一、假性上皮瘤样增生病变中上皮-间质连接区基底膜相关成分缺失机制的研究（论文文献综述）
张青玲[1]（2020）在《NQO1基因及阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌增殖、凋亡、侵袭迁移的影响及机制研究》文中提出研究背景:皮肤鳞状细胞癌（CSCC）是常见的皮肤恶性肿瘤之一,发病率高,具有一定的侵袭及转移能力,严重影响患者生活质量。常见发病危险因素为紫外线（UV）辐射、病毒感染、机体免疫状态等。目前治疗方法有手术切除、激光和冷冻治疗、放射治疗及药物治疗等,但部分患者疗效欠佳。NAD（P）H脱氢酶1（NQO1）是一种器官中广泛分布的黄素酶,以NAD（P）H为供体,催化醌类化合物的双电子还原为对苯二酚类化合物。据报道,NQO1基因缺失,易使小鼠受到氧化应激的影响,发展为肿瘤。也有报道称NQO1敲除可减少胶质母细胞瘤细胞的增殖,而过度表达则增加细胞增殖。基于上述不同的观点,NQO1被认为同时具有抗癌和致癌作用,这取决于不同的条件和细胞种类。由于皮肤鳞状细胞癌的发生发展与紫外线诱导的氧化应激密切相关,我们推测NQO1可能在鳞状细胞癌中起作用。阿苯达唑是一种驱虫药,但近期研究表明阿苯达唑具有抗肿瘤（如非小细胞肺癌、转移性黑色素瘤等）活性,但阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌细胞的作用及其作用机制的影响尚不清楚。因此,本文拟对NQO1基因及阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌增殖、凋亡、侵袭迁移的影响及机制进行研究,进一步揭示皮肤鳞状细胞癌的发生机制,为阿苯达唑临床应用奠定理论基础。第一部分NQO1对皮肤鳞状细胞癌增殖侵袭转移的影响及机制研究目的:检测NQO1基因对皮肤鳞状细胞癌增殖、侵袭迁移的影响,并探讨其机制,为研究鳞癌的发病机制和寻求有效诊断治疗靶点提供新的思路。方法:1.NQO1表达水平检测收集皮肤鳞状细胞癌患者肿瘤组织及肿瘤周围正常组织,进行免疫组化染色,评估鳞癌组织及正常皮肤组织中NQO1表达水平;用western blot方法检测人皮肤细胞如表皮角质形成细胞、人皮肤成纤维细胞以及鳞癌细胞SCC12和SCC13中NQO1蛋白表达水平。2.重组腺病毒的构建通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）等获得NQO1基因过表达或敲除的重组腺病毒。3.NQO1过表达或敲除对皮肤鳞癌细胞生物学行为的影响细胞生长实验用于评估NQO1对CSCC增殖的影响;平板克隆形成实验用于评估NQO1以及阿苯达唑对CSCC细胞平板克隆形成能力的影响;细胞侵袭实验和Wound-healing细胞划痕实验检测对CSCC细胞迁移侵袭能力的影响;4.机制研究western blot方法检测NQO1过表达或敲除对细胞增殖相关调节蛋白如Cyclin D1、Cyclin E、SOX2等表达影响,对E-cadherin、snail等EMT相关分子标志影响,以及EMT相关信号通路标志性分子如AKT、JNK和p38 MAPK等的磷酸化水平的影响,从而揭示NQO1对CSCC增殖、侵袭迁移影响的机制:用深红色染料检测细胞内ROS水平,用于评估NQO1对细胞内ROS水平的影响。结果:1.NQO1在皮肤鳞状细胞癌中的表达NQO1在CSCC损伤区几乎没有检测到或部分检测到。在CSCC病变周围的免疫细胞中可观察到NQO1免疫反应性。与角质形成细胞和成纤维细胞相比,皮肤鳞状细胞癌细胞（SCC12和SCC13）和皮肤细胞中NQO1蛋白水平略低。2.NQO1过表达或敲除对皮肤鳞癌细胞生物学行为的影响细胞生长实验:NQO1过表达导致CSCC细胞系（SCC12和SCC13细胞）细胞增殖显着降低,而NQO1敲除则增加了细胞增殖;与细胞增殖实验结果相似,NQO1降低了SCC12和SCC13细胞的克隆形成活性;细胞侵袭实验:NQO1过表达显着降低了SCC细胞侵袭能力,而NQO1敲除增加了CSCC细胞侵袭;Woundhealing细胞划痕实验:NQO1过表达减少细胞迁移,而NQO1敲除增加细胞迁移。3.NQO1对CSCC细胞增殖相关调节因子的影响NQO1过表达显着降低了细胞增殖相关调节因子如Cyclin D1、Cyclin E等的水平,NQO1敲除增加了这些细胞增殖相关调节因子的水平。4.NQO1对上皮-间质转化（EMT）相关分子标记的影响NQO1过表达使CSCC细胞E-cadherin水平升高,N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug水平略有下降,而NQO1敲除略微降低了CSCC细胞E-cadherin的水平,而增加了其他分子的水平。5.NQO1对上皮-间质转化（EMT）相关细胞内信号通路的影响NQO1过表达轻微地降低了CSCC细胞磷酸化AKT、JNK和p38MAPK的水平,而NQO1敲除则增加了磷酸化AKT、JNK和p38MAPK的水平。6.NQO1对CSCC细胞内ROS水平的影响NQO1过表达明显降低了CSCC细胞内ROS水平,NQO1的敲除导致了CSCC细胞内ROS水平显着升高。结论:NQO1可抑制CSCC增殖、侵袭迁移;NQO1抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖可能与调节增殖相关调节蛋白如细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、细胞周期蛋白E（CyclinE）及p63等水平有关;NQO1可抑制CSCC细胞的侵袭迁移,其机制可能与调控E-cadherin、N-cadherin、波形蛋白（Vimentin）、Snail、slug等上皮间质转化（EMT）相关分子标记的表达水平有关;NQO1对皮肤鳞状细胞癌上皮-间质转化（EMT）的影响与降低EMT相关细胞内信号通路中AKT、JNK和p38mapk等的磷酸化水平有关;NQO1可降低CSCC细胞内ROS的水平。第二部分阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌的抗肿瘤作用及机制研究目的:研究阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌的抗肿瘤作用及机制。方法:1.通过MTT实验评估阿苯达唑对CSCC细胞的细胞毒性及凋亡的影响。2.通过TUNEL染色及Western blot检测阿苯达唑对CSCC细胞凋亡的影响。3.机制研究通过TOPflash实验检测阿苯达唑对CSCC细胞Wnt/β-catenin信号通路活性的影响;Westernblot及MTT实验检测阿苯达唑对内质网应激的影响;平板克隆形成实验、MTT实验及Western blot方法检测阿苯达唑对CSCC干细胞特性的影响。结果:1.阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响MTT实验显示,在阿苯达唑浓度大于等于0.2μm时可降低SCC12和SCC13细胞的生存能力;Tunel检测显示,与DMSO处理对照组相比,阿苯达唑处理组超过浓度大于等于0.5μm时凋亡细胞明显增加;Western blot示阿苯达唑诱导CSCC细胞凋亡且呈剂量依赖性。2.阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌的特异性作用使用正常的人表皮角质形成细胞进行对比试验显示,阿苯达唑剂量超过0.2μM时可诱导SCC13细胞凋亡,而在阿苯达唑剂量超过1.0μM仍未能诱导人表皮角质形成细胞凋亡。3.阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌细胞内质网应激的影响阿苯达唑增加了SCC12和SCC13细胞内质网应激诱导凋亡相关信号分子半胱天冬酶-4和半胱天冬酶-12水平。内质网应激抑制剂4-PBA预处理抑制了阿苯达唑诱导的CHOP和半胱天冬酶-12的活化。4.阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌细胞干细胞特性的影响阿苯达唑在无毒剂量0.05μM和0.1μM时能显着降低SCC12和SCC13细胞的克隆形成能力,导致TOPflash活性降低;这些数据一致,Western blot显示阿苯达唑处理使Wnt/β-连环蛋白明显减少。结论:阿苯达唑可诱导皮肤鳞状细胞癌细胞的凋亡;阿苯达唑诱导CSCC细胞凋亡具有特异性;阿苯达唑诱导CSCC细胞内质网应激;阿苯达唑能作用于Wnt/β-连环蛋白信号通路,降低CSCC的干细胞特性。
