载体构建 |
| 4.1.7.2 拟南芥叶片原生质体的提取与瞬时转化 |
| 4.1.8 ODN技术抑制基因表达 |
| 4.1.9 梨和拟南芥BAK1与ANXUR的蛋白互作 |
| 4.1.9.1 酵母双杂法 |
| 4.1.9.2 双分子荧光互补法 |
| 4.1.10 梨和拟南芥ANXUR与Rboh H/J蛋白互作 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 外源epiBL处理对梨ANXUR基因表达的影响 |
| 4.2.2 梨PbrBAK1基因的RT-PCR |
| 4.2.3 PbrBAK1d的克隆与亚细胞定位 |
| 4.2.4 A-ODN技术抑制PbrBAK1d表达对花粉管生长的影响 |
| 4.2.5 ANXUR的克隆与亚细胞定位 |
| 4.2.6 抑制ANXUR基因的表达对花粉管生长的影响 |
| 4.2.7 ANXUR与BAK1的互作 |
| 4.2.8 ANXUR与Rboh H/J的互作 |
| 4.3 讨论 |
| 第五章 ANXUR通过与MPK相互作用调控花粉管生长 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验材料 |
| 5.1.2 酵母文库的筛选 |
| 5.1.3 梨MPK蛋白的筛选 |
| 5.1.4 基因克隆与载体构建 |
| 5.1.5 酵母双杂 |
| 5.1.6 农杆菌侵染烟草叶片表皮细胞 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 PbrANX1蛋白结构分析 |
| 5.2.2 PbrANX1胞内域载体的构建 |
| 5.2.3 以PbrANX1胞内域为诱饵蛋白进行酵母文库筛选 |
| 5.2.4 梨MPK基因进化分析 |
| 5.2.5 梨和拟南芥ANXUR与MPK蛋白的互作验证 |
| 5.2.6 完整的ANXUR胞内域是与MPK互作的必要条件 |
| 5.2.7 MPK与Rboh H/J的互作 |
| 5.3 讨论 |
| 全文结论 |
| 创新点 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 已发表文章 |
| 致谢 |
（4）大豆下胚轴诱导不定根再生过程中二胺氧化酶基因表达及酶活性变化（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 多胺在植物生长发育中的作用 |
| 1 植物体内的多胺及存在形式 |
| 2 植物体内的多胺代谢 |
| 3 多胺与植物生长发育 |
| 4 多胺与生殖生长 |
| 5 多胺与植物的胁迫响应 |
| 6 多胺生物合成相关基因及其作用 |
| 第二节 生长素在植物生长发育中的作用 |
| 1 植物生长素的种类 |
| 2 生长素的生物合成及运输 |
| 3 生长素与植物生长发育 |
| 4 生长素响应因子与植物的生长发育 |
| 5 生长素与多胺之间的相互关系 |
| 第三节 光照在植物生长发育中的作用 |
| 1 光对植物生长发育的影响 |
| 2 光敏素和光形态建成 |
| 3 光照与多胺之间的相互关系 |
| 第四节 多胺氧化酶在植物生长发育中的作用 |
| 1 植物中多胺氧化酶的分布 |
| 2 多胺氧化酶的结构及生化特点 |
| 3 多胺氧化酶对植物生长发育的影响 |
| 第二章 多胺对大豆下胚轴不定根再生的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 数据分析 |
| 2 结果及分析 |
| 2.1 外源多胺对大豆下胚轴不定根再生的影响 |
| 2.2 外源多胺处理后大豆下胚轴二胺氧化酶基因表达和酶活性的变化 |
| 2.3 氨基胍对大豆下胚轴不定根生长和二胺氧化酶活性的影响 |
| 3 讨论 |
| 第三章 生长素对大豆下胚轴不定根再生的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 数据分析 |
| 2 结果及分析 |
| 2.1 生长素对大豆下胚轴不定根再生的影响 |
| 2.2 生长素处理后大豆下胚轴二胺氧化酶基因表达和酶活性的变化 |
| 2.3 生长素极性运输及合成抑制剂对大豆下胚轴不定根生长和二胺氧化酶的影响 |
| 3 讨论 |
| 第四章 光照对大豆下胚轴不定根再生的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 数据分析 |
| 2 结果及分析 |
| 2.1 不同光周期对大豆下胚轴不定根再生的影响 |
| 2.2 不同光周期处理下大豆下胚轴二胺氧化酶基因表达和酶活性的变化 |