郑玲[2]（2020）在《加味丹玄口康对ANE诱导的口腔黏膜上皮细胞KLF4表达的影响》文中研究说明目的:本研究拟通过50μg/ml槟榔碱和低、高剂量加味丹玄口康干预大鼠口腔黏膜上皮细胞,模拟咀嚼槟榔时唾液中槟榔碱对上皮细胞的作用以及药物的干预,检测大鼠口腔黏膜上皮细胞中KLF4的表达,并通过观察记录上皮细胞株的生物学行为及相关基因β-catenin的变化,来阐明KLF4在OSF发生发展及癌变中所发挥的功能。方法:1.加味丹玄口康药物血清的制备:成年健康SD大鼠15只,随机分为3组:A:正常组、B:加味丹玄口康低剂量组、C:加味丹玄口康高剂量组。每组5只,分别以蒸馏水、加味丹玄口康4ml/kg、12ml/kg灌胃,2次/d,连续7d。无菌条件下颈动脉采血,配制成含10%大鼠血清的培养液备用。2.细胞培养传代:培养原代大鼠口腔黏膜上皮细胞。置于5%CO2、37℃培养箱中孵育,取对数生长期细胞进行实验。3.细胞干预分组:A组（NC组）:蒸馏水+10%正常大鼠血清+2%上皮细胞完全培养液;B组（ANE组）:50μg/ml ANE+10%正常大鼠血清+2%上皮细胞完全培养液;C组（LDM组）:50μg/ml ANE+10%低剂量加味丹玄口康药物血清+2%上皮细胞完全培养液;D组（HDM组）:50μg/ml ANE+10%高剂量加味丹玄口康药物血清+2%上皮细胞完全培养液。培养24h。4.指标检测:（1）显微镜下观察细胞形态变化及细胞密度;（2）Q-PCR技术检测KLF4、β-catenin的转录;（3）Western blot检测细胞KLF4、β-catenin蛋白的定量表达。结果:1.镜下观察:经槟榔碱干预后的B、C、D组,相对于正常血清组,细胞活力下降,密度降低,细胞形态改变,而含加味丹玄口康低、高剂量的C、D组,细胞活力、细胞密度较不含加味丹玄口康的B组均有改善,且变化与剂量呈相关性。2.Western blot结果:经槟榔碱干预后的B、C、D组,相对于正常血清组,KLF4表达降低,β-catenin表达增强。差异均有统计学意义。而含加味丹玄口康低、高剂量的C、D组相较不含加味丹玄口康的B组KLF4表达增强,β-catenin表达降低,差异均有统计学意义,且与剂量呈相关性。3.Q-PCR结果:经槟榔碱干预后的B、C、D组,相对于正常血清组,KLF4表达降低,β-catenin表达增强。差异均有统计学意义。而含加味丹玄口康低、高剂量的C、D组相较不含加味丹玄口康的B组KLF4表达增强,β-catenin表达降低,高剂量组与槟榔碱诱导组相比,差异有统计学意义。结论:1.50μg/ml槟榔碱作用于大鼠口腔黏膜上皮细胞,槟榔碱诱导组与正常血清组相比,槟榔碱诱导组KLF4表达降低;单位面积内细胞活力下降,细胞数目减少,细胞形态发生改变,细胞间间隙增大,出现异常核分裂象。2.加味丹玄口康能拮抗槟榔碱对于黏膜上皮细胞的细胞毒性,与槟榔碱诱导组相比,KLF4表达增强,细胞活力,增殖能力,细胞形态都得到改善。3.KLF4可能与口腔黏膜下纤维化及癌变相关,KLF4抑制Wnt/β-catenin信号通路的表达可能是加味丹玄口康抑制OSF癌变发生发展的机制之一。
韩昊特[3]（2021）在《PI3Kδ在PVR中的作用机制及视网膜病变治疗新途径研究》文中研究表明增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）是与视网膜牵拉和脱离相关的临床综合征。视网膜和玻璃体腔表面具有增殖潜能的细胞增殖和收缩是其形成的主要原因。目前多数情况下,可以实现与PVR相关的视网膜的外科手术复位,但视觉恢复效果仍较差。在多达10%的视网膜脱离患者中发现,一定程度的PVR尽管进行了复杂的手术,但大多数病人仍会视力低下。糖尿病性视网膜病变,特别是其增生阶段（增殖性糖尿病性视网膜病变,proliferative diabetic retinopathy,PDR）,与病理性血管生成有关,是导致失明的第二大原因。当前,PDR治疗方法通常使用VEGF抗体（兰尼单抗或贝伐单抗）或由融合至VEGF受体胞外域的抗体Fc片段组成的重组蛋白来中和玻璃体中的血管内皮生长因子。但在许多PDR患者中都观察到了耐药性,迫切需要新的治疗方法。本论文基于CRISPR-Cas9基因编辑技术研究PI3Kδ在PVR形成中的作用机制,探索PVR基因治疗新途径;并从天然单体化合物中筛选潜在的治疗视网膜病变（如PVR和PDR）的先导化合物或药物,为视网膜疾病的治疗提供新的治疗方法。本论文的主要研究内容和结果如下:（1）应用CRISPR-Cas9基因编辑技术研究磷酸肌醇3激酶δ（PI3Kδ）在玻璃体诱导的Akt/Mdm2/p53激活和视网膜色素上皮细胞迁移中的作用磷酸肌醇3激酶（PI3K）是脂质家族蛋白激酶,其在信号传递方面起关键作用。PI3Ks包括PI3Kα,PI3Kβ,P13Kγ和PI3Kδ。PI3K在实验性增殖性玻璃体视网膜病变中起重要作用,但是,PVR涉及何种PI3K亚型尚不清楚。本章研究表明,p110δ在视网膜色素上皮RPEs细胞中特异性高表达,为了阐明PI3K亚型在PVR形成中的分子机制,利用CRISPR-Cas9基因编辑技术构建p110δ敲减细胞系,并采用p110δ特异抑制剂Idelalisib用分子和药理学方法灭活p110δ,证明p110δ灭活可阻止玻璃体诱导的Akt/Mdm2/p53通路的激活以及在PVR形成中细胞固有的细胞应答,进而阐明了PI3K亚型在PVR形成中的分子机制。这些研究为RPE（如PVR）相关疾病的治疗提供了新的技术手段。（2）TGF-β2诱导的PI3Kδ信号转导环在PVR疾病中的作用在PVR的发展过程中,上皮间质转化（EMT）是细胞主要的应答反应,而转化生长因子（TGF）-β2是诱导EMT的关键因素。PI3K/Akt信号通路是实验性PVR的重要调节通路,而在玻璃体诱导的Akt激活中,PI3Kδ亚型起主要作用。本章研究表明,通过CRISPR/Cas9或药理学（Idelalisib抑制剂）方式使PI3Kδ失活,可有效阻断TGF-β2诱导的Akt激活以及EMT。Idelalisib对PI3Kδ的抑制作用还可以防止在小鼠中实验性诱导的PVR形成。进一步研究发现TGF-β2诱导PI3Kδ/Akt/Mdm2/NF-κB途径控制PI3K的催化亚基p110δ的表达,并产生正反馈回路,这一通路的发现为阐明PVR的发病机理奠定了基础。（3）Chalcomoracin预防玻璃体诱导的Akt活化和视网膜色素上皮细胞迁移为了寻找治疗视网膜病变新的药物或先导化合物,本章选用实验室从真菌感染的桑叶分离得到的天然单体化合物Chalcomoracin（CMR）,研究其抑制玻璃体诱导的信号转导通路和PVR固有的细胞反应。研究表明,CMR对ARPE-19细胞IC50在72小时为35.5μM,而5μM的CMR则可显着抑制玻璃体诱导的Akt激活和p53抑制。此外,还发现CMR能有效地阻断玻璃体刺激的ARPE-19细胞的增殖,迁移和收缩,表明CMR是一种潜在的PVR预防剂。（4）Capilliposide B在人原代视网膜微血管内皮细胞中阻断VEGF诱导的体外血管生成异常的血管生成与PDR的形成有关。本章探讨天然产物对PDR的治疗的可行性。Capilliposide B（CPS-B）是一种来源于细梗香草（Lysimachia capillipes Hemsl）的齐墩果三萜皂苷,可以抑制血管内皮生长因子诱导的血管生成信号通路和人视网膜微血管内皮细胞（HREC）在PDR中的细胞响应。研究表明,CPS-B对HREC细胞IC50在72小时为8.5μM,而1μM CPS-B则可特异性抑制VEGF诱导的VEGFR2及其下游信号转导酶Akt和Erk的活化。发现CPS-B有效地阻断了VEGF刺激的HREC增殖,迁移和管形成,表明CPS-B是一种潜在的血管新生相关疾病（如增殖性糖尿病性视网膜病）的预防剂。
龚海波[4]（2020）在《卡波西肉瘤病毒编码的miR-K12-3p生物学作用和机制研究》文中研究说明目的:目前认为,卡波西肉瘤相关病毒（KSHV）是导致卡波西肉瘤等肿瘤发生的关键病原体。KSHV在卡波西肉瘤等肿瘤发病中的作用和机制尚不明确。临床上我们发现,各个类型的卡波西肉瘤患者发病情况都是男性远远多于女性,其背后的机制不明。由于对于卡波西肉瘤来讲,目前没有一个可以信赖的细胞株可供研究,卡波西肉瘤目前认为是内皮细胞来源的肿瘤,研究KSHV致瘤作用可以用的模型是感染KSHV的内皮细胞。KSHV基因组编码25个成熟miRNA,这些miRNA的具体作用不明。因此,本研究旨在探索以下几个问题:（1）在感染KSHV方面是否存在性别偏好,即男性相较于女性在感染KSHV方面是否是个危险因素（2）内皮细胞感染KSHV后,会产生哪些差异表达基因（3）kshv-miR-k12-12-3p有多少可能的靶基因。（4）kshv-miR-k12-12-3p会对内皮细胞有什么样的生物学作用。（5）kshv-miR-k12-12-3p改变生物学表型背后的分子机制是什么。方法:（1）在PubMed、EMBASE、中国知网、万方等数据库检索并纳入全世界所有KSHV血清流行病学的文献,时间跨度从1994年1月到2019年11月采用Meta分析的方法,计算男性和女性在发病中的合并优势比（ORs）和95%置信区间（95%CI）。（2）从GEO数据库下载相关数据集,采用在线的工具得到差异表达基因,并对这些差异表达基因进行进一步的功能富集分析,关键基因模块分析。（3）采用2个在线的分析软件Target Scan Human Custom、miRDB预测kshv-miR-k12-12-3p靶基因,并对结果进行取交集获取共同的靶基因,并进一步对靶基因进行功能富集分析和关键基因模块的获取。（4）采用细胞生物学的手段和方法将kshv-miR-k12-12-3p转染进入脐静脉内皮细胞,观察其对内皮细胞的生物学作用。（5）采用RT-qPCR和Western blot的方法检测稳定转染kshv-miR-k12-12-3p的内皮细胞中相关生物标志物的改变。结果:（1）对全人群的meta分析结果表明男性女性的KSHV阳性率没有统计学差异（男vs.女,OR=1.07,95%CI:0.99-1.17,P=0.10）;对纳入的成人Meta分析结果显示男性发病情况较女性高（男vs.女,OR=1.11,95%CI:1.03-1.19,P=0.004）;纳入的儿童Meta分析结果显示男性儿童相较于女性儿童没有统计学差异（男vs.女,OR=0.87,95%CI:0.77-0.99,P=0.03）。（2）生物信息学分析共得到113个差异表达基因,其中有11个最关键基因。（3）生物信息学预测共得到kshvmiR-k12-12-3p的78个靶基因,其中有4个最关键基因。（4）划痕实验和血管生成实验可以观察到kshv-miR-k12-12-3p促进内皮细胞的迁移和血管生成。（5）RT-qPCR和Western blot的方法可以检测到关键基因的mRNA和蛋白的改变。结论:（1）在KSHV感染方面,存在一定程度的性别偏好,但尚不足以解释卡波西肉瘤发病男性远远多于女性的现象。（2）KSHV感染可以使内皮细胞产生差异表达的基因。（3）生物信息学预测可得到kshv-miR-k12-12-3p最可能的靶基因。（4）kshv-miR-k12-12-3p可以促进内皮细胞的迁移和血管生成。（5）kshv-miR-k12-12-3p可以通过影响NF-κB信号通路来实现对内皮细胞的迁移和血管生成的改变。
李平[5]（2018）在《HB-EGF在骨发育及骨代谢中的作用》文中研究说明肝素结合表皮生长因子HB-EGF属于EGF超家族,它可以在蛋白酶的作用下形成可溶性形式,通过自分泌或旁分泌作用发挥功能。有报道称关节炎病人样本及关节手术造模鼠中HB-EGF表达升高,EGFR信号通路被激活。HB-EGF还可以通过调控成骨细胞相关基因表达促进破骨细胞的形成。本课题在前人研究基础上,使用Cre/lox P技术,构建了间质干细胞（MSC）、软骨细胞、破骨细胞中特异性过表达或敲除HB-EGF的突变体小鼠,系统研究HB-EGF在骨骼系统中的作用及潜在机制。我们发现在Dermo1标记的MSC中特异性敲除HB-EGF时,敲除鼠骨骼大小和关节软骨均无异常,而骨量及骨密度都有一定程度上升。相反,Dermo1标记的MSC中过表达HB-EGF,小鼠骨量及骨密度均显着下降,骨形成明显减弱且骨矿化不足。组织学研究发现,实验鼠关节严重畸形,关节膨大,关节软骨退化,关节软骨下有内生软骨瘤样结构。进一步分析还发现,生长板软骨增殖增加,关节软骨纤维化显着提高,并且Dermo1-HB-EGF小鼠脊柱软骨板也有软骨瘤样表型。与此同时,本研究发现MSC中过表达HB-EGF的小鼠中,破骨细胞的数量及分化并未受到影响。为了更全面的说明HB-EGF对骨代谢的作用,我们构建了在Ly M标记的破骨祖细胞中过表达HB-EGF的小鼠。实验鼠骨骼大小和生长板软骨均无异常,骨量及骨密度均无变化。实验鼠骨髓细胞体外破骨分化能力没有差别,这说明自分泌及旁分泌的HB-EGF对成骨-破骨之间的偶联及破骨细胞自身的调控都没有作用。通过分子生物学研究发现,HB-EGF通过激活EGFR信号下游的Erk及Akt信号通路促进MSC的增殖。另外,HB-EGF通过抑制BMP信号通路下游Smad1/5/8信号抑制MSC分化。EGFR信号通路的抑制剂AG1478对过表达小鼠软骨异常表型具有良好的挽救作用。综上所述,本研究首次发现并详细的分析了HB-EGF在小鼠骨骼发育及骨代谢中的作用。研究结果表明HB-EGF在MSC中无论敲除和过表达都会对成年之后骨代谢平衡产生影响,MSC中敲除HB-EGF不影响软骨的正常发育,相反HB-EGF的过表达却对关节及生长板的发育造成严重破坏,导致软骨发育缺陷和关节炎的发生。以上研究结果拓展了我们对关节炎的发生及内生软骨瘤的产生的认识,也为临床提供了新的检测指标和治疗策略。
钱晓云[6]（2017）在《上皮间质转化（EMT）相关分子标记物在咽喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义》文中研究表明目的 探讨上皮钙黏蛋白（E-cadherin,ECD）的表达在喉癌中的预后价值。方法 在临床研究中,共有79例接受手术的喉癌患者纳入本研究,通过免疫组织化学染色检测喉癌组织中ECD的表达及其与临床病理因素的关系。在体外研究中,培养ECD上调细胞（Ad-ECD）和ECD下调细胞（sh-ECD）,并采用流式细胞术检测细胞凋亡。在体内研究中,在裸鼠皮下注射Ad-ECD,sh-ECD和Hep-2细胞,测量肿瘤体积并检测脑,肝,肺组织的ECD表达和肿瘤转移情况。结果 临床资料显示,ECD的表达与喉癌患者的生存率有关（p<0.05）,ECD阴性的患者生存率明显低于阳性患者,但其与年龄,性别,淋巴结转移和TNM分期等临床病理特征无显着相关。体外研究中,ECD在sh-ECD细胞中下调,并显着降低Hep-2细胞的凋亡。体内研究中,Ad-ECD组肿瘤生长显着抑制。除肿瘤组织外,脑组织,肝组织和肺组织均未发现明显肿瘤细胞。结论 ECD在喉癌中的下调可能与浸润性肿瘤生长有关,导致预后不良。然而,ECD表达与肿瘤转移无明显相关性。目的 筛选并分析喉癌与癌旁正常组织之间的mRNA表达谱差异,为进一步研究上皮间质转化（EMT）相关基因与喉癌侵袭转移及预后的关系提供线索。方法 收集新鲜冰冻的喉癌组织和癌旁正常喉黏膜标本共6对,采用晶芯mRNA人V4.0表达谱芯片检测,以待检测样品的总RNA为起始,进行体外扩增和荧光标记,标记过程采用晶芯生物芯片通用标记试剂盒。使用Agilent Feature Extraction（vl0.7）软件对杂交图片进行分析并提取数据。然后使用Agilent GeneSpring软件对数据进行归一化和差异分析,计算基因表达差异和统计学显着性P值。当两组样本中mRNA表达差异倍数≥2,且p≤0.05时,定义为差异基因。结果 通过mRNA芯片筛选,我们得到了2253个差异表达的mRNA,其中1014个mRNA表达上调,1149个mRNA表达下调。采用KEGG PATHWAY、PID、Biocarta、Reactome、BioCyc、PANTHER、GO等数据库对差异表达的mRNA进行进一步生物信息学分析,发现与差异表达相关性最高的是细胞外基质相关的信号通路。对基因芯片中与EMT信号通路相关的基因LAMC2（laminin gamma 2）、P-cadherin、ZEB2（zinc finger E-box binding homeobox 2）、E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、Vimentin、Fibronectin进行进一步分析,结果表明仅LAMC2、P-cadherin为差异基因。结论 1.基因芯片技术筛选喉癌特征性mRNA表达谱及EMT相关基因是可行的。2.LAMC2、P-cadherin有可能成为喉癌EMT相关的新的特征性分子标记物。目的 研究EMT相关分子标记物E-cadherin、N-cadherin、P-cadherin、β-catenin、LAMC2（laminin gamma 2）、ZEB2（zinc finger E-box binding homeobox 2）、在咽喉鳞状上皮癌及癌旁组织中的表达及其临床意义。方法 收集南京大学医学院附属鼓楼医院耳鼻咽喉头颈外科2007年3月至2013年11月住院治疗并有完整随访资料的原发喉和下咽鳞状细胞癌患者72例,采用免疫组化的方法检测72对咽喉癌及癌旁组织中对LAMC2、P-cadherin、ZEB2（zinc finger E-box binding homeobox 2）、E-cadherin、N-cadherin、β-catenin的蛋白表达水平并分析其与临床病理因素和预后的关系。结果1.在咽喉癌及癌旁正常组织中LAMC2、P-cadherin、ZEB2、E-cadherin、N-cadherin、β-catenin的表达差异均有统计学意义（P<0.05）。2.咽喉癌中LAMC2与T分期相关（P<0.05）;P-cadherin与各临床病理特征均无显着相关性;ZEB2与病理分期、淋巴结转移、分化程度相关（P<0.05）;E-cadherin与病理分期和淋巴结转移相关（P<0.05）;N-cadherin与T分期、病理分期、分化程度相关（P<0.05）;β-catenin与病理分期、淋巴结转移、分化程度相关（P<0.05）。3.单因素生存分析:LAMC2、P-cadherin与预后无相关性;但二者分别与ZEB2、E-cadherin、N-cadherin和β-catenin的联合表达情况与预后均有明显相关性（P<0.05）。4.单因素生存分析:ZEB2、E-cadherin、N-cadherin、β-catenin的表达与预后相关（P<0.05）;采用COX回归多变量生存分析,病理分期、ZEB2、N-cadherin、β-catenin均可以作为咽喉癌的独立预后指标;结论 EMT相关蛋白在咽喉鳞状细胞癌和癌旁组织中差异表达。EMT介导肿瘤进展,降低咽喉癌的生存率。LAMC2、P-cadherin与其他因子的联合表达与预后有明显相关。病理分期、ZEB2、N-cadherin、β-catenin均可作为咽喉癌的独立预测因子。