| 3 讨论 |
| 第五章 全文讨论与结论 |
| 1 全文讨论 |
| 1.1 多胺对大豆下胚轴不定根再生和CuAO基因表达和酶活性的影响 |
| 1.2 生长素对大豆下胚轴不定根再生和CuAO基因表达和酶活性的影响 |
| 1.3 光照对大豆下胚轴不定根再生和CuAO基因表达和酶活性的影响 |
| 2 全文结论 |
| 参考文献 |
| 研究生在读期间发表的论文 |
| 缩略语表 |
| 致谢 |
（5）外源亚精胺对鸭梨自花授粉花粉管伸长及花柱蛋白表达的影响（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1. 1 试验材料 |
| 1. 2 试验方法 |
| 1.2.1花粉液体培养 |
| 1.2.2花粉管生长的动态观察 |
| 1.2.3可溶性蛋白的提取 |
| 1.2.4蛋白质双向电泳 |
| 1.2.5差异点质谱分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2. 1 外源亚精胺对鸭梨花粉管伸长的影响 |
| 2. 2 自花授粉和亚精胺处理后鸭梨花柱可溶性蛋白表达的比较 |
| 2. 3 自花授粉和亚精胺处理后鸭梨花柱蛋白的双向电泳分析 |
| 2. 4 差异蛋白点的初级质谱结果分析 |
| 3 讨论与结论 |
（6）多胺及其合成抑制剂对烟草花粉多胺含量及花粉活力的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1. 1 试验材料 |
| 1. 2 方法 |
| 1. 2. 1 花粉采集 |
| 1. 2. 2 花粉内源多胺含量、保护酶活性、MDA含量测定 |
| 1. 2. 3 花粉活力测定 |
| 1. 2. 4 数据的处理及方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2. 1 多胺和多胺合成抑制剂对烟草花粉内源多胺含量变化的影响 |
| 2. 2 多胺和多胺合成抑制剂对烟草花粉保护酶活性及MDA含量的影响 |
| 2. 2. 1多胺及多胺合成抑制剂对烟草花粉SOD和CAT活性变化的影响 |
| 2. 2. 2 多胺及多胺合成抑制剂对烟草花粉POD和APX活性变化的影响 |
| 2. 2. 3 多胺及多胺合成抑制剂对烟草花粉MDA含量变化的影响 |
| 2. 3 多胺和多胺合成抑制剂对烟草花粉萌发的影响 |
| 3 讨论 |
（7）梨花粉管细胞骨架结构变化的调控研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 文献综述 |
| 1 植物细胞骨架 |
| 1.1 肌动蛋白细胞骨架 |
| 1.1.1 肌动蛋白细胞骨架的作用 |
| 1.1.2 花粉管中的肌动蛋白细胞骨架 |
| 1.1.3 肌动蛋白结合蛋白(ABPs) |
| 1.2 微管细胞骨架 |
| 1.2.1 微管细胞骨架的作用 |
| 1.2.2 花粉管微管的组成、起始位点及其作用 |
| 1.2.3 花粉管中微管结合蛋白(MAP) |
| 1.2.4 微管的组织与花粉管生长的关系 |
| 2 蔷薇科植物自交不亲和研究进展 |
| 2.1 花柱S决定因子 |
| 2.1.1 花柱S-RNase的鉴定 |
| 2.1.2 花柱S-RNase的结构 |
| 2.1.3 花柱S-RNase功能 |
| 2.2 花粉S决定物 |
| 2.2.1 F-box基因的识别 |
| 2.2.2 花粉SFB的构造 |
| 2.2.3 花粉SFB的功能 |
| 2.3 蔷薇科植物自交亲和性研究 |
| 2.3.1 S位点基因功能失调 |
| 2.3.2 修饰位点的功能失调 |
| 2.3.3 多倍体与SI |
| 2.4 梨自交不亲和过程中的信号转导 |
| 3 本研究的目的和意义 |
| 第一章 梨花粉管内细胞骨架与信号分子之间的相互作用 |
| 第一节 梨花粉管内钙离子与细胞骨架的相互影响 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 花粉离体培养 |
| 1.3 花粉管内微丝骨架结构的观察 |
| 1.4 花粉管中微管结构的观察 |
| 1.5 花粉管内钙离子浓度变化的测定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 微管解聚剂Oryzalin及稳定剂紫杉醇对花粉生长的影响 |
| 2.2 微管染色条件的筛选 |
| 2.3 Oryzalin与紫杉醇对花粉管中微管结构的影响 |
| 2.4 钙离子载体A23187与EGTA对花粉管细胞骨架的影响 |