王丽[7]（2016）在《乳腺微浸润性癌临床病理特征和导管内癌浸润机制的研究》文中研究说明目的探讨乳腺微浸润性癌和导管内癌（ductal carcinoma in situ,DCIS）的临床病理特征、分子分型及预后情况。研究上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）和肌上皮表型改变是否参与导管内癌进展到浸润性乳腺癌的进程。方法收集131例乳腺微浸润性癌和451例导管内癌。通过免疫组化检测ER、PR、HER2和Ki67。对微浸润性癌进行临床病理特征的评估,如临床表现,病理特征,分子亚型和临床预后结果,并与导管内癌作比较。以导管内癌和浸润性癌为研究对象,通过免疫组化检测EMT标记物及肌上皮细胞标记物的表达情况。使用TGF-β1诱导乳腺腺上皮表型细胞MCF-7发生EMT,并建立肌上皮表型细胞MDA-MB-231与MCF-7的共培养体系。观察细胞形态学变化,通过QRT-PCR和Western blot检测EMT相关标记物的表达水平,MTT法检测细胞增殖能力的改变,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力的变化,通过ELISA法检测TGF-β1对共培养上清液MMP-9和IL-6分泌量的影响。结果1、比较乳腺微浸润性癌和导管内癌的临床病理特征,在肿瘤直径、淋巴结转移方面微浸润性癌高于导管内癌;而在年龄、绝经状况、家族史、分子分型方面,两者差异无统计学意义。比较不同分子分型乳腺微浸润性癌与临床病理特征,Her-2过表达型和TNBCs在组织学级别方面较高;而在年龄、肿瘤直径、淋巴结转移、绝经状况、家族史方面,不同分子分型之间差异无统计学意义。比较不同分子分型导管内癌与临床病理特征,Her-2过表达型和TNBCs在年龄、肿瘤直径、核级别方面较高;而在淋巴结转移、家族史方面,不同分子分型之间差异无统计学意义。2、随访时间自治疗时间起,中位随访时间分别为69和62个月。乳腺微浸润性癌和导管内癌的5年总生存率分别为99.0%和99.2%,微浸润性癌与导管内癌的OS差异无统计学意义。乳腺微浸润性癌和导管内癌的5年无病生存率分别为95.2%和95.9%,微浸润性癌和导管内癌的DFS差异无统计学意义。3、以正常乳腺组织、导管内癌和浸润性癌为研究对象,通过免疫组化检测EMT标记物的表达情况。E-cadherin在正常组织表达较高,在导管内癌组及IDC组表达降低。N-cadherin、Snail、Vimentin、Twist和Zeb1在正常组织中不表达,在导管内癌组及IDC组表达明显增高,差异有统计学意义。4、以正常乳腺组织、导管内癌和浸润性癌为研究对象,通过免疫组化检测肌上皮细胞标记物的表达情况。SMA、p63、Calponin蛋白表达在正常组织和导管内癌中呈阳性表达,在浸润性癌几乎不着色。5、TGF-β1刺激MCF-7细胞诱导发生EMT,部分处理组细胞较对照组发生形态学变化。通过QRT-PCR检测TGF-β1刺激MCF-7后EMT相关标记物mRNA的表达水平,处理组较对照组E-cadherin下调,Vimentin、N-cadherin上调。通过Western blot检测TGF-β1刺激MCF-7后EMT相关标记物蛋白的表达水平,处理组较对照组E-cadherin下调,Vimentin、N-cadherin上调。MTT法发现处理组较对照组细胞增殖没有差异。划痕实验检测TGF-β1刺激MCF-7后,处理组较对照组细胞迁移明显增加。6、TGF-βl影响共培养体系下MDA-MB-231的形态学发生变化。TGF-βl对共培养体系下MDA-MB-231的增殖能力没有影响。TGF-βl增强共培养条件下MDA-MB-231的迁移和侵袭能力。TGF-βl提高共培养条件下MDA-MB-231分泌MMP-9和IL-6的含量。结论总之,乳腺微浸润性癌与导管内癌在临床病理特征及预后方面相似。相比于导管内癌,浸润性癌中间质标记物表达增多、E-cadherin表达缺失和肌上皮表型标记物表达下降。通过TGF-β1的刺激,可以有效促进乳腺癌腺上皮表型细胞的侵袭和迁移能力,也促进乳腺癌肌上皮表型细胞的侵袭和迁移能力。表明EMT和肌上皮表型改变可能参与导管内癌进展到浸润性乳腺癌的进程。
徐源[8]（2016）在《上皮间质转化标志物E-cadherin及Vimentin在乳腺分叶状肿瘤中的表达及意义》文中研究说明目的:通过观察不同类型乳腺分叶状肿瘤（phyllodes tumours of breast,PTB）（良性、交界性、恶性）及纤维腺瘤中E-钙粘蛋白（E-cadherin）及波形蛋白（vimentin）的表达情况,探讨乳腺分叶状肿瘤的发病机制是否涉及到上皮间质转化,以及良性分叶状肿瘤与纤维腺瘤的区别与联系。方法:选取2005-2015年西南医科大学附属医院病理科乳腺分叶状肿瘤石蜡包埋标本67例,选取其中病历资料完整标本共50例,患者术前完善相关辅查:彩超、乳腺钼靶、粗针穿刺,未进行任何药物治疗、放疗、化疗等,均一期手术切除,术后病检按照WHO病理核分裂诊断指标分型为:良性、交界性、恶性分叶状肿瘤。同时根据肿瘤体积大小、有无复发、发病年龄另随机选取乳腺纤维腺瘤石蜡包埋标本30例作对照。共分为4组:A组（良性PTB）30例,B组（交界性PTB）12例,C组（恶性PTB）8例,D组（乳腺纤维腺瘤）30例。首先通过苏木素-伊红（HE）染色的方法观察各组组织学差异,用免疫组化方法检测上皮间质转化相关的重要分子标志物上皮标志物（E-cadherin）和间质标志物波形蛋白（vimentin）的表达情况,并根据文献记录的普遍分类标准分别按照细胞着色程度和在高倍显微镜（×400）下随机选取10个视野进行细胞阳性率评分。分别对免疫组织结果进行平均积分光密度值（IOD）的检测,来判断各组蛋白在细胞内表达情况,以明确其在细胞内上皮成分和间质成分中表达的高、低,有、无等,记录结果并做半定量分析,分析上皮间质转化标志物E-cadherin及vimentin在不同类型分叶状肿瘤中的表达情况,推断该肿瘤的发生发展中是否涉及到上皮间质转化,以及在恶性分叶状肿瘤中上皮间质转化过程是否会进一步加剧。结果:（1）HE染色:良性PTB镜下可见组织呈明显的分叶状结构,裂隙结构明显,腺管及间质排列较紊乱,腺体与间质比例失调,不均一,间质过度生长,增生程度大于纤维腺瘤,细胞出现异型性,但异型性不明显,可见较少核分裂象。乳腺纤维腺瘤镜下见增生的纤维间质和腺体上皮成分,间质较疏松,出现大量成纤维细胞和粘液样基质,但增生程度较分叶状肿瘤低。恶性PTB镜下见间质呈过生长,核分裂>10/10HPE,细胞异型性显着,边缘与周围正常组织浸润界限不清。交界性PTB镜下见间质细胞较为适中分布,增生明显,程度介于良恶性之间,细胞异型中度,核分裂5—9/10HPE;细胞分布较为不一致,无坏死部分,与周围组织界限部分较清,部分不清。（2）免疫组化结果:在良性PTB、交界性PTB、恶性PTB和乳腺纤维腺瘤中均有E-cadherin和vimentin阳性表达,四组实验组中:E-cadherin在良性PTB及纤维腺瘤中呈明显阳性表达,积分光密度值（IOD）分别在良性PTB为252413±402,纤维腺瘤为298100±456,两者相比差异无统计学意义（P>0.05）;随着肿瘤恶性程度加重,阳性表达明显减少,IOD值在交界性PTB为158950±285,恶性PTB为92157±197,与良性PTB及纤维腺瘤相比,差异具有明显统计学意义（P<0.05）。vimentin在良性PTB及纤维腺瘤中棕黄色阳性表达较弱,IOD在良性PTB为78314±308,纤维腺瘤81340±456,两者的差异无统计学意义（P>0.05）;随着肿瘤恶性程度加重,阳性表达范围及程度均明显加重,IOD值在交界性PTB为149505±785,在恶性PTB为291557±317,与良性PTB及纤维腺瘤相比差异具有明显统计学意义（P<0.05）。各指标数据均以均数±标准差（sx±）表示。结果表明E-cadherin和vimentin在不同类别分叶状肿瘤中的表达有统计学意义,其二者作为上皮间质转化过程的重要分子标志物,表明该肿瘤发生过程可能与不同程度的上皮间质转化过程有关联。纤维腺瘤与良性分叶状肿瘤之间该两种蛋白的表达无统计学意义,说明该两种肿瘤在发病过程及发病机制上可能具有相关性。结论:1.在良性、交界性、恶性PTB中E-cadherin表达依次降低,而vimentin表达依次升高,表明分叶状肿瘤的发生机制有可能涉及上皮间质转化过程,且在恶性PTB中EMT程度增加。2.乳腺纤维腺瘤的病理特点与良性PTB极为相似,其两者的发病过程及机制可能具有相关性,即纤维腺瘤有可能是分叶状肿瘤的病因来源之一,为早期预防提供依据。