| 2.5 钙调素对花粉管微丝骨架的影响 |
| 2.6 微管骨架调节剂对花粉管内钙离子变化的影响 |
| 3 讨论 |
| 第二节 ROS和NO与梨花粉细胞骨架的相互作用 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 花粉离体培养 |
| 1.3 花粉管内微丝骨架结构的观察 |
| 1.4 花粉管中微管结构的观察 |
| 1.5 花粉管内ROS与NO分布的观察 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 NO清除剂c-PTIO花粉管细胞骨架的影响 |
| 2.2 DPI对花粉管细胞骨架的影响 |
| 2.3 微管骨架的变化对花粉管内ROS变化的影响 |
| 2.4 微管骨架的变化对花粉管内NO变化的影响 |
| 3 讨论 |
| 第二章 梨花粉管细胞骨架的变化对亚细胞器结构的影响 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 花柱S-RNase提取 |
| 1.3 花粉离体培养 |
| 1.4 花粉管膜电势的观察 |
| 1.5 花粉管内核DNA降解的观察 |
| 1.6 花粉管内线粒体结构的观察 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 微管骨架解聚剂oryzalin对花粉管内细胞核降解的影响 |
| 2.2 细胞骨架解聚剂与稳定剂处理对花粉管线粒体膜电势的影响 |
| 2.3 微管结构变化对SI中花粉管线粒体结构的影响 |
| 2.4 微丝结构变化对SI中花粉管线粒体结构的影响 |
| 3 讨论 |
| 第三章 基于梨基因组的微丝与微管结合蛋白基因分析 |
| 第一节 梨微丝结合蛋白基因的生物信息学分析 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 基因查找与序列分析 |
| 1.2 序列分析与对比 |
| 1.3 梨Myosin基因在基因组上的定位 |
| 1.4 梨Myosin的结构域分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 梨中Myosin序列与拟南芥中Myosin的系统发育树 |
| 2.2 梨与拟南芥Myosin家族基因的同源性分析 |
| 2.3 梨与拟南芥Myosin家族基因的染色体定位 |
| 2.4 梨Myosin基因的结构域分析 |
| 3 讨论 |
| 第二节 梨微管结合蛋白基因的生物信息学分析 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 基因查找与序列分析 |
| 1.2 序列分析与对比 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 梨中MAP序列与拟南芥中MAP65家族的系统发育树 |
| 2.2 梨与拟南芥MAP65家族基因的同源性分析 |
| 2.3 梨MAP65家族基因的染色体定位 |
| 3 讨论 |
| 第四章 梨花柱S-RNase与游离氨基酸对花粉管细胞骨架的影响 |
| 第一节 花柱S-RNase对梨花粉管微管骨架的影响 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 花柱S-RNase提取 |
| 1.3 花粉离体培养 |
| 1.4 花粉管内微丝骨架结构的观察 |
| 1.5 花粉管中微管结构的观察 |
| 1.6 花粉管内ROS与NO分布的观察 |
| 1.7 花粉管内钙离子浓度变化的测定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 微管稳定剂紫杉醇与不亲和S-RNase协同处理对花粉生长的影响 |
| 2.2 亲和及不亲和花柱S-RNase对花粉管中微管的影响 |
| 2.3 自交不亲和过程中花粉管内钙离子与细胞骨架的相互作用 |
| 2.4 自交不亲和过程中花粉管内NO/ROS与细胞骨架的相互作用 |
| 3 讨论 |
| 第二节 花柱中游离氨基酸对梨花粉管细胞骨架的影响 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 花柱中游离氨基酸的测定 |
| 1.3 花粉离体培养 |
| 1.4 花粉管内微丝骨架结构的观察 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 花柱中游离氨基酸含量的测定 |
| 2.2 不同浓度氨基酸对花粉萌发与生长的影响 |
| 2.3 不同氨基酸对花粉管内微丝骨架结构的影响 |