仲林[9]（2014）在《P53、E-cadherin、TGFβ1蛋白表达与早期肺腺癌浸润的相关性研究》文中研究指明目的：本篇文章旨在研究P53、E-cadherin和TGFβ1蛋白在肺腺癌，尤其是以附壁生长方式为主肺腺癌表达情况，附壁生长形态包括：非典型腺瘤、原位腺癌、微浸润癌、以附壁生长为主型腺癌。并评估了三个指标的不同表达和其病理形态的相关性。材料与方法：我们选取2012年9月至2013年12月期间于大连医科大学附属第一医院413例行肺部肿瘤切除标本，其中病理诊断为肺腺癌和非典型腺瘤样增生的标本共320例，然后根据2011年肺腺癌新的IASLC/ATS/ERS classification系统分类标准（20），从中选取诊断非典型腺瘤样增生（AAH，病灶≤0.5cm BAC），原位腺癌（AIS，原来≤3cm的BAC），微浸润性腺癌（MIA，≤3cm以附壁样生长方式为主且浸润灶≤5mm的小腺癌），附壁生长为主型的浸润性腺癌（LPA，原来的非粘液性BAC，浸润灶>5mm）并且临床病理资料完整的手术病例97例，将97例标本划分为4组:AAH，AIS，MIA，LPA,用免疫组织化学的方法检测了P53、E-cadherin和TGFβ1在四组肿瘤中的表达情况。结果：根据2011年肺癌新的IASLC/ATS/ERS classification系统分类，97例标本被分成：33AIS，22例MIA，26例LPA和16例AAH。我们发现患者年龄越大，病理学分级越高，但相关性不明显；女性多发于男性，且差异性明显；肺左上叶和右上叶好发。肿瘤大小与组织病理学分级成正相关，肿瘤大小越大，组织病理学级别越高。P53蛋白在全部肺附壁生长为主形态的浸润性成分中表达高于非浸润性成分（60%vs.34%,p=0.011），在附壁生长为主型腺癌中，其非浸润成分p53蛋白表达要高于其余附壁生长类型（AAH、AIS、MIA）（50%vs.31%，28%，23%，p<0.022）。TGFβ1在全部肺附壁生长为主形态的浸润性成分中表达高于非浸润性成分（85%vs.55%,p=0.019），TGFβ1在非浸润成分中染色强度为（+++）强阳性时多数为MIA或LPA。E-cadherin的表达在全部肺附壁生长为主形态的浸润性成分中表达低于非浸润性成分（58%vs.66%, p=0.078），但在MIA和LPA组中，E-cadherin的表达在该组浸润性成分中表达明显低于非浸润性成分（58%vs.81%,p=0.024）。E-cadherin染色强度在非浸润成分中多以（+++）强阳性为主，在浸润成分中很少出现E-cadherin（+++）强阳性表达。在AAH和AIS中，E-cadherin的表达低于MIA中非浸润附壁生长成分，而且LPA中非浸润成分E-cadherin的表达同样低于MIA中非浸润成分；TGFβ1和E-cadherin的表达在非浸润成分中呈负相关（p=0.013）。更重要的是，附壁生长为主型腺癌和微浸润癌中非浸润成分TGFβ1表达明显高于原位腺癌和非典型腺瘤（69%，64%vs.46%,25%, p<0.034）。结论：1.随着早期肺腺癌病变程度的增加，病灶增大，与病变程度成正相关，女性多发。2.TGFβ1表达随着病变程度的增加而增加，在发生浸润时表达明显增加，说明TGFβ1与肿瘤的进展和浸润呈正相关。3.E-cadherin的表达随着病变程度的增加而减少，在浸润成分中表达明显减少，说明E-cadherin与肿瘤的进展和浸润呈负相关。E-cadherin的表达减弱是由TGFβ1表达上调引起。4.LPA中非浸润成分p53表达明显高于AIS、AAH和MIA的非浸润成分，LPA的p53突变率明显增加，提示p53突变是肺腺癌进展中的二次基因突变，这一现象尚有待进一步研究和证实。5.TGFβ1蛋白上调发生在肿瘤浸润形态学变化之前，检测TGFβ1蛋白表达有助于评估小活检组织中呈现附壁生长形态的肺腺癌生物学侵袭风险。
严慧[10]（2013）在《化疗药物诱导胃癌SGC7901细胞向肿瘤干细胞转化的EMT机制研究》文中研究指明【背景】胃癌是世界上第四高发的肿瘤,在每年因癌症死亡的100万人口中,胃癌致死率位列第二。近年来的研究阐明了肿瘤干细胞（cancer stem cell,CSC）的存在，CSC具有再生肿瘤及自我更新和分化的特殊能力，与组织干细胞具有很多相似的特性，其与肿瘤发生、复发和转移有着重要关系。近些年的研究发现在胃癌细胞中存在有胃癌干细胞。但是由于缺乏特异性标志，不了解调节胃干细胞增殖分化的分子通路，目前还没有理想的分离纯化出人类胃干细胞的技术及其具体作用机制目前尚不完全明确。上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）赋予上皮细胞间质特征，与肿瘤细胞获取侵犯特征密切相关，是上皮细胞来源肿瘤局部浸润和远处转移的一个重要途径。EMT发生及调控机制对于寻找恶性肿瘤浸润转移的靶点，进行临床干预有重要意义。这种转分化现象同时会伴有干细胞样特性，这说明有一部分不具有分化能力的肿瘤细胞可以通过EMT逆分化为肿瘤干细胞。然而在胃癌中，胃癌干细胞是否能通过EMT对胃癌发生、转移及多药耐药性起关键作用，其中的具体机制尚不清楚，这些问题的研究对我们揭示胃癌干细胞的来源，明确胃癌发生、转移、多药耐药的机制以及胃癌的潜在治疗靶点有着重要意义。【目的】1．通过化疗药物诱导再经无血清培养法分离鉴定胃癌干样细胞。2．研究EMT在胃癌细胞向胃癌干样细胞转化过程中的作用及其分子机制。【方法】1．胃癌干样细胞的培养及鉴定长春新碱体外诱导胃癌SGC7901细胞72小时后无血清培养法分离胃癌干样细胞。对成功分离出的胃癌干样细胞的干细胞特性进行鉴定，包括干细胞表面标记物SOX2、OCT4a、OCT4b，BMI-1检测，通过Matrigel细胞群落外观区分实验及透射电镜观察胃癌干样细胞的分化能力，通过PKH-26标记细胞，观察其增殖、分化情况。通过药物敏感试验和体外成瘤实验验证肿瘤干样细胞耐药性及成瘤能力。2．EMT在胃癌细胞向胃癌干样细胞转化过程中的作用研究通过实时定量PCR技术分别在蛋白水平和mRNA水平检测胃癌干样细胞中间质标志物Snail、Twist、Vimentin和上皮细胞标志物E-cadherin表达改变。构建Twist重组质粒，转染SGC7901细胞，筛选获得稳定转染株，Western-Blot证实载体的有效性。通过诱导稳定高表答Twist的SGC7901细胞获得新的高表达Twist的肿瘤干样细胞，比较其与化疗药物诱导而来的胃癌干样细胞的干细胞标志物的表达、克隆形成能力、EMT表型、耐药性是否一致。3．用ITRAQ技术高通量筛选参与胃癌细胞向胃癌干样细胞转化过程的分子靶点。【结果】1．成功培养并鉴定胃癌干样细胞长春新碱体外诱导胃癌SGC7901细胞并通过无血清培养法成功分离胃癌干样细胞。Western Blot实验显示肿瘤干样细胞较亲本细胞SGC7901其干细胞表面标记物SOX2、OCT4a、OCT4b、BMI-1表达明显升高。用matrigel细胞群落外观区分实验观察到肿瘤干样细胞可以形成二维的管样结构及三维的管腔样结构，其与胃隐窝的分化形式十分相似，通过透射电镜也可观察到的胃癌干样细胞出现干细胞特征。使用PKH-26标记细胞，可以观察到肿瘤干样细胞具有明显的不对称分裂能力。平板克隆实验证明胃癌干样细胞较其亲本细胞有更强的克隆形成能力。药物敏感性实验和异种移植实验证明这种细胞具有多药耐药性和显着地体内致瘤性。.2．EMT参与胃癌细胞向胃癌干样细胞的转化实时定量PCR实验显示肿瘤干样细胞与亲本细胞SGC7901相比，其间质标志物Snail、Twist、Vimentin表达增强，上皮细胞标志物E-cadherin表达降低。成功构建Twist重组质粒，并通过质粒转染技术获得稳定的Twist高表达的胃癌干样细胞系CSLCsTwist+，实时定量PCR显示CSLCsTwist+较亲本细胞SGC7901高表达间质标志物Snail、Twist、Vimentin，而上皮细胞标志物E-cadherin表达降低，其耐药性，克隆形成能力及干细胞标志物SOX2、OCT4、BMI-1表达均明显增强，结果与化疗药物诱导而来的胃癌干样细胞特征一致。3．用iTRAQ高通量技术筛选出了一批胃癌细胞向胃癌干样细胞转化过程中的差异蛋白【结论】在胃癌SGC7901细胞系中成功用化疗药物诱导获得胃癌干样细胞，此肿瘤干细胞具有明显的自我更新、分化、抵抗化疗药物及高成瘤性。EMT参与胃癌细胞向胃癌干样细胞的转化，具有EMT表型的胃癌细胞有干细胞样特性，胃癌细胞可能通过EMT逆分化为胃癌干样细胞。
二、假性上皮瘤样增生病变中上皮-间质连接区基底膜相关成分缺失机制的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、假性上皮瘤样增生病变中上皮-间质连接区基底膜相关成分缺失机制的研究（论文提纲范文）
（1）NQO1基因及阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌增殖、凋亡、侵袭迁移的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词 |
| 第1章 绪论 |
| 第2章 文献综述 |
| 2.1 流行性学 |
| 2.2 病因及发病机制 |
| 2.2.1 紫外线 |
| 2.2.2 乳头瘤病毒感染 |
| 2.2.3 机体免疫状态 |
| 2.2.4 化学致癌物 |
| 2.2.5 基因突变 |
| 2.2.6 家族史 |
| 2.2.7 其他相关皮肤病 |
| 2.2.8 其他因素 |
| 2.3 治疗 |
| 2.3.1 手术治疗 |
| 2.3.2 激光治疗和冷冻治疗 |
| 2.3.3 靶向治疗 |
| 2.3.4 放射治疗 |
| 2.3.5 基因治疗 |
| 2.3.6 光动力疗法 |
| 2.3.7 其他疗法 |
| 2.4 随访 |
| 2.5 小结 |
| 第3章 NQO1 对皮肤鳞状细胞癌增殖、侵袭转移的影响及机制研究 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 组织标本及细胞 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要试剂盒 |
| 3.1.4 主要仪器 |
| 3.1.5 实验方法 |
| 3.1.6 统计学分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 NQO1 在皮肤鳞状细胞癌内的表达水平 |
| 3.2.2 NQO1 对细胞增殖和平板克隆形成活性的影响 |
| 3.2.3 NQO1 对细胞增殖相关分子水平的影响 |
| 3.2.4 NQO1 对侵袭和迁移的影响 |
| 3.2.5 NQO1对EMT相关细胞内信号分子的影响 |
| 3.2.6 NQO1对SCC细胞内ROS水平的影响 |
| 3.2.7 NQO1 抑制剂双香豆素对细胞增殖和克隆形成的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌的抗肿瘤作用及机制研究 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 组织标本及细胞 |
| 4.1.2 主要试剂 |
| 4.1.3 主要试剂盒 |
| 4.1.4 主要实验仪器 |
| 4.1.5 实验方法 |
| 4.1.6 统计学分析 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 阿苯达唑的结构 |
| 4.2.2 阿苯达唑对鳞状细胞癌细胞系的细胞毒作用 |
| 4.2.3 阿苯达唑诱导SCC12和SCC13 细胞凋亡 |
| 4.2.4 阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌的特异性作用 |
| 4.2.5 阿苯达唑诱导CSCC的凋亡与内质网应激有关 |
| 4.2.6 阿苯达唑和内质网应激诱导剂衣霉素对CSCC影响 |
| 4.2.7 阿苯达唑对CSCC和角质形成细胞内质网应激的影响 |
| 4.2.8 阿苯达唑对肿瘤干细胞特性的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第5章 结论 |
| 全文总结及创新点 |
| 参考文献 |
| 在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（2）加味丹玄口康对ANE诱导的口腔黏膜上皮细胞KLF4表达的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 缩略词 |
| 引言 |
| 第一部分 材料与方法 |
| 1 研究材料 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 细胞 |
| 1.3 实验药物 |
| 1.4 主要仪器和实验试剂 |
| 2 实验方法和步骤 |
| 2.1 药物血清及细胞培养基制备 |
| 2.2 口腔黏膜上皮细胞的培养、传代、分组干预 |
| 3 指标检测 |
| 3.1 Q-PCR技术检测KLF4、β-catenin的转录 |
| 3.2 Western blot检测KLF4、β-catenin的蛋白的表达 |
| 4 统计分析 |
| 第二部分 结果分析 |
| 1 口腔黏膜上皮细胞形态及鉴定 |
| 1.1 口腔黏膜上皮细胞形态 |
| 1.2 口腔黏膜上皮细胞的鉴定 |
| 2 口腔黏膜上皮细胞形态、细胞增殖能力变化 |
| 2.1 槟榔碱对上皮细胞形态的影响 |
| 2.2 不同剂量加味丹玄口康作用于槟榔碱诱导后上皮细胞活力 |
| 3 口腔黏膜上皮中KLF4、β-catenin的表达 |
| 3.1 Q-PCR技术在m RNA水平检测KLF4、β-catenin的表达 |
| 3.2 Western blot检测蛋白水平KLF4、β-catenin的表达 |
| 第三部分 讨论 |
| 1 口腔黏膜下纤维化(OSF)及癌变研究现状 |
| 1.1 口腔黏膜下纤维化及癌变的机制 |
| 1.2 口腔黏膜下纤维化及癌变的中医诊治 |
| 2 KLF4与口腔黏膜下纤维化癌变 |
| 3 不足之处 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 KLF4与口腔鳞状细胞癌的相关性研究 |
| 参考文献 |
（3）PI3Kδ在PVR中的作用机制及视网膜病变治疗新途径研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩写表 |
| 1 绪论 |
| 1.1 PVR和 PDR简介 |
| 1.1.1 增殖性玻璃体视网膜病变(PVR) |
| 1.1.2 增殖性糖尿病型视网膜病变(PDR) |
| 1.1.3 PVR和 PDR临床治疗策略 |
| 1.2 CRISPR-Cas9 基因编辑技术 |
| 1.2.1 CRISPR-Cas9 作用原理 |
| 1.2.2 CRISPR-Cas9 在基因治疗中的应用 |
| 1.3 上皮间充质转化(EMT) |
| 1.3.1 EMT发生过程 |
| 1.3.2 EMT调控网络 |
| 1.3.3 EMT在眼科疾病中的信号调控 |
| 1.4 Capilliposide B和 Chalcomoracin天然化合物简介 |
| 1.5 本文的研究内容与意义 |
| 2 磷酸肌醇3 激酶δ在PVR模型中调控视网膜色素上皮细胞增殖迁移的作用机制研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与方法 |
| 2.2.1 材料和实验试剂 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.2.3 细胞培养 |
| 2.2.4 SgRNA设计与目标基因载体克隆 |
| 2.2.5 慢病毒的包装 |
| 2.2.6 p110δ的重新表达 |
| 2.2.7 Western Blotting |
| 2.2.8 免疫荧光 |
| 2.2.9 MTT法 |
| 2.2.10 细胞增殖试验 |
| 2.2.11 细胞迁移试验 |
| 2.2.12 胶原收缩试验 |
| 2.2.13 统计分析 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 PI3Kδ在 RPE中高度表达 |
| 2.3.2 CRIS PR/Cas9 建立p110δ敲减细胞系 |
| 2.3.3 P110δ敲减可减轻玻璃体诱导的AKT和 MDM2 的激活以及p53 的抑制 |
| 2.3.4 P110δ的再表达恢复了玻璃体诱导的AKT和 MDM2 的激活和p53 的减少 |
| 2.3.5 PI3Kδ的化学抑制有效地阻止了玻璃体诱导的Akt和 Mdm2 的激活和 p53 的减少 |
| 2.3.6 PI3Kδ失活可防止玻璃体刺激的RPEs增殖 |
| 2.3.7 PI3Kδ的失活阻碍了玻璃体诱导的RPEs的迁移 |
| 2.3.8 PI3Kδ失活可消除玻璃体引起的RPE收缩 |
| 2.4 小结与讨论 |
| 3 基于CRISPR-Cas9基因编辑技术研究PI3Kδ信号转导环在PVR疾病中的关键作用 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与方法 |
| 3.2.1 材料和实验试剂 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.2.3 细胞培养 |
| 3.2.4 DNA的构建 |
| 3.2.5 慢病毒包装 |
| 3.2.6 Western blotting |
| 3.2.7 免疫荧光检测 |
| 3.2.8 细胞迁移实验 |
| 3.2.9 荧光素酶测定-PI3Kδ报告基因 |
| 3.2.10 实验性PVR模型建立 |
| 3.2.11 统计分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 PI3Kδ失活阻止TGF-β2 诱导的Akt激活和 Mdm2和NF-κB/p65 的蛋白表达 |
| 3.3.2 PI3Kδ失活可防止TGF-β2诱导的EMT |
| 3.3.3 阻断Mdm2 可抑制TGF-β2 诱导的Akt激活,p110δ和NF-κB/p65 的表达和细胞EMT |