| 3 讨论 |
| 第五章 外源因素对梨花粉管细胞骨架的影响 |
| 第一节 外源生长调节剂与多胺对花粉管细胞骨架的作用 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 花粉离体培养 |
| 1.3 花粉管内微丝骨架结构的观察 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同浓度生长调节剂对花粉萌发与生长的影响 |
| 2.2 不同浓度生长调节剂对花粉管微丝骨架的影响 |
| 2.3 精胺对梨花粉管内细胞骨架结构的影响 |
| 2.4 亚精胺对梨花粉管内细胞骨架结构的影响 |
| 3 讨论 |
| 第二节 膨压变化对梨花粉管中细胞骨架的影响 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 花粉离体培养 |
| 1.3 质壁分离法测定花粉管渗透压并建立改变细胞膨压的方法 |
| 1.4 花粉管内微丝骨架结构的观察 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 花粉管渗透压的测定及不同膨压处理的设定 |
| 2.2 不同膨压对花粉管内微丝结构的影响 |
| 3 讨论 |
| 第三节 胞外金属离子对梨花粉管细胞骨架的作用 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 花粉离体培养 |
| 1.3 花粉管内微丝骨架结构的观察 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同浓度的金属离子对花粉管生长的影响 |
| 2.2 不同金属离子对梨花粉管内微丝骨架的影响 |
| 3 讨论 |
| 第四节 温度胁迫对梨花粉管细胞骨架的影响 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 花粉离体培养 |
| 1.3 花粉管内微丝骨架结构的观察 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同温度处理对花粉管生长的影响 |
| 2.2 不同温度处理对花粉管微丝的影响 |
| 3 讨论 |
| 综合讨论 |
| 全文结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 发表文章 |
| 致谢 |
（8）梨花粉管停止生长与线粒体的关系研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 植物细胞死亡的特点研究进展 |
| 1.1 植物细胞死亡的发生 |
| 1.2 植物细胞死亡的调控特点 |
| 2 主要细胞器与植物细胞死亡的关系 |
| 2.1 线粒体 |
| 2.2 液泡 |
| 2.3 细胞核 |
| 3 细胞死亡过程中的信号分子及反应 |
| 3.1 活性氧 |
| 3.2 钙离子 |
| 3.3 植物激素 |
| 3.4 蛋白激酶 |
| 3.5 微丝骨架 |
| 3.6 梨自花花粉管死亡信号转导反应 |
| 4 结语 |
| 第二章 梨自花花粉管线粒体代谢特点 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 花粉培养 |
| 1.3 梨花柱S-RNase提取及活性和浓度检测 |
| 1.4 花柱S-RNase处理花粉管 |
| 1.5 花粉管呼吸氧消耗检测 |
| 1.6 花粉管线粒体提纯及完整性检测 |
| 1.7 分离的线粒体呼吸氧消耗测定 |
| 1.8 花粉管线粒体可溶性总蛋白二维电泳 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 梨自花花粉管呼吸氧消耗的变化 |
| 2.2 分离得到梨花粉管线粒体完整性和纯度 |
| 2.3 梨自花花粉管线粒体呼吸链变化 |
| 2.4 梨自花花粉管线粒体可溶性蛋白变化 |
| 3 讨论 |
| 第三章 梨花粉管衰老过程中线粒体作用特点 |
| 第一节 离体梨花粉管衰老特点 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 花粉培养 |
| 1.3 花粉管生长统计 |
| 1.4 FDA测定花粉管死亡率 |
| 1.5 MDA含量测定 |
| 1.6 电解质渗漏测定 |
| 1.7 标记微丝骨架 |
| 1.8 细胞核DNA降解检测 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 梨花粉管生长发育特点 |