| 3.3.4 NF-κB/p65 的消耗减弱了TGF-β2 诱导的Akt激活,p110δ和 Mdm2 的表达以及抑制EMT |
| 3.3.5 PI3Kδ的失活阻止了TGF-β2 诱导的ARPE-19 细胞迁移 |
| 3.3.6 抑制PI3Kδ可防止实验性PVR |
| 3.4 小结与讨论 |
| 4 Chalcomoracin在预防治疗PVR疾病中的作用 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与方法 |
| 4.2.1 材料与实验试剂 |
| 4.2.2 实验仪器 |
| 4.2.3 细胞培养 |
| 4.2.4 Western blotting |
| 4.2.5 细胞活力测定 |
| 4.2.6 形态学观察 |
| 4.2.7 细胞增殖测定 |
| 4.2.8 细胞迁移测定 |
| 4.2.9 胶原蛋白收缩测定 |
| 4.2.10 统计分析 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 玻璃体诱导ARPE-19 细胞中AKT的活化并抑制p53 的表达 |
| 4.3.2 CMR可阻止玻璃体诱导的AKT激活和p53 的降低 |
| 4.3.3 CMR预防玻璃体引起的ARPE-19 增殖 |
| 4.3.4 CMR阻断玻璃体诱导的ARPE-19 迁移 |
| 4.3.5 CMR阻滞玻璃体引起的ARPE-19 收缩 |
| 4.4 小结与讨论 |
| 5 Capilliposide B在预防治疗PDR疾病中的作用 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料与方法 |
| 5.2.1 材料与实验试剂 |
| 5.2.2 实验仪器 |
| 5.2.3 细胞培养 |
| 5.2.4 免疫荧光 |
| 5.2.5 Western blot |
| 5.2.6 细胞活力测定 |
| 5.2.7 形态学观察 |
| 5.2.8 细胞迁移测定 |
| 5.2.9 Tube formation实验 |
| 5.2.10 统计分析 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.3.1 CPS-B阻止VEGF诱导的VEGFR2 信号转导 |
| 5.3.2 CPS-B可阻止VEGF诱导的HREC增殖 |
| 5.3.3 CPS-B阻断VEGF诱导的HREC迁移 |
| 5.3.4 CPS-B阻断VEGF诱导的HRECs管形成 |
| 5.4 小结与讨论 |
| 6 全文总结 |
| 6.1 总结 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 不足之处与展望 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（4）卡波西肉瘤病毒编码的miR-K12-3p生物学作用和机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 卡波西肉瘤病毒(KSHV)血清阳性率与性别因素的meta分析 |
| 1.研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.3 质量控制 |
| 1.4 统计方法 |
| 2.结果 |
| 2.1 纳入研究的筛选过程和基本情况 |
| 2.2 Meta分析的结果 |
| 3.讨论 |
| 4.小结 |
| 第二部分 基于KSHV感染内皮细胞芯片数据的生物信息学分析 |
| 1.研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 差异表达基因的筛选 |
| 1.3 差异表达基因的GO和 KEGG信号通路富集分析 |
| 1.4 蛋白互作网络构建和关键基因网络的获取 |
| 1.5 关键基因的注释和数据库信息挖掘 |
| 2.结果 |
| 2.1 KSHV感染内皮细胞差异表达基因的筛选 |
| 2.2 差异表达基因的GO和 KEGG富集分析 |
| 2.3 蛋白互作网络的构建和关键基因的分析 |
| 3.讨论 |
| 4.小结 |
| 第三部分 kshv-miR-k12-12-3p靶基因预测及其相关信号通路的生物信息学分析 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 4.小结 |
| 第四部分 kshv-miR-k12-12-3p促进内皮细胞的迁移和血管生成 |
| 1.研究内容和方法 |
| 1.1 原代脐静脉内皮细胞的提取与鉴定 |
| 1.2 内容与方法 |
| 1.3 质量控制 |
| 1.4 统计方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 4.小结 |
| 第五部分 kshv-miR-k12-12-3p促进内皮细胞的迁移和血管生成的分子机制探索 |
| 1.研究内容与方法 |
| 1.1 内容与方法 |
| 1.2 质量控制 |
| 1.3 统计分析 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 4.小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 导师评阅表 |
（5）HB-EGF在骨发育及骨代谢中的作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 研究背景 |
| 1.1 间充质干细胞 |
| 1.1.1 MSC的发现及定义 |
| 1.1.2 MSC的标记 |
| 1.2 MSC参与骨骼系统发育及代谢中的作用调控 |
| 1.2.1 成软骨分化 |
| 1.2.2 MSC成骨分化 |
| 1.3 骨重塑 |
| 1.3.1 骨重塑过程 |
| 1.3.2 促进破骨细胞形成因子 |
| 1.3.3 抑制破骨细胞的因子 |
| 1.4 关节炎相关信号通路 |
| 1.4.1 软骨细胞代谢与自噬 |
| 1.4.2 生长因子与软骨合成代谢及软骨下骨改变 |
| 1.4.3 炎症/氧化应激/血脂异常 |
| 1.5 EGFR信号通路 |
| 1.5.1 EGFR信号通路概述 |
| 1.5.2 EGFR信号在发育中的作用 |
| 1.6 HB-EGF的结构与功能 |
| 1.6.1 HB-EGF结构 |
| 1.6.2 HB-EGF生物学功能 |
| 1.7 研究内容及拟解决的科学问题 |
| 第二章 实验材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 常用实验试剂 |
| 2.1.2 常用试剂盒 |
| 2.1.3 细胞因子及抑制剂 |
| 2.1.4 抗体 |
| 2.1.5 实验中使用的仪器及耗材 |
| 2.1.6 实验小鼠 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 实验小鼠繁殖及鉴定 |
| 2.2.2 荧光实时定量PCR |
| 2.2.3 蛋白质免疫印迹 |
| 2.2.4 细胞生物学相关方法 |
| 2.2.5 组织形态学实验 |
| 2.2.6 流式分析 |
| 2.2.7 统计学处理与分析 |
| 第三章 实验结果及分析 |
| 3.1 Dermo1+ MSC中过表达HB-EGF的小鼠出现明显生长缺陷 |
| 3.1.1 Dermo1-Cre;td Tomato在骨骼中的表达谱 |
| 3.1.2 HB-EGF在MSC及分化细胞中的表达 |
| 3.1.3 Dermo1-HB-EGF小鼠软骨发育异常 |
| 3.1.4 Dermo1-HB-EGF小鼠软骨增殖增加,分化抑制 |
| 3.1.5 Dermo1-HB-EGF小鼠骨代谢异常 |
| 3.2 过表达HB-EGF对破骨细胞不产生影响 |
| 3.2.1 Dermo1-HB-EGF小鼠破骨细胞形成能力及骨吸收能力表现正常 |
| 3.2.2 在破骨祖细胞中过表达HB-EGF并不影响骨吸收 |
| 3.3 MSC中敲除HB-EGF对于骨骼发育的影响 |
| 3.4 软骨细胞中过表达HB-EGF小鼠表型分析 |
| 3.5 HB-EGF调控骨骼发育的机制 |
| 3.5.1 EGFR抑制剂AG1478可以挽救Dermo1-HB-EGF小鼠的骨骼表型 |
| 3.5.2 HB-EGF调控MSC增殖及多向分化潜能 |
| 3.6 其他标记MSC类群中过表达HB-EGF小鼠表型分析 |
| 3.6.1 Prx1在骨中的谱系表达情况 |
| 3.6.2 Prx1-HB-EGF小鼠的骨表型分析 |
| 第四章 讨论 |
| 参考文献 |
| 附录 中英文缩略词表 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间已发表或录用的论文 |
（6）上皮间质转化（EMT）相关分子标记物在咽喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义（论文提纲范文）