| 2.2 梨花粉管活力变化 |
| 2.3 梨花粉管生长发育过程中MDA含量和电解质渗漏变化 |
| 2.4 衰老梨花粉管发生微丝骨架解聚 |
| 2.5 衰老梨花粉管核DNA降解 |
| 3 讨论 |
| 第二节 梨花粉管衰老过程中线粒体变化及其影响 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 花粉培养及处理 |
| 1.3 花粉管长度统计 |
| 1.4 FDA染色统计花粉管活力 |
| 1.5 花粉管线粒体亚细胞结构检测 |
| 1.6 花粉管线粒体膜电位标记与分析 |
| 1.7 花粉管线粒体的分离及其完整性和纯度检测 |
| 1.8 花粉管及分离的线粒体呼吸作用测定 |
| 1.9 花粉管胞内ATP含量测定 |
| 1.10 花粉管胞内pH检测 |
| 1.11 花粉管V-ATPase活性检测 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 衰老梨花粉管线粒体结构变化 |
| 2.2 衰老花粉管线粒体膜电位变化 |
| 2.3 衰老花粉管胞内ATP及其呼吸氧消耗变化 |
| 2.4 pH值对分离的花粉管线粒体呼吸链复合体活性影响 |
| 2.5 衰老花粉管胞质发生酸化 |
| 2.6 衰老导致梨花粉管V-ATPase活性降低 |
| 2.7 V-ATPase特异性抑制剂诱导花粉管早衰 |
| 3 讨论 |
| 第四章 线粒体膜电位抑制剂缬氨霉素诱导梨花粉管细胞核降解 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 花粉培养及处理 |
| 1.3 花粉萌发及花粉管生长统计 |
| 1.4 花粉管线粒体膜电位测定 |
| 1.5 DAPI荧光标记花粉管细胞核 |
| 1.6 花粉管细胞提取 |
| 1.7 细胞核完整性及细胞质污染检测 |
| 1.8 花粉管胞内核酸内切酶检测 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 缬氨霉素对梨花粉萌发及生长的影响 |
| 2.2 缬氨霉素对梨花粉管线粒体膜电位的影响 |
| 2.3 线粒体功能衰退对细胞核的作用 |
| 2.4 梨花粉管细胞核提取纯化 |
| 2.5 梨花粉管胞内核酸内切酶检测 |
| 3 讨论 |
| 第五章 线粒体和NADPH氧化酶对梨花粉管尖端活性氧的影响 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 花粉培养 |
| 1.3 低温和线粒体呼吸抑制剂处理花粉管 |
| 1.4 花粉管呼吸氧消耗测定 |
| 1.5 NBT染色检测花粉管尖端活性氧(ROS) |
| 1.6 花粉管过氧化氢(H_2O_2)亚细胞分析定位 |
| 1.7 引物设计 |
| 1.8 花粉管总RNA提取 |
| 1.9 cDNA第一链合成 |
| 1.10 花粉管NADPH氧化酶基因克隆 |
| 1.11 梨花粉管PrRBOH蛋白序列分析 |
| 1.12 荧光定量PCR检测PrRBOH基因表达 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 NaN_3对梨花粉管线粒体呼吸功能的影响 |
| 2.2 NaN_3对梨花粉管尖端ROS的影响 |
| 2.3 DPI及低温对梨花粉管尖端ROS的影响 |
| 2.4 低温对梨花粉管H_2O_2亚细胞定位分析 |
| 2.5 梨花粉管NADPH氧化酶基因PrRBOH的克隆 |
| 2.6 PrRBOH蛋白序列分析 |
| 2.7 PrRBOH基因qRT-PCR定量表达分析 |
| 3 讨论 |
| 第六章 低温胁迫下梨花粉管线粒体的变化及其作用 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 花粉培养及处理 |
| 1.3 花粉管生长统计 |
| 1.4 FM4-64标记花粉管囊泡 |
| 1.5 花粉管囊泡亚细胞分布 |
| 1.6 花粉管呼吸氧消耗测定 |
| 1.7 花粉管内ATP含量测定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 低温抑制花粉管生长 |
| 2.2 低温下花粉管胞吞作用变化 |
| 2.3 梨花粉管尖端囊泡的亚细胞分布 |
| 2.4 低温下花粉管呼吸氧消耗及胞内ATP含量变化 |
| 2.5 花粉管线粒体呼吸抑制剂对花粉管生长的影响 |
| 3 讨论 |
| 综合讨论 |
| 全文结论 |