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 上皮钙黏蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及在预后中的价值 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 一、材料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 利用基因芯片技术检测喉癌及癌旁组织中mRNA的差异表达 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 上皮间质转化相关分子标记物在咽喉鳞状上皮癌中的表达及其临床意义 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 不足与展望 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 主要缩略词中英文对照(按字母排序) |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
（7）乳腺微浸润性癌临床病理特征和导管内癌浸润机制的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、乳腺微浸润性癌的临床病理特征、分子分型及预后 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 临床病例资料 |
| 1.1.2 主要仪器及试剂 |
| 1.1.3 免疫组织化学 |
| 1.1.4 统计分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 乳腺微浸润性癌与导管内癌临床病理参数间的比较 |
| 1.2.2 乳腺微浸润性癌的分子分型与临床病理特征 |
| 1.2.3 乳腺导管内癌的分子分型与临床病理特征 |
| 1.2.4 随访情况 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 乳腺微浸润性癌的临床表现、组织病理学及鉴别诊断 |
| 1.3.2 乳腺微浸润性癌的雌激素受体、孕激素受体、Her-2 及分子分型 |
| 1.3.3 乳腺微浸润性癌的治疗及预后 |
| 1.3.4 乳腺微浸润性癌研究的创新性及局限性 |
| 1.4 小结 |
| 二、乳腺导管内癌进展至浸润性癌腺上皮发生EMT及肌上皮表型改变 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 临床病例资料 |
| 2.1.2 细胞系 |
| 2.1.3 主要仪器设备 |
| 2.1.4 主要试剂 |
| 2.1.5 主要溶液配制方法 |
| 2.1.6 免疫组织化学 |
| 2.1.7 细胞培养 |
| 2.1.8 Western Blot实验 |
| 2.1.9 细胞样本准备 |
| 2.1.10 观察细胞形态 |
| 2.1.11 提取RNA，qRT-PCR |
| 2.1.12 MTT实验 |
| 2.1.13 划痕实验 |
| 2.1.14 建立共培养体系 |
| 2.1.15 共培养体系的处理及分组 |
| 2.1.16 制备条件培养基 |
| 2.1.17 Transwell实验 |
| 2.1.18 ELISA |
| 2.1.19 统计分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 随机抽样乳腺组织样本患者的基本资料 |
| 2.2.2 患者乳腺组织样本中EMT相关标记物蛋白表达 |
| 2.2.3 患者乳腺组织样本中肌上皮细胞相关标记物蛋白表达 |
| 2.2.4 细胞表型鉴定 |
| 2.2.5 MCF-7 细胞经TGF-β1 处理前后细胞形态的变化 |
| 2.2.6 MCF-7 细胞经TGF-β1 诱导前后EMT相关标志物mRNA的表达情况 |
| 2.2.7 MCF-7 细胞经TGF-β1 诱导前后EMT相关标志物蛋白表达情况 |
| 2.2.8 MCF-7 细胞经TGF-β1 诱导前后细胞增殖能力的情况 |
| 2.2.9 MCF-7 细胞经TGF-β1 诱导前后细胞迁移能力的情况 |
| 2.2.10 TGF-β1 对共培养体系下MDA-MB-231细胞形态的影响 |
| 2.2.11 TGF-β1 对共培养体系下MDA-MB-231细胞增殖能力的影响 |
| 2.2.12 TGF-β1 对共培养体系下MDA-MB-231细胞迁移能力的影响 |
| 2.2.13 TGF-β1 对共培养体系下MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响 |
| 2.2.14 TGF-β1 对共培养条件下MMP-9、IL-6 分泌量的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 乳腺导管内癌研究现状及进展 |
| 2.3.2 EMT在导管内癌进展为浸润性癌中发挥重要作用 |
| 2.3.3 肌上皮细胞表型的改变成为导管内癌进展至浸润性癌的重要原因 |
| 2.3.4 导管内癌进展到浸润性癌的机制假说 |
| 2.3.5 本研究的创新性及局限性 |
| 2.4 小结 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 肌上皮细胞在乳腺癌进展中发挥的作用 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）上皮间质转化标志物E-cadherin及Vimentin在乳腺分叶状肿瘤中的表达及意义（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 英汉缩略词对照表 |
| 致谢 |
| 乳腺分叶状肿瘤免疫表型及发生机制的研究进展 (综述) |
| 参考文献 |
（9）P53、E-cadherin、TGFβ1蛋白表达与早期肺腺癌浸润的相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 统计学分析 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）化疗药物诱导胃癌SGC7901细胞向肿瘤干细胞转化的EMT机制研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 胃癌干样细胞的筛选培养 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 胃癌干样细胞的鉴定 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第三部分 Twist 对肿瘤细胞向 CSC 转化的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第四部分 基于 iTRAQ 的胃癌耐药相关蛋白筛选 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
四、假性上皮瘤样增生病变中上皮-间质连接区基底膜相关成分缺失机制的研究（论文参考文献）
- [1]NQO1基因及阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌增殖、凋亡、侵袭迁移的影响及机制研究[D]. 张青玲. 吉林大学, 2020(08)
- [2]加味丹玄口康对ANE诱导的口腔黏膜上皮细胞KLF4表达的影响[D]. 郑玲. 湖南中医药大学, 2020(02)
- [3]PI3Kδ在PVR中的作用机制及视网膜病变治疗新途径研究[D]. 韩昊特. 浙江大学, 2021(01)
- [4]卡波西肉瘤病毒编码的miR-K12-3p生物学作用和机制研究[D]. 龚海波. 新疆医科大学, 2020(07)
- [5]HB-EGF在骨发育及骨代谢中的作用[D]. 李平. 上海交通大学, 2018(01)
- [6]上皮间质转化（EMT）相关分子标记物在咽喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义[D]. 钱晓云. 南京医科大学, 2017(05)
- [7]乳腺微浸润性癌临床病理特征和导管内癌浸润机制的研究[D]. 王丽. 天津医科大学, 2016(02)
- [8]上皮间质转化标志物E-cadherin及Vimentin在乳腺分叶状肿瘤中的表达及意义[D]. 徐源. 西南医科大学, 2016(05)
- [9]P53、E-cadherin、TGFβ1蛋白表达与早期肺腺癌浸润的相关性研究[D]. 仲林. 大连医科大学, 2014(11)
- [10]化疗药物诱导胃癌SGC7901细胞向肿瘤干细胞转化的EMT机制研究[D]. 严慧. 第四军医大学, 2013(02)