| 全文创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间发表和投稿的学术论文 |
（9）外源多胺对不同苹果品种自花授粉花粉管生长的影响（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.3 统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同浓度Spm对苹果自花授粉后花粉管伸长的影响 |
| 2.2 不同浓度Spd对苹果自花授粉后花粉管伸长的影响 |
| 2.3 不同浓度Put对苹果自花授粉后花粉管伸长的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
（10）几种植物生长调节物质对杏树开花生物学特性的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 几种植物生长调节剂研究进展 |
| 1.1.1 GA_3的生理功能 |
| 1.1.2 PP333的生理功能 |
| 1.1.3 多胺 |
| 1.2 果树开花生物学特性的研究 |
| 1.2.1 果树花粉量的研究 |
| 1.2.2 果树花粉萌发特性的研究 |
| 1.2.3 花芽分化研究进展 |
| 1.2.4 果树花期的研究进展 |
| 1.3 杏树概述 |
| 1.3.1 杏树栽培史 |
| 1.3.2 杏树的研究价值 |
| 1.4 研究的目的和意义 |
| 1.5 技术路线 |
| 第二章 杏不同品种花粉量及花粉萌发特性的研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.1.3 数据处理 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 不同杏品种花粉量的统计研究 |
| 2.2.2 不同杏品种花粉萌发力的研究 |
| 2.2.3 不同杏品种完全花比率的研究 |
| 第三章 多胺和多效唑对杏花粉萌发力的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.1.3 结果与分析 |
| 第四章 赤霉素对杏开花生物学特性的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料处理与采集 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 GA_3对杏花粉萌发力的影响研究 |
| 4.2.2 GA_3对不同杏花芽外部形态特征的影响 |
| 4.2.3 GA_3对不同杏花芽内部形态特征的影响 |
| 4.2.4 GA_3对不同杏花芽内多胺含量的影响 |
| 4.2.5 GA_3对杏花期的影响 |
| 第五章 讨论与结论 |
| 5.1 讨论 |
| 5.1.1 杏花粉萌发特性研究 |
| 5.1.2 GA_3对杏花芽分化及花期的影响 |
| 5.2 结论 |
| 参考文献 |
| 缩略词 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、多胺及其合成抑制剂对梨花粉萌发及花粉管生长的影响（论文参考文献）
- [1]外源多胺对鸭梨自花授粉花粉管生长及自交坐果的影响[J]. 岳雷,孙月丽,尹宝颖,李中勇,张媛,徐继忠. 北方园艺, 2018(17)
- [2]ALA对梨花粉管尖端囊泡积累的影响及其机理探究[D]. 陆文雅. 南京农业大学, 2018(07)
- [3]类受体激酶PbrBAKl和PbrANXUR调控梨花粉管生长的机理研究[D]. 孙江妹. 南京农业大学, 2017(05)
- [4]大豆下胚轴诱导不定根再生过程中二胺氧化酶基因表达及酶活性变化[D]. 徐港明. 苏州大学, 2016(02)
- [5]外源亚精胺对鸭梨自花授粉花粉管伸长及花柱蛋白表达的影响[J]. 岳雷,李中勇,尹宝颖,张媛,徐继忠. 华北农学报, 2016(01)
- [6]多胺及其合成抑制剂对烟草花粉多胺含量及花粉活力的影响[J]. 索文龙,宋碧清,牛永志,郑昀晔,李元君,马文广. 云南农业大学学报(自然科学), 2016(01)
- [7]梨花粉管细胞骨架结构变化的调控研究[D]. 姜雪婷. 南京农业大学, 2013(05)
- [8]梨花粉管停止生长与线粒体的关系研究[D]. 高永彬. 南京农业大学, 2013(08)
- [9]外源多胺对不同苹果品种自花授粉花粉管生长的影响[J]. 张雪梅,李保国,齐国辉,郭素萍. 南方农业学报, 2012(09)
- [10]几种植物生长调节物质对杏树开花生物学特性的影响[D]. 王朝凤. 西北农林科技大学, 2012(06)